豬基因工程復合干擾素對仔豬病毒性疾病防治效果觀察

摘要:以武漢市和江漢平原2個規(guī)模豬場發(fā)生豬瘟#65380;豬藍耳病等病毒性傳染病為對象，用豬基因工程復合干擾素配合常規(guī)藥物進行了預防和治療效果試驗#65377;結果:干擾素配合常規(guī)獸藥治療總有效率分別為87.2%#65380;84.6%;與對照組總有效率29.1%#65380;26.1%相比較，差異極顯著(P<0.01);干擾素對病毒性疾病預防試驗仔豬成活率分別為95.8%#65380;93.6%，與對照組成活率54.7%#65380;68.1%相比較，差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗表明，豬基因工程復合干擾素對規(guī)模豬場仔豬病毒性疾病防治效果良好#65377;

關鍵詞:豬基因工程復合干擾素;豬瘟;豬藍耳病

中圖分類號:S828;Q78;S859.79+7;S852.65文獻標識碼:A文章編號:1007-273X(2008)10-0010-02

近些年來，隨著種豬及產(chǎn)品流通頻繁和規(guī)模化豬場養(yǎng)殖密度增大，我國部分地區(qū)養(yǎng)豬場傳染性疾病的發(fā)生率與死亡率呈上升趨勢，尤其病毒性傳染病一旦侵入易感豬群，很快波及全群造成重大的經(jīng)濟損失#65377;2008年3月上旬，武漢市和江漢平原2個規(guī)模豬場仔豬斷奶前后突然發(fā)病，主要臨床癥狀為體溫升高至40.6~41.8℃，精神沉郁，食欲減退或廢絕，呼吸困難，皮膚發(fā)紅，病豬后肢無力，部分豬耳尖#65380;四肢末端#65380;腹下有塊狀紫斑#65377;病理變化主要為肺臟彌散性間質(zhì)性肺炎，扁桃體和淋巴結腫大出血，尤其是腹股溝淋巴結明顯腫大，腎臟密布針尖狀出血點，個別豬脾臟邊緣有梗死灶，少數(shù)豬胃腸道彌漫性出血，小腸細小如“雞腸”等#65377;先后用青#65380;鏈霉素#65380;先鋒霉素以及磺胺類藥物進行防治均效果不佳，共發(fā)病960頭，死亡700頭，死亡率為72.9%#65377;采集發(fā)病仔豬血液和病變組織送實驗室診斷#65377;根據(jù)實驗室病原學和血清學檢測以及結合臨床癥狀和病理變化等確診武漢市某豬場豬發(fā)生以豬藍耳病和豬瘟為主的病毒性傳染病;江漢平原某豬場發(fā)生高致病性藍耳病#65380;普通藍耳病和圓環(huán)病毒病的混合感染#65377;經(jīng)采用豬基因工程復合干擾素配合抗生素等藥物進行緊急治療和預防試驗，取得明顯試驗效果#65377;現(xiàn)將結果報道如下#65377;

1材料和方法

1.1材料

(1)試驗地點武漢市郊某規(guī)模豬場(簡稱A豬場，種豬規(guī)模612頭)，江漢平原某規(guī)模豬場(簡稱B豬場，種豬規(guī)模546頭)#65377;

(2)試驗藥品豬基因工程復合干擾素，中國科學院微生物研究所提供，規(guī)格:6mL/瓶;噻呋孢王(頭孢噻呋鈉)，批準文號:獸藥字(2006)200312022，批號:080102，廣西北流市第二獸藥廠;抗病毒Ⅰ號(黃芪多糖注射液)，批準文號:獸藥字(2006)180282711，批號:07101401，湖南泰豐動物藥業(yè)公司;氟力佳(氟苯尼考注射液)，批準文號:獸藥字(2007)18027546，批號:20071006，湖南省亞牧動物藥業(yè)有限公司#65377;

(3)主要診斷試劑豬瘟抗原ELISA檢測試劑盒#65380;豬藍耳病ELISA試劑盒#65380;偽狂犬gI ELISA鑒別檢測試劑盒，美國IDEXX公司產(chǎn)品;豬圓環(huán)病毒ELISA抗體檢測試劑盒，武漢科前動物生物制品有限責任公司產(chǎn)品;Trizol及其他分子生物學試劑本實驗室自備#65377;

1.2方法

(1)診斷方法按照診斷說明書操作步驟和有關分子生物學實驗進行#65377;同時將部分病樣送省動物疾病診斷中心進行高致病性豬藍耳病檢測，根據(jù)檢測結果綜合判斷分析#65377;

(2)試驗設計試驗分為治療試驗和預防試驗#65377;治療試驗選擇臨床發(fā)病豬進行療效觀察，A豬場選用196頭發(fā)病仔豬肌注噻呋孢王和黃芪多糖注射液，用量分別為40~50mg/kg體重和3~5mL/頭，連用3~5d，同時肌注豬基因工程復合干擾素2mL/頭，每天1次，連用3d;B豬場選用324頭發(fā)病仔豬肌注氟力佳和黃芪多糖注射液，用量分別為0.1mL/kg體重和3~5mL/頭，連用3~5d，同時肌注豬基因工程復合干擾素2mL/頭，每天1次，連用3d;A#65380;B兩豬場分別設對照組，對照組不注射豬干擾素，其他治療情況相同，記錄病豬死亡及康復情況#65377;預防試驗分別隨機選擇各豬場未發(fā)病哺乳仔豬，肌注豬干擾素3~4次，每7~8d預防注射1次，對照組不注射豬干擾素，統(tǒng)計發(fā)病及成活仔豬數(shù)，試驗組和對照組的免疫和保健均正常進行#65377;

(3)效果判斷顯效∶體溫在用藥3d內(nèi)自然恢復至正常，1周內(nèi)臨床癥狀消失，食欲#65380;精神狀態(tài)恢復正常，4周內(nèi)不再復發(fā)#65377;有效∶1周內(nèi)體溫降至正常，臨床癥狀減輕，但仔豬體質(zhì)消瘦，皮毛粗亂，食欲不振，生長緩慢#65377;無效:用藥治療無好轉或加重，直至死亡或撲殺#65377;預防試驗仔豬的發(fā)病死亡數(shù)是在試驗后6周內(nèi)發(fā)病和死亡的仔豬數(shù)#65377;

2結果與分析

2.1診斷檢測結果

送檢樣品除進行主要病毒抗原#65380;抗體檢測外，同時還進行病原細菌的分離鑒定，未分離出臨床上有意義的致病菌株#65377;檢測結果見表1#65377;

根據(jù)實驗室檢測結果結合臨床癥狀和病理變化等確診為武漢市某豬場發(fā)生以豬藍耳病和豬瘟為主的病毒性傳染病，江漢平原某豬場發(fā)生高致病性豬藍耳病#65380;普通藍耳病和圓環(huán)病毒病的混合感染#65377;

2.2豬基因工程復合干擾素治療試驗結果

A豬場試驗組總有效率達87.2%，而對照組總有效率只有29.1%，兩者差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗結果見表2#65377;

B豬場試驗組總有效率達84.6%，而對照組總有效率只有26.1%，兩者差異極顯著(P<0.01)#65377;試驗結果見表3#65377;

從A#65380;B兩豬場的治療結果表明，豬基因工程復合干擾素配合其他藥物對豬病毒性疾病的治療效果確實，發(fā)病初期立即進行治療，絕大多數(shù)仔豬治療后1周內(nèi)康復，其中噻呋孢王+黃芪多糖注射液+干擾素組合治療效果與氟力佳+黃芪多糖注射液+干擾素組合療效無明顯差異#65377;

2.3豬基因工程復合干擾素預防試驗結果

A#65380;B兩豬場仔豬均在28日齡斷奶，A豬場仔豬多在斷奶前后發(fā)病，采用仔豬15日齡肌注干擾素2mL/頭，然后每隔7d預防注射1次，每次2mL/頭，連用4次#65377;B豬場仔豬多在斷奶后7~10d發(fā)病，采用仔豬21日齡肌注干擾素2mL/頭，然后每隔8d預防注射1次，每次2mL/頭，連用3次#65377;對照組除免疫和保健正常進行外不注射干擾素#65377;同時A#65380;B兩豬場發(fā)生疫情后，加強了飼養(yǎng)管理和免疫隔離消毒工作，飼料中添加藥物以防止繼發(fā)感染#65377;結果A豬場試驗組仔豬成活率為95.8%，而對照組仔豬成活率為54.7%;B豬場試驗組仔豬成活率為93.6%，而對照組仔豬成活率為68.1%，差異極顯著(P<0.01)#65377;預防試驗結果見表4和表5#65377;

從A#65380;B兩豬場的預防試驗結果表明，在加強飼養(yǎng)管理和搞好獸醫(yī)衛(wèi)生防疫的基礎上，應用豬基因工程復合干擾素進行疫病的預防能明顯提高仔豬的成活率#65377;

3小結

干擾素(IFN)是人和動物細胞受到病毒感染等刺激后由巨噬細胞#65380;淋巴細胞及體細胞產(chǎn)生的一種具有高度生物活性的多功能糖蛋白，是由細胞基因組編碼產(chǎn)生的一種或多種小肽，具有廣譜抗病毒#65380;抗腫瘤和增強免疫等多種生物活性[1]#65377;本試驗采用中國科學院微生物研究所研制的高活性豬基因工程復合干擾素，是利用基因工程技術研制的復合干擾素蛋白制劑#65377;通過基因工程手段獲得的豬基因工程復合干擾素無論是含量或是活性，均高于機體受病毒或其他干擾素誘生劑刺激產(chǎn)生的干擾素#65377;通過本試驗表明豬基因工程復合干擾素配合其他藥物進行豬病防治，能達到標本兼治效果，對目前尚無特效藥物制劑防治豬病毒性疾病具有重要臨床意義#65377;

豬瘟(HC)是嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的一種主要疫病，我國部分地區(qū)時有豬瘟的發(fā)病報道[2，3]#65377;近年來，我國豬瘟的發(fā)病特點已發(fā)生了很大變化，即出現(xiàn)所謂非典型(溫和型)豬瘟，癥狀明顯減輕，死亡率降低，但是臨床上豬瘟常常與其他疾病混合或繼發(fā)感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成巨大損失#65377;另外由于國內(nèi)豬群中普遍存在豬藍耳病(PRRS)#65380;圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-2)等免疫抑制性病毒感染，導致群體免疫力和健康水平下降，使豬群對多種疾病的易感性增高#65377;豬圓環(huán)病毒病目前尚無疫苗預防，只有采取綜合措施進行防制;豬藍耳病雖有市場化疫苗，但是PRRSV具有易變性#65380;逃避免疫監(jiān)視#65380;間性感染#65380;自動清除以及抗體依賴性增強作用(ADE)等一系列生物學特點，給防控工作制造許多困難#65377;高致病性豬藍耳病(“高熱病”)造成我國養(yǎng)豬業(yè)損失慘重，目前疫情趨于平穩(wěn)，只有零星的暴發(fā)，但是危害性仍不容忽視#65377;總之，我國豬病異常復雜，混合或繼發(fā)感染已成常態(tài)，尤其是病毒性疾病的混合感染已成為豬傳染性疾病的主體，也是導致臨床豬病難治的主因#65377;因此，尋求一種高效#65380;安全以及無毒副作用的畜禽疾病防治新制劑，已成為許多人追求的目標，干擾素作為一種廣譜抗病毒制劑，在獸醫(yī)臨床上用于豬病防治已得到了廣泛的證實[3~5]，本試驗也證實豬基因工程復合干擾素在獸醫(yī)臨床上不管是治療和預防豬病均有非常明顯效果#65377;基于目前我國養(yǎng)豬業(yè)現(xiàn)狀，在搞好豬場飼養(yǎng)管理和生物安全的前提下，在獸醫(yī)臨床上應用豬基因工程復合干擾素制劑進行豬病的防治，是一種較理想的經(jīng)濟適用方法#65377;豬基因工程復合干擾素對豬瘟和豬藍耳病的確切效果需經(jīng)進一步進行動物感染性試驗和抗病毒活性試驗來確定#65377;

參考文獻:

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