１０種殺菌劑對板栗疫病菌的抑制作用

摘要 為了篩選防治板栗疫病的高效、低毒、低殘留殺菌劑，采用菌絲生長速率法測定了10種殺菌劑對栗疫病菌菌絲生長的抑制效果。結果表明，苯醚甲環唑+丙環唑、苯醚甲環唑、咯菌腈、咪鮮胺和多氧霉素對栗疫病菌具有很強的抑制作用，EC₅₀在0.0148～8.752 ug/mL之間，為生產上有效地防治板栗疫病提供了依據。

關鍵詞 板栗疫病；栗疫病菌；殺菌劑；生物測定

中圖分類號 S436.64

由栗疫病菌[Cryphonectria parasitica(Murr．)Barr]引起的板栗疫病又稱干枯病、胴枯病、潰瘍病，是板栗的主要病害，主要危害樹干和主枝，引起樹皮腐爛，少數枝梢枯萎。19世紀末20世紀初，該病使美洲栗遭到滅種的威脅。板栗疫病在我國分布廣泛，多數板栗產區均有不同程度的發生。防治板栗疫病使用的藥劑一般有代森錳鋅(Ditha-nero-45)、石硫合劑、抗菌劑402、70％甲基托布津、多菌靈和武夷菌素等等，缺乏有效的新型高效殺菌劑，生產上對板栗疫病的防治也不夠重視。中國板栗產量為世界之最，年均增長率約為6．8％，到2005年底，我國板栗種植面積達125萬hm²，占世界種植面積的38％，總產量達82.5萬t，約占世界產量的3/4。板栗疫病的防治問題也顯得更為突出。本試驗旨在通過室內生物測定，篩選出對栗疫病菌具有高效、低毒、低殘留的新型殺菌劑，為板栗疫病的田間防治提供依據。

1 材料與方法

1．1 試驗材料

1．1．1 供試菌株

采用常規組織分離法，從北京地區板栗疫病的樹干病組織中分離栗疫病菌，本試驗所用23號菌株經致病性測定和單分生孢子的分離，保存在PDA培養基上備用。

1．1．2 培養基

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基(PDA)。

1．1．3 供試殺菌劑

共10種，分別為嘧菌酯(25％阿米西達懸浮劑，瑞士先正達作物保護有限公司)、惡霉靈+甲霜靈(30％瑞苗清水劑，日本三共AGRO株式會社)、氫氧化銅(57.6％冠菌清干粒劑，澳大利亞新農有限公司)、苯醚甲環唑+丙環唑(30％愛苗乳油，瑞士先正達作物保護有限公司)、多氧霉素(10％寶麗安可濕性粉劑，日本科研制藥株式會社)、苯醚甲環唑(10％世高水分散粒劑，瑞士先正達作物保護有限公司)、精甲霜靈+代森錳鋅(68％金雷水分散粒劑，瑞士先正達作物保護有限公司)。98％咪鮮胺(施保克)和95.8％咯菌腈(適樂時)2種原藥由中國農業大學種子病理與藥理實驗室提供。以常規殺菌劑98％多菌靈作為藥劑對照。

1．2 試驗方法

采用菌絲生長速率抑制法。將供試殺菌劑分別稀釋成系列濃度梯度的母液，按一定比例加入到融化好的PDA培養基中，混勻后倒入滅菌的培養皿中，制成系列濃度梯度的含藥培養基平板。供試的栗疫病菌菌株在PDA培養基上培養，菌落長至培養皿近邊緣時，用直徑5 mm的打孔器在菌落邊緣打取菌落塊，移置到上述含藥的培養基平板中央，每皿接一個菌落塊。每個濃度重復3皿，以加入同等無菌水或溶劑的PDA培養基為對照。25℃恒溫下培養5 d后測量菌落直徑。按以下公式計算藥劑對菌絲生長的抑制率：

菌絲生長抑制率＝(對照菌落直徑－菌餅直徑)－(處理菌落直徑－菌餅直徑)/(對照直徑－菌餅直徑)×100％。

將菌絲生長抑制率轉換成幾率值(y)、藥劑濃度(ug/mL)轉換成以10為底的對數值(x)，作回歸直線，求出毒力回歸方程(y=a+bx)和相關系數(r)，計算殺菌劑對栗疫病菌菌絲生長抑制的有效中濃度(EC₅₀，以此表示殺菌劑對栗疫病菌抑制作用的強弱。

2 結果與分析

殺菌劑對板栗疫病菌菌絲生長的抑制作用測定的結果表明，10種殺菌劑對栗疫病菌分別表現出不同的抑制效果，抑制作用差異較大，其中苯醚甲環唑+丙環唑、苯醚甲環唑、咯菌腈3種殺菌劑對栗疫病菌的菌絲生長具有極強的抑制作用，抑制效果明顯優于常規殺菌劑多菌靈，EC₅₀分別為0.014 8、0.035 8ug/mL和0.067 6ug/mL；咪鮮胺的抑制作用與多菌靈相近，EC₅₀為0.325 6ug/mL；多氧霉素對栗疫病菌的抑制效果也比較好，EC₅₀為8.752ug/mL；精甲霜靈+代森錳鋅的抑制作用次之，EC₅₀為20.883ug/mL。其他3種殺菌劑氫氧化銅、嘧菌酯和惡霉靈+甲霜靈的抑制作用較差，EC₅₀值遠高于其他7種殺菌劑。10種殺菌劑對栗疫病菌的毒力曲線見圖1，對栗疫病菌的抑制作用的回歸方程、相關系數和抑制中濃度EC₅₀見表1。

3 討論

本試驗測試了10種殺菌劑對栗疫病菌菌絲生長的抑制效果，篩選出苯醚甲環唑+丙環唑、苯醚甲環唑、咯菌腈、咪鮮胺和多氧霉素等對板栗疫病菌均表現出很強的抑菌活性。這些殺菌劑都是一些新型的高效、低毒、低殘留殺菌劑，它們有著不同的作用方式，如咯菌腈通過抑制葡萄糖磷酰化有關的轉移，并抑制真菌菌絲體的生長，最終導致病菌死亡。咪鮮胺、苯醚甲環唑等制甾醇的生物合成，多氧霉素則干擾真菌細胞壁幾丁質的生物合成。其有效成分也有所區別(表1)，所得結果能夠反映不同類型殺菌劑對栗疫病菌的抑制作用程度。本試驗結果為板栗疫病的田間藥劑防治和藥劑的輪換使用提供了試驗依據。各板栗園可根據實際情況從中選擇適宜的殺菌劑種類進行合理用藥，如采用刮樹皮后涂藥或涂藥泥等方式進行。