電針對實驗性脊髓損傷后興奮性氨基酸含量的影響

李連欣　張進祿等

李連欣張進祿周東生黃文川李斌

(山東省立醫院骨外科,濟南250021)

摘要以72只新西蘭白兔為實驗動物,采用Allen法制成動物脊髓損傷模型。觀察損傷脊髓中興奮性氨基酸谷氨酸、天門冬氨酸含量的變化及電針治療對這些變化的影響。結果顯示,脊髓損傷后組織中谷氨酸(Glu)、天門冬氨酸含量迅速升高,電針治療對脊髓損傷早期的Glu含量升高有抑制作用,而后期,卻有輕度促進Glu含量升高的作用,這可能是電針發揮療效的部分作用機理。

主題詞電針脊髓損傷/針灸療法谷氨酸鈉/腦脊髓液天冬氨酸/腦脊髓液

興奮性氨基酸是脊髓內的一類神經遞質,主要包括谷氨酸和天門冬氨酸。脊髓損傷后,該類遞質有破壞膜結構、加重原發損傷,形成繼發性損傷的作用^[1]。電針治療對興奮性氨基酸有無作用未見報道,筆者通過動物實驗對該問題進行了初步探討,旨在闡明電針治療脊髓損傷的作用機理。

1材料與方法

1.1動物分組與制備脊髓損傷模型ソ】敵攣骼及淄72只,6～8月齡,體重2.5±0.5 kg,隨機分為3組:電針治療組、單純損傷組、假手術對照組。每組再根據取材時間進一步分為術后1/2小時(A)、6小時(B)、24小時(C)、2周(D)4小組,每小組6只。サゴ克鶘俗橛氳繒脛瘟譜椴捎酶牧糀llen法^[2]制成T_9～10節段脊髓損傷,致傷能量150g·cm。假手術對照組同樣手術打開T_9～10節段椎管,但不損傷脊髓。各組動物均予以傷口止血、縫合。

1.2治療方法サ繒脛瘟譜椴捎蒙蝦２鶪 68052型多用電子治療儀治療。選用長25 mm、直徑0.35 mm的毫針,以C7/T1棘突間隙(大椎穴)和L2/L3棘突間隙(命門穴)為針刺點,順棘突間隙傾斜進針,深度達硬脊膜外。連續脈沖電刺激,頻率1.5 Hz,強度以動物肢體微動為宜,每次治療30 min。A組傷后即刻開始治療1次,B組傷后在1/2 h,4 h治療共2次,C組傷后在1/2 h、6 h、12 h、23 h共治療4次,D組傷后每日早晚各治療1次。ザ哉兆榧暗ゴ克鶘俗椴喚行電針治療,其它處理與治療組相同。

1.3標本采集與測定ザ物采用2%戊巴比妥鈉60 mg/kg經耳緣靜脈注射麻醉過量致死,立即切取損傷段脊髓,準確稱重,冰浴條件下制成組織勻漿,采用日本產日立835型高速自動氨基酸分析儀測定組織勻漿中谷氨酸(Glu)、天門冬氨酸(Asp)的濃度,然后換算成每10 mg脊髓組織中Glu和Asp的含量。

1.4統計方法ジ饜∽镚lu和Asp的含量以均數±標準差(±s)表示,組間比較采用t檢驗,Glu和Asp關系檢驗采用線性相關分析,相關系數采用t檢驗。

2實驗結果

見表1。表1中顯示,術后1/2 h,治療組與單純損傷組的Glu和Asp與對照組相比較差異均有非常顯著意義(P<0.01),治療組Glu與單純損傷組比較,差異有顯著意義;6 h,三組相比差異無顯著意義;24 h,治療組Glu及Asp高于單純損傷組(P<0.01);2周時,治療組Glu高于其他兩組(P<0.05,0.01)。Glu與Asp經相關分析,r=0.6378,P<0.01．

3討論

電針是針刺與電刺激結合的產物,已有許多報道認為電針治療脊髓損傷有效^[3,4]。但對于其作用機制至今尚不清楚。

近年研究發現,脊髓損傷后,可導致興奮性氨基酸過度釋放,進而導致神經元去極化,鉀離子外流,鈣離子內流,蛋白質分解,膜結構破壞,細胞中毒壞死,形成脊髓繼發性損傷^[1,5]。ケ臼笛櫸⑾,脊髓損傷后1/2小時,Asp和Glu含量迅速增加,6小時后,又很快降至接近正常,該結果與文獻報道相似^[6]。分析認為,興奮性氨基酸升高的原因可能是:(1)局部組織缺血缺氧,使耗能的重攝取受到抑制。(2)Glu釋放后,使神經元去極化,促使釋放更多Glu,形成正反饋通路。(3)脊髓受損后,血腦屏障破壞,使血液中的興奮性氨基酸游離積聚于局部組織間隙。

術后1/2小時,電針治療組的Glu低于單純損傷組,這說明,電針對脊髓損傷早期的Glu過度升高有抑制作用,這種抑制作用可能通過以下途徑:(1)通過電針刺激作用改善細胞去極化狀態,抑制Glu及Asp的釋放。(2)改善局部血液循環,使Glu及Asp代謝降解加速。(3)促進神經元重攝取功能。這種抑制作用,可能有助于減輕脊髓繼發性損傷,改善脊髓功能。

術后24小時及2周時電針治療組Glu高于單純損傷組。我們考慮,這是由于電針作為一種興奮性刺激,通過傳入神經,使中樞神經細胞去極化,產生Glu釋放所致。對于這種Glu的輕度升高是有利于脊髓功能恢復還是有反作用,這一問題值得進一步研究。

本實驗還發現,Glu與Asp的變化具有一定相關性(r=0.6378),但電針對于Glu影響較大,而對于Asp影響較小。

4參考文獻

1Panter SS,Yum SW,Faden al.Alteration in Extracellular Amino Acids after Traumatic Spinal Cord Injury.Ann Neurol,1990;27:96

2龐清江.實驗性脊髓損傷模型的建立.中國修復與重建外科雜志,1995;9(21):120

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5Graenen G.The Role of Excitatory Amino Acids in Hypothemic Injury to Mamalian Spinal Cord Neurons.J Neurotrauma,1996;13(12):809

6葉曉健,李宗順,王家林,等.興奮性氨基酸在脊髓繼發性損傷中作用機制的研究.第二軍醫大學學報,1995;16(6):520

(收稿日期:19991206,齊淑蘭發稿)