小鼠腎臟組織的雙向電泳

梁　恒　邢建宇　劉希成　黃黎明

摘要：對小鼠腎組織雙向電泳(2—DE)實驗中的樣品保存、裂解液、膠條泡脹和染色等步驟研究發現：在一73℃，以液態保存的樣品仍需盡量以相同的保存時間用于對比，或使用新處理的樣品使2—DE圖譜反映樣品原先的蛋白質組成；優化的裂解液組成是尿素9．8 mol／L、Tris 40 mmol／L、CHAPS 40 g／L、DTT 23 mmol／L、CA 5g／L、PMSFlmmol／L和ED丁A1mmol／L；膠條泡脹采用主動方式有利于大分子量蛋白質的2—DE分離；銀染色過程中采用充分的水洗步驟使之獲得背景鮮明的2—D圖譜．在優化條件下，高分子區及堿性區蛋白質均得到理想分離，獲得蛋白質點數達1 491個，明顯優于已有文獻方法．關鍵詞：小鼠腎臟組織；雙向電泳；蛋白質組中圖分類號：Q503文獻標識碼：A文章編號：0253—987X(2004)02—0212—05