蘆薈對糖尿病神經(jīng)及腎臟并發(fā)癥防治作用的動物實驗研究

摘 要 目的：應用動物實驗研究蘆薈對糖尿病慢性并發(fā)癥（DCC）的防治作用。方法：四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病鼠，隨機分為治療、對照二組，治療組給予蘆薈灌胃給藥0.4ml/日，對照組給予生理鹽水。實驗第4、8、12、16周各測定血糖和尿蛋白1次，第16周時處死大鼠，剝離雙側(cè)坐骨神經(jīng)，測定其傳導速度，取腎臟病理切片PAS染色用于觀察病理變化。結(jié)果：糖尿病鼠應用蘆薈治療后血糖明顯下降，尿蛋白顯著低于對照組；腎病理切片PAS染色發(fā)現(xiàn)對照組腎小球結(jié)構(gòu)紊亂，基底膜增厚，PAS陽性物質(zhì)大量沉著于毛細血管之間，而治療組上述病理變化顯著減輕。結(jié)論：蘆薈對糖尿病鼠神經(jīng)傳導速度及腎臟病變的改善有明顯效果，使用蘆薈防治DCC是有效的途徑。

關鍵詞 糖尿病慢性并發(fā)癥 蘆薈

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.02.001

資料與方法

實驗動物：正常雄性SD大鼠，體重250～300g。

四氧嘧啶糖尿病鼠實驗模型制備：將空腹SD大鼠腹腔注射5%四氧嘧啶生理鹽水注射液，劑量100mg/kg，72小時后斷尾測血糖值，血糖＞11.0mmol/L者占70%，其余30%＜11.0mmol/L。再給予補充注射半量四氧嘧啶，3天后測血糖＞11.0mmol/L者達到100%。隨機分為兩組進行實驗，包括蘆薈治療組和生理鹽水對照組，各組間血糖差異≤1mmol/L，另設正常對照組。

實驗方法：坐骨神經(jīng)傳導速度的測定：于實驗16周時用20%烏拉坦（氨基甲酸乙脂），每千克體重5ml麻醉大鼠，將背部及后肢毛剪去，切開皮膚，仔細分離雙側(cè)坐骨神經(jīng)，分離過程中注意用甘油保護坐骨神經(jīng)，分離動作須輕、細，以免損傷神經(jīng)，剪去坐骨神經(jīng)分支須用玻璃分針將坐骨神經(jīng)輕輕拉起，勿用鑷子鉗；分離坐骨神經(jīng)應盡量長。上至骶椎旁，下至足跟部，使分離出的神經(jīng)長達5～6cm，分離后立即測定，用生理鹽水為導電介質(zhì)，用JL-B電刺激器產(chǎn)生興奮刺激，然后用SR-46型二線示波器測定神經(jīng)傳導速度。②腎臟組織病理學觀察：大鼠處死后取出腎臟，置canoy固定液中固定后制成蠟塊，切片厚度4～6μm，以PAS法染色，在普通光鏡下觀察其病理形態(tài)改變。

實驗經(jīng)過：本實驗用20只雄性Sprang-Dawley大鼠，由本院動物實驗室喂養(yǎng)，上海飼料廠提供鼠育成顆粒飼料，大鼠自由進食，所有大鼠生活環(huán)境相同。分出 5只為正常對照，其余用四氧嘧啶誘發(fā)糖尿病，造型過程經(jīng)過1周，其中5只死亡，剩余10只造型成功，血糖值＞11.0mmol/L，隨機分為兩組：糖尿病組，糖尿病蘆薈治療組，見表1。

實驗為期16周。蘆薈治療組采用中國蘆薈新鮮葉汁，避光冷藏保存。給藥方法：糖尿病＋蘆薈治療組灌胃給藥0.4ml/日，糖尿病組灌生理鹽水0.4ml/日。實驗開始第4、8、12、16周各測定血糖和尿蛋白1次，第16周時先將大鼠麻醉，剝離雙側(cè)坐骨神經(jīng)，分別測定其傳導速度，取均值，然后斷頭取血測定血糖，剪開腹腔，取腎臟，置canoy固定液中供PAS染色用。其他檢測：血糖測定用葡萄糖氧化酶法，尿蛋白測定用考馬斯亮蘭法。

統(tǒng)計學分析：計量資料值以均數(shù)±標準差表示，各配伍組樣本均數(shù)比較，采用方差分析。

結(jié) 果

血糖變化，見表2。

坐骨神經(jīng)傳導速度，見表3。

數(shù)值為均數(shù)±標準差，*與糖尿病組相比P＜0.01。

從表3中可以看出，糖尿病坐骨神經(jīng)傳導速度明顯低于正常（P＜0.01），使用蘆薈治療可明顯改善傳導速度（P＜0.01）。

尿蛋白含量的變化：糖尿病鼠于4、8、12、16周末測定尿蛋白的變化，見表4。

從表4中看出，隨病程進展，糖尿病組尿蛋白有上升趨勢，用蘆薈治療后尿蛋白基本維持不變，但未治療的糖尿病組尿蛋白明顯升高，遠高于治療組水平（P＜0.01）。

腎小球病理形態(tài)光鏡檢查：糖尿病鼠腎小球基底膜明顯增厚，系膜基質(zhì)增多（表現(xiàn)為 PAS染色陽性物質(zhì)沉積），治療的糖尿病鼠上述改變輕微，但與正常腎臟相比仍有一定程度的系膜基質(zhì)增多。PAS染色陽性物沉著于內(nèi)皮細胞下。

討 論

蘆薈的主要作用有：①降血糖作用；②具有清除氧自由基、抗氧化損傷的作用；③對非特異性免疫、體液免疫、細胞免疫均有明顯調(diào)節(jié)作用，對干擾素系統(tǒng)有明顯刺激作用；④抗癌作用；⑤其他作用，如抗炎、抗病毒、抗輻射、增強腎上腺皮質(zhì)功能、升高白細胞等［1］。DDC的發(fā)病機制尚不十分清楚，一般認為高血糖是其始動環(huán)節(jié)，高血糖導致的非酶糖化損傷、氧化應激損傷可能是DCC發(fā)生、發(fā)展的重要病理機制，蘆薈對DCC的防治作用可能與其降血糖、清除氧自由基、抗氧化損傷的作用有關，但確切機制有待今后進一步研究證明。

本組結(jié)果顯示，糖尿病鼠應用蘆薈治療后血糖明顯下降；糖尿病組隨著病程的延長，尿蛋白逐漸上升，使用蘆薈糖尿病鼠尿蛋白顯著低于糖尿病組；腎病理切片PAS染色顯示糖尿病鼠腎小球結(jié)構(gòu)紊亂，基底膜增厚，PAS陽性物質(zhì)大量沉著于毛細血管之間，而治療的大鼠上述病理變化顯著減輕；糖尿病神經(jīng)病變的公認指標——坐骨神經(jīng)傳導速度提高。

參考文獻

1 肖志艷，陳迪華，斯建勇，等.庫拉索蘆薈的化學成分的研究.藥學學報，2000，35(2):120-123.