黏蟲體內兩種微管蛋白基因ｃＤＮＡ序列的克隆與序列分析
2008-04-29 13:14:03樊東秦松柏樸冬花許艷麗
植物保護 2008年4期
樊 東 秦松柏 樸冬花 許艷麗
摘要以黏蟲4齡幼蟲為材料提取總RNA，利用RT—PCR和eDNA末端快速擴增技術(RACE)，分別擴增得到該蟲的α和β微管蛋白基因的cDNA序列各1條。其中α微管蛋白基因的eDNA序列1443個堿基，包括一個1353個堿基的開放閱讀框，編碼一個含450個氨基酸的蛋白，分子量約為50.0ku。氨基酸的142～148位存在一個微管蛋白標志信號片段GGGTGSG，在氨基酸序列的C－端有一個酪氨酸殘基，N－端存在一個對轉錄后調控非常重要的保守區MRECI序列，以上特點與其他昆蟲α微管蛋白氨基酸序列相同。黏蟲β微管蛋白基因cDNA序列含1906個堿基，開放讀碼框1 344個堿基，編碼氨基酸447個，分子量約為50.2ku，等電點4.75。1～4個氨基酸MREI為β微管蛋白轉錄后調控信號，140～146GGGTGSG位同樣存在一個微管蛋白標志信號片段。序列比對表明，克隆的α和β微管蛋白基因與其他昆蟲的a和p微管蛋白基因在核苷酸和氨基酸水平上都是高度同源的，黏蟲與家蠶(Bombyx morti)α微管蛋白的氨基酸序列同源性達到99.3％，與其他3種夜蛾科昆蟲α微管蛋白的氨基酸序列同源性更是達到100％。黏蟲與家蠶β微管蛋白的氨基酸序列同源性達到98.7％，與煙草天蛾p微管蛋白的氨基酸序列同源性達到99.6％。兩個基因的cDNA序列已經登錄GenBank并獲得登錄號分別為EUlOOOl6和EU234504。
關鍵詞黏蟲；α微管蛋白；β微管蛋白；克隆；序列分析
中圖分類號Q 785，S 433.4
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