Ｂｃｌ－２、Ｃ－ｆｏｓ在外陰鱗癌中的表達(dá)及意義

摘 要 目的：探討癌基因Bcl-2、C-fos在外陰鱗癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。方法：采用免疫組化法對(duì)30例外陰鱗癌，40例外陰上皮內(nèi)瘤變(其中VINⅠ－VINⅡ20例，VINⅢ20例)的Bcl-2、C-fos的表達(dá)情況進(jìn)行檢測(cè)，并與正常皮膚對(duì)照。結(jié)果：Bcl-2、C-fos在正常組織不表達(dá)，在外陰鱗癌中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為73.3％和66.7％，在VINⅢ的表達(dá)陽(yáng)性率分別為55％和45％，在VINⅠ－VINⅡ的表達(dá)陽(yáng)性率分別為5%和10%。外陰鱗癌表達(dá)的陽(yáng)性率與癌組織分化程度有關(guān)（P<0.05），腫瘤的分化程度越低，其表達(dá)水平越高并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：Bcl-2、C-fos與外陰鱗癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。可能是反映外陰鱗癌生物學(xué)行為和預(yù)后的重要標(biāo)記物。

關(guān)鍵詞 外陰鱗癌 Bcl-2 C-fos 免疫組織化學(xué)

我們采用S-P免疫組化方法檢測(cè)Bcl-2、C-fos在外陰鱗癌組織中的表達(dá)，并探討其在外陰鱗癌發(fā)生發(fā)展中的作用和意義。

資料與方法

材料：收集1995年1月~2005年1月于中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理教研室經(jīng)手術(shù)切除及活檢存檔的臘塊。外陰鱗癌30例，高分化11例，中分化10例，低分化9例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移13例，無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移17例。外陰上皮內(nèi)瘤變40例，其中VINⅠ-VINⅡ共20例，VINⅢ 20例，外陰正常皮膚10例。年齡30~75歲之間。

方法：采用免疫組織化學(xué)s-p法，連續(xù)切片，厚度3μm，切片經(jīng)常規(guī)脫臘，水化后，高溫修復(fù)抗原，小鼠單克隆抗Bcl-2抗體為美國(guó)產(chǎn)品，兔抗人C-fos系福州產(chǎn)的多克隆抗體。一抗工作濃度為1：125，DAB染色，PBS代替一抗為陰性對(duì)照。

陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)：用光學(xué)顯微鏡檢查顯色反應(yīng)。Bcl-2陽(yáng)性時(shí)，細(xì)胞漿呈棕黃色顆粒。陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)：每張切片陽(yáng)性腫瘤細(xì)胞數(shù)＜5%為陽(yáng)性；＜25％為弱陽(yáng)性（＋）；25％~50％為明顯陽(yáng)性（＋＋）；>50％強(qiáng)陽(yáng)性（＋＋＋）。C-fos基因產(chǎn)物呈棕黃色顆粒分布于病變細(xì)胞核上，顏色較BcL-2為深。記錄及判定標(biāo)準(zhǔn)與BcL-2相同。

統(tǒng)計(jì)方法：使用SPSS10.0.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用X²檢驗(yàn)，p<0.05為差異有顯著意義。

結(jié) 果

外陰鱗癌組織(VSCC)中Bcl-2、C-fos的陽(yáng)性表達(dá)率分別為73.3％，66.7％。VINⅢ中Bcl-2、C-fos的陽(yáng)性表達(dá)率分別為55％，45％。在VINⅠ-VINⅡ中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為5%，10%。正常皮膚組織中未見Bcl-2、C-fos的蛋白的表達(dá)。VSCC與VINⅢ無(wú)顯著性差異（P>0.05），VINⅢ與VINⅠ－Ⅱ有顯著性差異（P<0.05），VSCC與正常皮膚有顯著性差異（P<0.05）（見表）。

C-fos及 C-jun蛋白的表達(dá)與外陰鱗癌病理和臨床指標(biāo)之間的關(guān)系：隨著外陰鱗癌組織分化程度的降低，Bcl-2、C-fos蛋白的表達(dá)也隨之升高，高低分化的表達(dá)程度有顯著性差異（P<0.05）。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率與無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率有顯著性差異（P<0.05）。但與年齡大小無(wú)顯著性差異（P>0，05）。

討 論

Bcl-2 首先在B細(xì)胞相關(guān)的惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)，該腫瘤細(xì)胞18號(hào)染色體上的Bcl-2異位到14號(hào)染色體上，與免疫球蛋白的重鏈基因串聯(lián)，形成融合基因，從而使Bcl-2基因在B細(xì)胞內(nèi)異常表達(dá)，該基因編碼由239個(gè)氨基酸組成的分子量為26KD的Bcl-2a和由205的氨基酸組成的分子量為22kd的Bcl-2β蛋白。近年來研究發(fā)現(xiàn)Bcl-2基因是細(xì)胞凋亡調(diào)空中的重要基因。Bcl-2基因在腫瘤發(fā)生中發(fā)揮作用不是通過加速細(xì)胞有絲分裂，而是延長(zhǎng)其生存期。這就為腫瘤的發(fā)生及發(fā)病因素提供了積聚條件，Bcl-2抑制凋亡作用途徑可能是阻止引起DNA損傷信號(hào)傳導(dǎo)給凋亡基因。導(dǎo)致DNA受損的細(xì)胞持續(xù)存活，突變的產(chǎn)物聚集。

C-fos是核內(nèi)癌基因，它定位與14號(hào)染色體上（14q），C-fos包含5個(gè)外顯子，其3'末端非編碼區(qū)的缺失，可使C-fos激活，C-fos是由380個(gè)氨基酸組成，是編碼為55KD的核內(nèi)蛋白質(zhì)。當(dāng)基因被激活后迅速轉(zhuǎn)錄mRNA然后進(jìn)入胞質(zhì)中，合成C-fos蛋白，之后較快地進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)節(jié)細(xì)胞核內(nèi)癌基因，所以稱為核內(nèi)癌基因。在細(xì)胞正常增長(zhǎng)的情況下，如果C-fos基因過量表達(dá)，可破壞細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移的調(diào)節(jié)，當(dāng)受到非某些因素影響后，某結(jié)構(gòu)表達(dá)失常，從而被激活，此時(shí)C-fos具有腫瘤轉(zhuǎn)化活性。所以檢測(cè)基因產(chǎn)物有助于從蛋白水平認(rèn)識(shí)腫瘤的本質(zhì)。

本研究用免疫組化方法發(fā)現(xiàn)，Bcl-2、C-fos蛋白在正常外陰皮膚不表達(dá)，在外陰鱗癌中的表達(dá)分別為73.3%和66.7%。在VIN Ⅲ中的表達(dá)為分別為55%和45%，表明癌基因在外陰鱗癌的發(fā)生發(fā)展有著密切的關(guān)系。同時(shí)，Bcl-2、C-fos在外陰低分化鱗癌中的表達(dá)水平明顯高于高分化鱗癌（P<0.05），有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的陽(yáng)性率（P<0.05）于文獻(xiàn)報(bào)道相符合，提示Bcl-2、C-fos基因是預(yù)后不良因子，其表達(dá)在外因鱗癌的轉(zhuǎn)移過程中起重要作用，目前認(rèn)為腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是多基因損傷機(jī)器編碼產(chǎn)物的協(xié)同作用結(jié)果，外陰鱗癌某些生物學(xué)特性的獲得至少需幾種相失基因的聯(lián)合作用。我們研究提示Bcl-2、C-fos基因在外陰鱗癌發(fā)生發(fā)展過程中具有協(xié)同作用。

參考文獻(xiàn)

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