ＶＥＧＦ在卵巢上皮性腫瘤中的表達

摘 要 目的：探討VEGF在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達和臨床意義。方法：應用免疫組化法檢測45例卵巢上皮癌，11例卵巢良性上皮性腫瘤，7例正常卵巢組織中VEGF的表達，及其與臨床病理參數間的相關性。結果：卵巢上皮癌中VEGF的陽性表達率比良性腫瘤（P=0.021）和正常卵巢組織中的表達率明顯增高；在卵巢上皮癌組織中，VEGF的陽性表達率隨著臨床分期的增加而升高，但無統計學差異(P＝0.371)；VEGF的表達率與盆腔淋巴結轉移正相關（P=0.007）。結論：VEGF在卵巢上皮癌中呈高表達，且與盆腔淋巴結轉移密切相關，表明VEGF在卵巢上皮癌的發生、發展及轉移過程中可能發揮重要作用。

關鍵詞 卵巢腫瘤 VEGF

資料與方法

一般材料：選自西安交通大學第二醫院及陜西省紡織醫院2000~2005年手術切除的卵巢組織標本63例。病理組織學診斷卵巢惡性上皮性腫瘤45例，卵巢良性上皮性腫瘤11例，正常卵巢7例。患者年齡32~74歲，平均52.3歲。標本經10%甲醛固定后常規石蠟包埋，切片厚度4 μm。所有標本均常規HE染色復檢。卵巢惡性腫瘤患者術前均未接受放射治療或化學治療。按WHO分類標準進行分類。組織學分型: G1級10例，G2級21例，G3級14例。根據國際婦產科協會(FIGO) 1985年統一制定的標準進行臨床分期: Ⅰ期12例，Ⅱ期8例，Ⅲ期18例，Ⅳ期7例。

實驗方法：所有標本經10%甲醛常規固定，石蠟包埋，4μm連續切片。分別進行HE染色和免疫組化染色。鼠抗人VEGF單克隆抗體，為美國產品。免疫組化SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自北京。本實驗采用免疫組化SP法，組織切片常規二甲苯脫蠟，乙醇梯度水化，過氧化動物血清封閉組織內非特異抗原，室溫孵育10分鐘;加入一抗，4℃冰箱過夜;加入二抗，37℃恒溫箱中孵育30分鐘;加入鏈霉素抗生物素-過氧化物酶溶液，37℃恒溫箱中孵育30分鐘;DAB顯色，蘇木素復染，二甲苯透明，中性樹膠封片。

質量控制：每個染色流程均設對照作為質量控制標準，陽性對照采用已知的陽性組織切片，陰性對照采用PBS代替一抗。

判定標準： VEGF蛋白陽性產物定位于細胞漿。將陽性細胞按其染色數量和顯色程度分為四級。在高倍鏡下隨機選取10個視野，分別計數100個腫瘤細胞，將陽性細胞所占的百分數：≤5％、5%~35％、36%~65％、≥65％分別評為0、1、2、3分；根據細胞內出現黃色的深淺將無顯色、淺黃色、桔黃色、棕黃色分別計為0、1、2、3分。兩項相加除以2，作為該切片的最終評分，將0、1、1.5~2、2.5~3分別評為-、＋、＋＋、＋＋＋［１］。

統計學處理：所有數據用SPSS11.5統計軟件分析，兩樣本率的比較用 X2 檢驗，各指標間相關性分析用Spearman相關分析，rs表示相關度，P<0.05有統計學意義。

結 果

卵巢上皮性腫瘤組織中VEGF的表達情況：VEGF特異地定位于腫瘤細胞的細胞漿中，表現為棕黃色陽性顆粒。卵巢上皮性腫瘤組織中VEGF的表達情況見表1，惡性組中VEGF的陽性表達率明顯高于良性組（P＝0.021）和對照組。

P值被估計：良性組與惡性組之間VEGF與卵巢上皮癌臨床病理參數間的關系：VEGF表達與卵巢上皮癌臨床病理參數間的關系見表2。VEGF在45例卵巢上皮癌組織中的陽性表達率與盆腔淋巴結轉移呈正相關（rs=0.396），且有顯著性差異(P＝0.007)；VEGF表達隨臨床分期的增加而升高，但無統計學意義（P=0.371）；與患者年齡、病理類型及病理學分級間無相關性(P>0.05)。

討 論

本研究表明，VEGF在卵巢癌組織中高水平表達，表達率為77.8％，與盆腔淋巴結的轉移呈正相關，提示在腫瘤生長過程中，VEGF表達增加，導致血管形成加快，出現大量結構和功能異常的腫瘤血管，形成轉移，這與Erik等的研究結果相一致，其研究發現交界性卵巢腫瘤出現鏡下微浸潤時，VEGF濃度是該組中位數的10倍，并且出現不良結局。在研究VEGF的表達與卵巢上皮癌臨床分期的關系時，Shen等發現， 在卵巢腫瘤的各期中均有VEGF 表達， 但表達的程度有顯著差異。Brustmann 等也有類似的報道， 同時， 其陽性表達率還與腫瘤細胞有絲分裂活性呈正相關。故可將VEGF 作為一個反映卵巢腫瘤惡性程度的生物學指標。本實驗VEGF在中、低分化及Ⅲ、Ⅵ期的卵巢上皮癌組織中陽性表達率高于在高分化及Ⅰ、Ⅱ期的陽性表達率，但無統計學差異，這或許與各期病例較少有關。VEGF表達與病理類型間無統計學相關性。

總之，VEGF及其受體是卵巢腫瘤生長和轉移中最重要的調節因子，但不是唯一的，所以其與其他相關因子之間的作用及其與VEGF系統之間的關系，還有待于進一步研究。

參考文獻

1 樂杰，主編.婦產科學.第6版.北京：人民衛生出版社，2005，31~311