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速率法檢測血清GLDH120例臨床分析

2008-12-31 00:00:00張立江王佳楠高俊芬
中國社區醫師·醫學專業 2008年11期

摘 要 目的:探討血清中谷氨酸脫氫酶(GLDH)的檢測方法及臨床意義。方法:采用速率法測定血清中GLDH的含量,20份正常血清作為對照組,100例各型肝臟疾病患者血清GLDH的檢測結果進行評價。結果:肝病組GLDH明顯高于對照組,兩組相比有顯著性差異(P<0.01);GLDH試劑的批內精密度CV<5%,有很好的重現性;國產GLDH試劑盒對樣本的檢測數據與進口試劑檢測的結果無顯著差異(P>0.05),高度相關(R>0.999);線性上限可>500U/L。結論:用速率法測定血清中GLDH的含量具有簡便、快速、穩定性好、精密度高的特點,測定血清中GLDH活性變化,可作為診斷肝細胞病變,酒精及藥物性肝損傷,特別是壞死型肝病的重要指標。

關鍵詞 谷氨酸脫氫酶 速率法 肝臟疾病

谷氨酸脫氫酶(GLDH)是含鋅的金屬合成酶,它催化谷氨酸脫氫、脫氨生成α-酮戊二酸之間的不可逆反應。此反應的體內大多數氨基酸經聯合脫氨去氨基的關鍵步驟,也是體外非必須氨基酸由聯合脫氨逆向反應生成的重要反應,還是連接氨基酸代謝,三羧酸循環的中心環節,故GLDH主要分布于肝細胞線粒體內,在正常情況下,血清中GLDH 的活性是很低的,通常<10U/L,只有在肝細胞受損害時才明顯升高。

材料和方法

試劑和儀器:日立公司7170型全自動生化分析儀,GLDH試劑盒(批號0711260001)由吉林省惠強生物技術有限公司提供,低值和高值質控物(批號分別為171074,169839)均由羅氏公司提供。

樣本來源:對照組共20例,年齡18~75歲,均為健康體檢者。肝病組共100例,均為醫院確診的各種肝病患者,年齡18~75歲。

方法對比試驗:對照組和疾病組在相同條件下進行檢測,求P值判斷其結果差異是否有顯著性。

精密度試驗:取低、高2份質控物進行連續測定20次,進行批內試驗。

準確性試驗:從肝病組中任意選取20份血清用惠強公司提供的GLDH試劑盒與日本和光 GLDH在相同條件下進行了相關性檢測及對比試驗,對比其結果。

線性試驗:取1份高值的標本,用生理鹽水稀釋為20份不同濃度的測試樣本進行試驗,然后計算回歸方程。

結 果

對比試驗肝病組GLDH明顯高于對照組,兩組相比差異有顯著性 (P<0.01)。結果見表1。

精密度試驗:低(21.0U/L)、高(39.4U/L)標本的批內變異系數(CV)值分別為2.25%、3.16%。

準確性試驗:兩種試劑檢測GLDH的結果高度相關(檢測結果見表2),相關系數在r=0.999以上,且無顯著差異(P>0.05),所以惠強提供的異檸檬酸脫氫酶試劑盒所檢測的結果是準確可靠的。

樣本:血清

相關系數:r=0.998(n=20)

回歸方程:Y=0.99X+1.64

Y:惠強試劑(U/L)

X:日本和光試劑(U/L)

線性試驗:高值(500U/L)標本,用生理鹽水稀釋為6份不同濃度的測試樣本,線性方程為Y=0.9925X+0.341,R2=09999。從0~500U/L具有很好的線性關系。

討 論

本研究的對比試驗顯示肝病組GLDH明顯高于對照組,精密度試驗有很好的重現性,準確性試驗顯示國內外兩個廠家的試劑檢測結果無顯著差異,線性試驗表明最大檢測濃度可達>500U/L。結果表明,對于肝細胞損傷性疾病患者,血清中谷氨酸脫氫酶的活性明顯高于健康者和其他疾病患者(P<0.01)。其中急性壞死性肝病患者>急性病毒性肝炎>酒精肝>肝硬化>慢性活動性肝炎。谷氨酸脫氫酶作為肝細胞病變,特別是急性缺血性肝炎和酒精性肝炎的診斷指標具有重要臨床價值,并對指導臨床治療和預后判定具有重要意義。

該酶主要存在于肝線粒體中,故可作為肝損害的特異性指標。①急性肝炎活動期明顯增高。②由于GLDH分子量較大,血中半衰期較長,故恢復正常較慢.在慢性肝炎中,GLDH的陽性率與ALT/AST等基本相同。③而當肝實質損傷加重時,GLDH明顯優于ALT/AST及ALP。所以GLDH增高比ALT提前出現。④在缺血性肝炎時GLDH最敏感,上升幅度最大。并具有較強的特異性,可作為缺血性肝炎的特異性診斷指標。⑤GLDH在肝小葉中央活力較肝小葉周圍活力大1.7倍,因此在灑精性肝病中升高顯著,對診斷灑精性肝病有較高臨床價值。⑥肝硬化代償期,GLDH活性較正常人無顯著性差異,當損傷累及線粒體時才升高,故可作為判斷肝硬化是否活動的標。⑦GLDH不易受到藥物抑制和誘導影響,能特異反映細胞損傷程序,動態觀察活性改變對肝炎的治療及預后估計有重要意義。

參考文獻

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