Ｃ－ｆｏｓ、Ｃ－ｊｕｎ在外陰鱗癌中的表達及意義

摘 要 目的：探討癌基因C-fos、C-jun在外陰鱗癌發生，發展中的意義。方法：采用免疫組化法對30例外陰鱗癌，40例外陰上皮內瘤變的C-fos、C-jun的表達情況進行檢測，并與正常皮膚對照。結果：C-fos、C-jun在正常組織不表達，外陰鱗癌表達的陽性率與癌組織分化程度有關（P＜0.05），腫瘤的分化程度越低，其表達水平越高并與淋巴結轉移有關（P＜0.05）。結論：C-fos和C-jun與外陰鱗癌的發生發展密切相關，可能是反映外陰鱗癌生物學行為和預后的重要標記物。

關鍵詞 外陰鱗癌 C-fos C-jun 免疫組織化學

資料與方法

收集1995年1月～2005年1月于中國醫科大學附屬第一醫院病理教研室經手術切除及活檢存檔的臘塊。外陰鱗癌30例，外陰上皮內瘤變40例，其中VINⅠ～VINⅡ共20例，VINⅢ 20例，外陰正常皮膚10例。年齡30～75歲。

方法：采用免疫組織化學s-p法，連續切片，厚度3μm，切片經常規脫臘，水化后，高溫修復抗原，兔抗人C-fos（福州邁新公司的多克隆抗體），鼠抗人C-jun（北京中杉公司單克隆抗體），一抗工作濃度為1∶125，DAB染色，PBS代替一抗為陰性對照。

陽性標準：C-fos、C-jun的陽性顆粒呈淺棕色至深棕色，位于細胞核內。高倍鏡下選10個具有代表性的視野，每個視野100個細胞。根據陽性細胞占腫瘤細胞的比例，將其分為：①陽性細胞<10%為陰性（-）。②陽性細胞數10%～25%為低度表達（+）。③陽性細胞數25%～50%為中等強度表達（++）。④陽性細胞數>50%為強陽性表達（+++）。

統計方法：使用stata4.0統計軟件，采用X²檢驗，P<0.05為差異有顯著意義。

結 果

外陰鱗癌組織(VSCC)中C-fos及 C-jun的陽性表達率分別為66.7%、50%。VINⅢ中C-fos及 C-jun的陽性表達率分別為45%，35%。在VINⅠ～VINⅡ中的表達陽性率分別為10%、5%。正常皮膚組織中未見C-fos及 C-jun的蛋白的表達。VSCC與VINⅢ無顯著性差異（P＞0.05），VINⅢ與VINⅠ～Ⅱ有顯著性差異（P＜0.05），VSCC與正常皮膚有顯著性差異（P＜0.05）。

C-fos及 C-jun蛋白的表達與外陰鱗癌病理和臨床指標之間的關系隨著外陰鱗癌組織分化程度的降低，C-fos及C-jun蛋白的表達也隨之升高。高低分化的表達程度有顯著性差異（P＜0.05）。有淋巴結轉移的陽性率與無淋巴結轉移的陽性率有顯著性差異（P＜0.05）。但與年齡大小無顯著性差異（P＞0，05）。

C-fos、C-jun的蛋白表達的相關性：經免疫組化檢測，發現同一側外陰鱗癌，VINIII中C-fos、C-jun兩種癌基因蛋白的表達協同性較強。其中兩者均為陽性有17例（34%），均為陰性為21例（42%），C-fos 陽性、C-jun陰性9例（18%），而C-fos 陰性、C-jun陽性的3例（6%）。

討 論

Jun和Fos基因蛋白表達產物定位于細胞核，目前已知有3種Jun蛋白(C-jun，JunB 及JunD )及4種Fos蛋白(C-fos，FosB，Fra-1及Fra-2)，參與構成轉錄激活因子(Ap-1)，其中以C-jun及C-fos為主，C-fos與C-jun以亮氨酸拉鏈結構的形式形成同源或異源二聚體，這種同源或異源二聚體具有轉錄激活活性，故又稱轉錄因子(Ap-1)。以C-jun/C-fos二聚體形式的Ap-1生物學活性最強。作為轉錄因子的Ap-1與DNA結合后，可在轉錄水平調節下游靶基因的表達，參與細胞增殖及轉化。研究表明，Ap-1與細胞增殖相關，在腫瘤轉化乃至逆轉中均起關鍵作用。C-fos 屬于轉錄因子類的原癌基因，是多基因家族的成員之一。C-fos基因由5個外顯子組成，其成熟的轉錄產物為2200bp，表達產物Fos由380個氨基酸組成，分子量為55000bpo。 Fos本身不能形成二聚體，它只能與jun形成異二聚體(Ap-1)。癌基因C-fos編碼的蛋白質具有亮氨酸拉鏈。Fos，Jun，Ap-1都具有拉鏈旁的DNA結合區，具有共同序列TGA(C/G)TCA，它們的轉錄激活區具有負電性的特征及ɑ螺旋的結構特征，故人們普遍認為它們有共同作用的對象或靶蛋白^[1，2]。本研究與文獻報道相符合，提示C-fos、C-jun基因是預后不良因子其表達在外陰鱗癌的轉移過程中起重要作用。在比較研究了C-fos和C-jun的表達情況后發現，兩種核蛋白癌基因存在共同的表達，與昆山第一醫院李氏在皮膚癌中的文獻報道相似^[3]。由于C-fos和C-jun的半衰期長，故C-jun可與自身及c-fos形成同源和異源二聚體。已證明轉錄因子Ap-1是C-fos和C-jun二聚體，通過亮氨酸拉鏈與DNA結合，這些二聚體是轉錄水平上的不同信號傳遞的“中轉站”，可與不同類別的轉錄因子及核受體相互作用，共同調節細胞的生長、發育。故C-fos和c-jun的共同表達不難理解。本研究認為，外陰鱗癌的發生可能與多種癌基因表達的增強有關。兩種核蛋白的癌基因的表達增強并且共同表達，很有可能是細胞不斷增殖的觸發點，它們相互作用，并影響于其他基因的表達，使細胞最終增殖失控，發生癌變。采用免疫組化技術對C-fos和C-jun進行定位研究，有助于了解其功能，還可能有助于尋找新的高特異性的導向載體，在外陰鱗癌的治療方面發揮作用。目前國外學者已開始研究腫瘤壞死因子(TNF)及白細胞介素6(IL-6)等物質對Fos及其產物的影響，并發現可抑制Fos的表達。

參考文獻

1 張式暖，王艷華，王亞利，等.食管癌及癌前病變組織中癌基因和間質反應的研究.濰坊醫院學報，1999，21(1):16.

2 張浩，郭仁宣，郭克建，等.C-fos基因在膽管細胞性肝癌中的表達及其預后關系的研究.中華肝膽外科雜志，1999，5(4):284.

3 李海，李維鑫，顏鳴，等.C-fos和C-jun蛋白在鱗狀細胞皮損中的表達及意義.現代實用醫學，2004，16（9）：527-528.