花葉玉簪工廠化組培育苗技術研究

吳國智 郝硯英 王 勇 楊 元

摘要:利用花葉玉簪的側芽為外植體,研究了其工廠化組培育苗技術。結果表明:芽誘導較理想的培養基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L作為繼代培養基效果最好,可以保持原來的花葉特征;以MS+NAA 0.2 mg/L作為花葉玉簪的生根培養基,生根數較多;以蛭石∶珍珠巖=5∶1配比的成活率為最高,生長勢也較強。

關鍵詞:花葉玉簪;組織培養;育苗技術

中圖分類號:S682.1+9文獻標識碼:A DOI編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2009.05.024

Study on Industrialized Seedling Technique of Tissue Culture in Hosta plantagineu

WU Guo-zhi,HAO Yan-ying,WANG Yong,YANG Yuan

(Tianjin Flower Garden,Tianjin 300112,China)

Abstract:Rapid seedling technique via tissue culture in Hosta plantagineu was studied by lateral bud as explant in the paper. The results showed that the appropriate medium for bud induction was MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L; the best medium for successive transfer culture was MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L, it could keep the primary character of flower and leaf; the root number was more in the rooting medium with MS+NAA 0.2 mg/L; the survival rate was high and the growth vigor was strong in the combination of vermiculite and pearl rock =5∶1 .

Key words:Hosta plantagineu;tissue culture;seedling technique

花葉玉簪(Hosta plantagineu)為多年生宿根花卉,是百合科著名觀葉植物玉簪的變種,對喜光花卉有極強的互補性,是園林綠化的優良品種。花葉玉簪的引進與推廣,極大地提高了其觀賞效果,豐富了天津市園林綠化的景觀色彩。該品種株矮喜蔭,復色葉面,帶褶皺,金邊銀心相互交織,絢麗多彩的葉片呈現出魔幻般的花團錦簇。在城市高大樓群的背側、立交橋下、庭院大樹遮蔭處、樹籬邊等喜陽花卉生長不利的地方均可種植。裝盆后,可登堂入室,客廳、書房、大廳、會議室、窗臺上均可用它來點綴、裝飾,花葉玉簪的花還可散發出淡淡幽香,高雅不凡。

花葉玉簪常規的繁殖方法主要是通過分株,增殖率低,僅為3～5倍左右,短期內要形成大規模的生產困難較大,如果引進種苗,價格又很高。采用組織培養的繁殖方法,可以很好地解決上述難題[1],但通過花蕾誘導愈傷組織后形成的芽有變異現象發生,有些失去了原來的花葉特征,而由側芽直接誘導產生的不定芽性狀穩定,基本沒有發現變異,保留著原來的花葉特征,在短期內獲得了數以萬計的組培苗,為花葉玉簪的大面積推廣打下了堅實的基礎。本試驗利用花葉玉簪的芽為外植體,研究了工廠化組培育苗技術,提高了花葉玉簪的繁殖系數。

1材料和方法

1.1材料

1.1.1品種法蘭西、甜心、金冠。

1.1.2外植體選取花葉玉簪未出土的側芽和和花蕾作為外植體。

1.2方法

1.2.1無菌材料的獲得將側芽的外層皮及花蕾的外苞葉剝掉,自來水沖洗10 min后,放入漂白粉消毒液處理30 min,取出置入0.1%升汞溶液消毒10 min,無菌水洗3次,切取芽長0.8～1 cm,花蕾縱切成4塊,分別接種在不同激素水平的芽和愈傷組織誘導培養基上。

1.2.2培養基和培養條件芽和愈傷組織誘導、繼代培養和生根培養均以MS為基本培養基,附加不同濃度的細胞分裂素和生長素。蔗糖30 g/L,瓊脂5 g/L,培養溫度為25 ℃左右。外植體接種后,先進行暗培養30 d,誘導出愈傷組織和分化出不定芽后,再轉到光照培養,光照強度為1 000～1 500 lx,光照時間12 h/d。

1.2.3煉苗基質的選擇蛭石+珍珠巖的3種比例為5∶1,3∶1,1∶1。草炭土+珍珠巖的 3種比例為8∶1,5∶1,2∶1。

2結果與分析

2.1不同激素水平對芽和愈傷組織誘導的影響

外植體接種在誘導培養基上,經過30 d的暗培養后,芽基部不斷分化出不定芽,花蕾則形成小突起狀的愈傷組織。繼續進行光照培養15 d,不定芽由白色變為綠色,花蕾形成的愈傷組織也逐漸不斷分化出叢生芽。不同激素水平對芽和愈傷組織的誘導結果見表1。

從表1可看出,芽誘導的較理想培養基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;花蕾誘導愈傷組織的培養基則以MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L為最好。

2.2繼代培養階段,不同激素水平對芽分化數量、質量的影響

外植體通過不定芽誘導,產生了大量不定芽,但不定芽的數量多少又直接影響到芽的質量。如果芽分化過旺,不定芽纖細,無效芽增加,影響到下一步的生根培養;而芽分化過少,芽雖生長健壯,但達不到組培擴繁基數的需要。通過繼代培養基的篩選試驗,找到了芽分化的最佳培養基,結果見表2。從表2得知,處理3(MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L)作為繼代培養基,效果最好,不但其分化的芽較多,而且質量高,健壯,有效芽比例達100%,完全符合花葉玉簪通過組培方法提高的繁殖系數,實現工廠化育苗的需要。

2.3不同生長素組合對生根的影響

切取繼代瓶內的健壯芽,接種于含有不同濃度生長素的培養基上,培養25 d,統計生根數量和生根率,結果見表3。

由表3 可見,以MS+NAA 0.2 mg/L作為花葉玉簪的生根培養基,效果最好,根數較多,生根率達89%。

2.4不同基質配比對花葉玉簪移栽成活率及生長勢的影響

當生根苗根長0.5～1.5 cm時,取出移栽,30 d后,統計不同基質配比對小苗移栽的成活率及生長勢,結果見表4。

從表4可見,花葉玉簪小苗移栽時,蛭石+珍珠巖和草炭土+珍珠巖兩種組合的小苗移栽的成活率及生長勢相差不大,其中以蛭石+珍珠巖=5∶1配比的成活率為最高,生長勢也較強;草炭土+珍珠巖=5∶1配比的移栽成活率也較高,生長勢最強。

3討論

(1)花葉玉簪在遺傳、生理、組織學上與常規玉簪品種有一定的差異。控制葉片斑紋性狀的基因在激素刺激下容易發生變異而失去花葉特征。因此,在組織培養過程中,取材部位和激素種類、濃度控制非常重要。在本研究中,花葉玉簪芽和花蕾誘導出叢生芽后,在繼代培養中,我們發現通過花蕾誘導愈傷組織后形成的芽有變異現象發生,有些失去了原來的花葉特征,而由芽直接誘導產生的不定芽性狀穩定,基本沒有發現變異,保留著原來的花葉特征。

(2)在組培繁殖過程中,法蘭西、甜心、金冠等3個花葉玉簪品種芽的分化率略有一定的差異。因此,應根據品種和瓶苗的生長情況調整細胞分裂素和生長素使用的濃度。

(3)出瓶苗中有少數苗的根發育較差或根莖處有愈傷化,會影響新根的發生,可用利刀切除,淺植于蛭石床上2～3周,待新根長好后再移栽。一般4—5月份下地栽種或上盆的小苗,經過精心養管,翌年即可開花。

(4)花葉玉簪通過組織繁殖可以在短期內獲得數十萬株小苗,繁殖系數極高。目前,我們通過側芽直接誘導產生不定芽的方法已成功生產出30萬株小苗,滿足了我市的綠化工程用苗和盆栽花卉生產的需要,取得了很高的經濟效益和社會效益。

參考文獻:

[1] 郝硯英,趙哀梅,王勇,等.花葉玉簪的組織培養與快速繁殖技術研究[J].天津農業科學,2006,12 (2):18-19.