人ＶＥＧＦ基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的實驗研究
2005-04-29 00:44:03周文武胡建國馬燕琳林玲楊進福唐滔
生命科學研究 2005年4期
周文武 胡建國 馬燕琳 林 玲 楊進福 唐 滔
摘要：為建立hVECF165基因轉(zhuǎn)染大鼠間充質(zhì)干細胞的方法。采用密度梯度離心—貼壁培養(yǎng)法獲Wistar大鼠BMMSC，并測定其生長曲線和表面標志CD34、CD44、CD45及SH3，然后向成骨細胞及脂肪細胞誘導分化；用脂質(zhì)體介導pcDNA3.1-hVECF165轉(zhuǎn)染BMMSC，觀察轉(zhuǎn)染后細胞形態(tài)和生長情況的變化，通過RT-PCR、Western和ELISA鑒定VEGF在細胞中的表達情況。 經(jīng)培養(yǎng)的大鼠BMMSC，CD44、SH3檢測為陽性，CD45、CD34陰性，可誘導分化為成骨細胞和脂肪細胞；經(jīng)RT-PCR、Western和ELISA檢測證實陽離子脂質(zhì)體能成功地將hVEGF165基因轉(zhuǎn)染至大鼠BMMSC中，并獲得有效的表達．真核表達載體pcDNA3.1-hVECF165在BMMSC中獲有效表達，為VEGF基因轉(zhuǎn)染BMMSC移植對心梗后大鼠心功能及心室重構(gòu)的影響提供了實驗依據(jù)。
關鍵詞：骨髓；間充質(zhì)子細胞；VECF；轉(zhuǎn)染
中圖分類號：Q132．3
文獻標識碼：A
文章編號：1007-7847(2005)04—0301—07
