甜櫻桃ＳＳＲ體系的建立、優(yōu)化及應(yīng)用
2007-01-01 00:00:00張琪靜張新忠李賀谷大軍李春敏張志宏
果樹學(xué)報(bào) 2007年6期
摘 要：為摸索適宜甜櫻桃的SSR反應(yīng)體系，利用正交設(shè)計(jì)對(duì)Mg2+、dNTPs、引物、Taq酶和模板DNA等5種因素4個(gè)水平進(jìn)行篩選和優(yōu)化，20μL反應(yīng)體系中，Mg2+、dNTPs和引物的最適濃度為1.5mmol/L、0.2mmol/L、0.4μmol/L，Taq酶宜加入1U，模板DNA應(yīng)加入10～40ng；引物的最佳退火溫度為56.0—62.8℃。用10對(duì)引物及建成的反應(yīng)體系對(duì)10個(gè)供試品種擴(kuò)增，6％的非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，品種間DNA譜帶多態(tài)性豐富，共有29個(gè)等位位點(diǎn)，證實(shí)該體系穩(wěn)定可靠。
關(guān)鍵詞：甜櫻桃；正交試驗(yàn)；S5R；反應(yīng)體系
中圖分類號(hào)：S662.5
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A
文章編號(hào)：1009—9980(2007)06—770—04
