乳腺原位癌組織中Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的表達及意義

摘 要 目的：探討上皮型鈣黏附蛋白(E-cadherin)在乳腺原位癌組織中的表達及意義。方法：應用免疫組織學Envision兩步法觀察30例乳腺原位癌組織中E-cadherin的表達情況。結果：乳腺導管原位癌中E-cadherin的陽性表達率為86.7%；而在乳腺小葉原位癌中無表達，兩者差異有統計學意義(P<0.05)。結論：E-cadherin有助于鑒別乳腺導管原位癌和乳腺小葉原位癌。

關鍵詞 乳腺原位癌 E-cadherin 鑒別診斷doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.02.082

上皮型鈣黏附蛋白(E-cadherin)是一種鈣依賴性介導的同種親和性上皮細胞相互黏附的跨膜糖蛋白，位于人第16號染色體長臂(16q)上，介導細胞間黏附，在維持細胞的極性和組織完整性中發揮重要作用［1］。近年來，研究表明E-cadherin與惡性腫瘤的生長和轉移密切相關。本研究采用免疫組化技術觀察了E-cadherin在乳腺導管原位癌(DCIS)和乳腺小葉原位癌(LCIS))組織中的表達并分析其差異，探討將其作為鑒別兩種乳腺原位癌分子標記物的可行性，現報告如下。

資料與方法

一般資料：收集我院自1998年1月至今外科手術切除的30例乳腺原位癌存檔臘塊，其中導管原位癌15例，小葉原位癌15例，制備切片用于常規蘇木素-伊紅染色和免疫組織化學染色分析。

主要試劑：E-cadherin單克隆抗體購自福州邁新生物技術開發公司。

方法：①組織學觀察：所有乳腺原位癌組織均做常規HE染色，由高年資病理醫生根據WHO診斷標準進行復診。②免疫組化方法：采用Envision兩步法，抗原修復采用高壓修復法。用已知E-cadherin陽性的結腸癌組織作陽性對照，用PBS代替第一抗體作陰性對照。染色方法按試劑盒說明書進行，抗體稀釋倍數1:50。③結果判斷：腫瘤細胞膜呈現線狀棕黃色或棕褐色，>30%為陽性，<30%為陰性。

數據處理：采用SPSS13.0統計學軟件對相關數據行X²檢驗。

結 果

E-cadherin在導管原位癌中的陽性表達率為86.7%，定位于胞膜，呈線狀、棕黃色或棕褐色(圖1)；而在小葉原位癌中均為陰性，在小葉原位癌周邊的導管上皮細胞中呈陽性表達(圖2)。經統計學分析，E-cadherin在兩種原位癌中的表達差異具有統計學意義，見表1。

討 論

乳腺原位癌可分為導管原位癌(DCIS)和小葉原位癌(LCIS)，二者均起源于終末導管小葉單位，但DCIS和LCIS的治療方案極為不同。大多數學者認為DCIS不可控制，易進展為浸潤性導管癌，治療以外科根治和化療為主，盡管也有觀點認為LCIS具有播散潛能，可進展為浸潤性癌，但證據依然不足［2］。正因為其生物學行為仍然模棱兩可，細針穿刺診斷為LCIS不能作為根治術的依據，而以保守性手術、化療和他莫昔芬等藥物治療為主。因此，正確區分二者具有重要的臨床意義。

DCIS形態學可分為粉刺型、篩狀型、實體型和乳頭狀型，大部分DCIS和LCIS在光鏡下是可以正確區分的。鏡下：DCIS通常發生于中、小導管(老年婦女常累及大導管)，癌細胞核呈不同程度的多形性，可見核分裂象，常伴有壞死。而LCIS發生于小葉的腺泡內，瘤細胞相對單一、松散，排列成多層或充滿腺腔，胞質透亮，核小而一致，染色深。小葉內受累腺泡體積增大，但小葉形態仍完整，癌細胞壞死罕見。然而，某些導管原位癌，尤其是呈實體型、低級核的DCIS在形態上和LCIS難以區分，因此有必要尋找有效的分子標記物來鑒別二者。

黏附分子是一類介導細胞與細胞之間黏附的糖蛋白分子，參與細胞的遷移、運動及組織結構的維持，并在炎癥反應和免疫應答中扮演重要角色。越來越多的資料表明，黏附分子表達及其功能活性的異常與腫瘤、 心血管疾病、 糖尿病等多種疾病密切相關［3~5］。E-cadherin是一種鈣依賴性的介導同種親和性上皮細胞相互黏附的跨膜糖蛋白，廣泛分布在胚胎和成熟組織的上皮細胞中，除具有調節胚胎組織的發育、組織形成，參與細胞與細胞間信息傳遞交流等作用外，對促進細胞黏附聚集、維持上皮形態結構的完整性至關重要，并具有介導正常細胞接觸抑制。在病理情況下，E-cadherin丟失或功能缺失與惡性腫瘤的發生、侵襲和轉移過程密切相關［6］。

應用免疫組化技術檢測E-cadherin在15例DCIS和15例LCIS中的表達，分析其在兩種乳腺原位癌中的表達差異。發現E-cadherin在DCIS中的表達率為86.7%，表達于腫瘤細胞膜，呈線狀、棕黃或棕褐色，而在LCIS中不表達，在LCIS中癌巢旁的導管上皮中E-cadherin陽性，可作為陽性內對照，說明本實驗結果正確可信，這與文獻報道是一致的，Tien Yeh，MD［7］等人應用免疫組化技術檢測E-cadherin和34βE12在DCIS和LCIS中的表達；結果發現E-cadherin在DCIS呈陽性表達，而在LCIS中均不表達；34βE12則恰恰相反，在LCIS中呈陽性表達，而在DCIS中均不表達，認為聯合檢測E-cadherin和34βE12將為鑒別診斷DCIS和LCIS提供可靠依據。大多研究表明E-cadherin通過同質性細胞黏附，使腫瘤呈膨脹性生長，瘤細胞之間保持密切的接觸，難以脫離原發瘤，從而抑制腫瘤的侵襲和轉移，因此E-cadherin表達的缺失或減少是標志腫瘤預后不良的一項重要獨立指標。E-cadherin在LCIS中表達缺失的分子機制可能是由于其染色體突變而引起的。

因此，作者認為，E-cadherin適合用于鑒別導管原位癌和小葉原位癌，絕大多數模棱兩可的原位癌依靠E-cadherin染色能夠分類。

參考文獻

1 Ray M E，Mehra R，Sandler H M，et al.Ecadherin protein expressi on predicts prostate cancer salvage radio therapy outcomes.JU rol，2006，176(4Pt1):1409-1414.

2 Elsheikh TM，Silverman JF.Follow-up surgical excision is indicated when breast core needle biopsies show atypical lobular hyperplasia or lobular carcinoma in situ:a correlative study of 33 patients with review of the literature.Am J Surg Pathol.2005，29:534-543.

3 黃煥斌，楊曉寧，陳謙學.CD44s和 Ki267在腦膠質瘤中的表達及其臨床意義.武漢大學學報(醫學版)，2006，27(4):437-440.

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6 董慧明，沈鎮宙，邵志敏.上皮鈣粘著蛋白與腫瘤.國外醫學#8226;腫瘤學分冊，2005，32(2):83-85.

7 I-Tien Yeh，MD，Carolyn Mies，MD Application of Immunohistochemistry to Breast LesionsArch Pathol Lab Med，2008，132(3):349-358.