摘要:對澳洲矮牛進行了胚胎移植試驗。4頭供體牛與22頭受體牛經同期發情處理,全部達到同步。超排處理后3頭有反應,共沖出胚胎13枚,平均4.3枚/頭,國產FSH的超排效果與進口的無明顯差異;12枚胚胎直接進行了鮮胚移植。根據是否返情初步判定移植成功率為83.3%。
關鍵詞:胚胎移植;澳洲矮牛;同期發情
中圖分類號:S823.3+6 文獻標識碼:A 文章編號:1007-273X(2008)02-0006-01
澳洲矮牛是澳大利亞對安格斯牛進行定向選育、于1992年正式育成的肉牛品種,目前主要分布在澳大利亞、新西蘭、加拿大、美國等國。澳洲矮牛的特點是體形矮小、被毛黑色、脖頸粗短,肉用性能良好,成年體重♂600kg、♀450kg,體高1.0~1.1m。湖北省于2003年引進該品種,通過幾年的飼養,證明其抗病力、適應能力強,耐粗飼,對改良當地黃牛效果明顯。
在自然條件下,與豬、禽等家畜家禽相比,牛的繁殖效率十分低下,一般在18月齡前后才能配種,懷孕期接近1年,每胎只能產1頭。產犢間隔長達13~15個月。而通過胚胎移植技術的應用,以地方黃牛為受體。則可使良種肉牛的繁育速度提高3-5倍,為推廣應用提供更多種牛。
關于澳洲矮牛的胚胎移植,國內還未見相關報道,該品種對PG、FSH等試劑的反應程度如何,也缺乏相關數據。正是為了澳洲矮牛品種的快速繁育,探索該品種的胚胎生產程序,我們開展了本次胚胎移植試驗(鮮胚移植),現將結果報告如下。
1 材料與方法
1.1 時間與地點
2007年9-10月,在湖北省麻城市進行。
1.2 材料
1.2.1 牛 供體:純種澳洲矮牛成年經產母牛4頭,產犢時間為2007年5-6月份。受體:周邊農戶散養的本地黃牛(大別山黃牛)22頭,產犢時間為2007年2-7月份。
1.2.2 儀器設備二路式沖胚槍、擴張棒、黏液去除棒、集卵杯、水浴鍋、溫度計、顯微鏡、胚胎移植槍等。
1.2.3 試劑藥品FSH用了2種,分別產于新西蘭和寧波:PGF2α來自上海計生所;沖胚液購自北京潭河公司;其他藥品主要有靜松靈等。
1.3 方法
1.3.1 前期處理 參考國內其他肉牛品種的胚胎移植方法,用PG做同期、FSH做超排,供體3次同期、受體2次,同期間隔10d,供體最后1次同期前3d開始超排。PG用量8mL/次·頭,上、下午各4mL。新西蘭產FSH為小瓶裝,20mL/瓶(1頭份),按4:3:2:1遞減、分4d注射,每日2次;寧波產FSH為安瓿裝,100IU/支,按300IU、300IU、200IU、200IU,分4d注射,每日1次,兩種FSH分別處理2頭供體。
1.3.2 沖胚與移植 直腸清糞,檢查卵巢上黃體情況。確定是否沖胚。擴張子宮頸。去除黏液,插入二路式沖卵器。沖胚液事先加熱到35℃。集卵杯收集胚胎,顯微鏡下檢查,符合質量標準的胚胎裝槍。受體牛檢查卵巢,對黃體發育好的進行鮮胚移植。
1.3.3 妊娠診斷 移植后13-16d觀察返情情況。初步確定受孕情況。90d后通過直腸檢查進行準確診斷。
2 結果與分析
2.1 同期發情
22頭受體與4頭供體經過2-3次處理,最終全部達到同步,前后相差不超過24h,充分表明供、受體對PG反應良好。
2.2 超數排卵
供體牛超排情況見表1。

由表1可以看出,209#與241#的黃體數達到8個,超排反應明顯;236#反應微弱,僅有2個黃體;240#基本沒有反應。不適宜進行沖胚處理。有反應的3頭牛總計沖出胚胎13枚,平均4.3枚/頭,但個體間差異極顯著。而241#的黃體發育好,但沖胚數量少,可能與實際操作有關系。雖然國產藥物處理后的沖胚數量多于進口藥物處理組,但從黃體反應來看,兩種藥物應該沒有顯著差異,由于樣本數量較少,所以還需進一步驗證。
2.3 鮮胚移植與妊娠診斷
共移植胚胎12枚。經移植后觀察,有2頭受體返情,預期受胎率為83.3%。
3 小結與討論
3.1 澳洲矮牛的胚胎移植
參試的4頭供體對PG反應良好,同期發情率100%,可以按此劑量進行下次胚移。本次試驗用的劑量為3×(4mL+4mL),下次可以嘗試設計3×(4mL+2mL)的處理,減少藥物投入。供體對FSH的反應在個體間差異十分明顯,最多的沖出10枚胚胎,最少的僅有1個黃體(不適宜進行沖胚),擴大供體的群體數量,是保證胚胎能批量生產的基礎。盡管沖胚數有差異,但根據黃體情況判斷,國產FSH和進口的超排效果應該沒有顯著差異,當然這需要擴大樣本數量進行進一步的驗證。操作人員的技術熟練程度是胚胎移植工作成功的關鍵,241#是本次操作的第1頭,沖出的溶液呈現淡紅色,表明子宮黏膜有少量損傷和出血,影響了沖胚效果,209#是操作的第3頭,效果最好。較高的預期受胎率(83.3%),與樣本數量小有關系,當然更需要3個月后的直檢確診。
3.2 澳洲矮牛的利用
澳洲矮牛是小型肉牛品種,成年體重僅500-600kg,遠低于西門塔爾、夏洛萊等大型肉牛品種。盡管其體型小,但該品種具有生長速度快、育肥性能好、肉質好、適應性強等優勢,尤其是我國南方黃牛的體型較小,大型品種的改良后代容易發生難產,而用澳洲矮牛則可有效避免這一問題。