多藥耐藥基因蛋白ＴｏｐｏⅡ在胃腸癌中的表達及其臨床意義

摘要 目的：探討TopoⅡ蛋白的表達特點及其與胃腸癌臨床病理因素的關系。方法：采用免疫組化s-p法對98例胃腸癌(33例胃癌，65例結腸癌)進行TopoⅡ蛋白表達的檢測。結果：TopoⅡ蛋白在胃癌、腸癌中表達的陽性率分別為48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，兩者無顯著差異(P＞0.05)。TopoⅡ蛋白的的表達與淋巴結轉移有關(P＜0.05)。結論：TopoⅡ蛋白在胃腸癌中的表達可能與胃腸癌的耐藥有關。

關鍵詞 胃腸癌 TopoⅡ

化療是治療胃腸道惡性腫瘤的重要手段之一，然而胃腸癌對化療藥物的耐藥性是影響化療效果的主要原因。多藥耐藥性(MDR)是許多化療方案無效的主要原因之一是指腫瘤細胞對某一化療藥物產生耐藥性后，對其他化學結構及機理不同的化療藥物也產生交叉耐藥性。在1970年，Biedler和Riehm首次注意到多藥耐藥現象。目前認為多藥耐藥有關主要分子包括轉運蛋白如P糖蛋白(P-gp)、多藥耐藥相關蛋白(MBP)、肺耐藥蛋白(LRP)、乳腺癌耐藥蛋白(BCRP)和抗原過程相關轉運泵(TAP)，細胞解毒系統如谷朧甘膚轉移酶(GST)和DNA修復系統，藥物靶點如拓撲異構酶Ⅱ(TopoⅡ)。MDR的機制目前尚不完全明了，但研究表明其與拓撲異構酶Ⅱ(TopoⅡ)有關㈨。

本文擬用免疫組化方法檢測胃腸癌組織中TopoⅡ多種耐藥基因蛋白的表達，并探討與胃腸癌臨床病理因素的關系。為胃腸癌耐藥譜的診斷、制定化療方案提供依據。資料與方法

一般資料：收集一汽總醫院病理科2006年1月～2007年6月住院手術治療，病理確診的98例胃腸癌標本為研究對象，65例為結腸癌患者，33例為胃癌患者，中位年齡55歲(38～76歲)。各例癌常規取材制片4張以上。每例淋巴結7～12個，平均10個。

試劑與方法：所有標本10％福爾馬林固定，常規石蠟包埋，4p，m連續切片4張，分別作HE染色及TopoⅡ免疫組化染色。免疫組化采用s-P法，TopoⅡ抗體及s-p試劑盒均為麥新公司產品。

結果觀察與判定：每例至少觀察10個高倍視野1000個腫瘤細胞。TopoⅡ陽性著色產物定位于細胞核，為棕色陽性顆粒，棕色顆粒≥20％即為高表達，棕色顆粒＜20％者為低表達，不著色為陰性。 統計學處理：采用X²檢驗。

結果

TopoⅡ蛋白在胃癌、腸癌的表達：98例胃腸癌包括33例胃癌，65例結腸癌，TopoⅡ蛋白在胃癌、腸癌中表達的陽性率分別為48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，經統計學處理分析，兩者無顯著差異(P＞0.05)。

根據有無淋巴結轉移，將本組病例分為兩組即“有淋巴結轉移組”及“無淋巴結轉移組”。經統計學處理分析，在胃腸癌組織中TopoⅡ蛋白的表達與淋巴結轉移有關(P＜0.05)。

討論

TopoⅡ是在DNA復制、轉錄和染色體分離中起重要作用的核酶，主要存在于s期的細胞中，TopoⅡ蛋白的表達與腫瘤細胞的增殖率密切相關。Topo-Ⅱ的生理功能在DNA復制、轉錄、有絲分裂、染色體分離、修復中起到關鍵作用。與TOPO I有關的化療藥有丫陡類、表鬼臼毒素、蔥環類、蕙醒類，TOPO 1U是這些藥物細胞內重要的作用目標，這些藥物干擾TOPOn的正常功能，從而引起永久性DNA損傷。當某些原因如等位基因的突變、重排、甲基化、TOPOn調節因子的改變以及TOPOn以外基因的改變，而引起的腫瘤細胞中TOPOI蛋白數量和催化活性的減少，這常常表現在一些耐藥白血病細胞中。TOPOn的數量減少，引起藥物作用靶分子減少，導致藥物誘導DNA斷裂減少和藥物細胞毒效果的降低。許多抗腫瘤藥物以Topo為靶點，選擇性抑制增殖期DNA復制細胞，集中殺傷腫瘤細胞，有很好的選擇性，如DNA嵌入劑柔紅霉素、阿霉素，非嵌入劑喜樹堿、足葉乙甙都是通過抑制拓撲異構酶的活性，干擾DNA的遺傳代謝從而發揮抑制腫瘤細胞生長的藥理作用。同時它又是某些化學藥物的靶酶。當TopoⅡ活性降低或發生基因突變時，就表現為耐藥。本研究結果顯示TopoⅡ蛋白在胃腸癌中表達的陽性率分別為48.5％(16／33)、40.0％(26／65)，同時其表達與胃腸癌淋巴結轉移有關，提示這些易于發生轉移的胃腸癌的細胞增值率較高。