摘要:選擇3個(S1,S2,S3)靶向存活素基因的siRNA序列,構(gòu)建相應(yīng)的RNA干涉載體pTet-U6-S1,pTet-U6-S2,pTet-U6-S3,將它們分別轉(zhuǎn)染HeLaS3細(xì)胞,采用RT-PCR和Western印跡檢測分析轉(zhuǎn)染對HeLa S3細(xì)胞內(nèi)源存活素表達(dá)的影響,結(jié)果表明,針對存活素3’端非編碼區(qū)序列的干涉載體pTet-U6-S3轉(zhuǎn)染細(xì)胞后,存活素的mRNA水平和蛋白水平均明顯下調(diào),抑制水平高于S1序列。與對照相比,S1,S2和S3片段對存活素mRNA的抑制率分別是20%,12.5%和40%,對存活素蛋白的抑制率分別是39.2%,17.0%和58.6%。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明,抑制存活素表達(dá)后,HeLaS3細(xì)胞凋亡比例顯著提高。
關(guān)鍵詞:存活素;RNA干涉;凋亡;HeLa S3細(xì)胞
中圖分類號:Q3;R73
文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
文章編號:1671-5489(2005)05-0691-05