９種殺菌劑對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制作用試驗(yàn)研究

劉傳琴　吳　紅　夏艷濤　靳學(xué)慧　李洪林

摘要采用菌絲生長(zhǎng)速率法測(cè)定了9種殺菌劑對(duì)水稻稻瘟病菌絲的抑制效果，并進(jìn)行室內(nèi)毒力測(cè)定。結(jié)果表明：稻艷的毒力最高，其次為稻瘟靈和病毒克星。稻艷、稻瘟靈、病毒克星3種藥劑的毒力回歸方程依次為Y=1.155x+7.382 7、Y=2.674 5x+9.367 8和Y=2.160 9x+6.865 9，相關(guān)系數(shù)r依次為0.894 3、0.935 2、0.997 7，EC50依次為0.008 6μg/mL、0.023 2μg/mL、0.136 9μg/mL。

關(guān)鍵詞稻瘟病；殺菌劑；毒力測(cè)定；抑制效果

中圖分類號(hào)S481+.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào) 1007-5739(2009)01-0125-01

稻瘟病又名稻熱病、火燒瘟、磕頭瘟，是世界性真菌病害[1]，每年都有不同程度的發(fā)生，嚴(yán)重時(shí)可造成絕產(chǎn)。在1975~1990年的16年間，由稻瘟病引起的全球糧食損失高達(dá)1.57億噸[2]，年平均超過(guò)0.1億噸[3]。20世紀(jì)90年代以來(lái)，我國(guó)稻瘟病的年發(fā)生面積均在380萬(wàn)公頃以上，年損失稻谷達(dá)數(shù)億千克[4]。1993年為我國(guó)稻瘟病特大發(fā)生年，發(fā)病面積543.2萬(wàn)公頃[5]，損失稻谷高達(dá)數(shù)十億千克。其中，黑龍江省的稻瘟病發(fā)病面積為12.83萬(wàn)公頃，約占種植面積的20%，尤以穗莖瘟危害嚴(yán)重，全省稻谷損失達(dá)4.3萬(wàn)噸[5]。本試驗(yàn)旨在通過(guò)室內(nèi)生物測(cè)定篩選出對(duì)稻瘟病菌具有高效、低毒、低殘留的殺菌劑，為田間防病提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試材料

1.1.1供試菌株。采用震落分離方法和眉毛挑單孢法，從建三江農(nóng)業(yè)科研所試驗(yàn)地的稻瘟病穗頸瘟標(biāo)樣中分離稻瘟病菌，本試驗(yàn)所用菌株經(jīng)致病性測(cè)定和單分生胞子的分離，保存在PDA培養(yǎng)基上備用。

1.1.2培養(yǎng)基。PDA培養(yǎng)基(1 000mL)：馬鈴薯200g，葡萄糖17g，瓊脂17g。

1.1.3供試殺菌劑。共有9種，分別為40%富士一號(hào)乳油(天津市中農(nóng)化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料有限公司)、50%多菌靈可濕性粉劑(江陰凱江農(nóng)化有限公司)、25%施保克乳油(德國(guó)拜耳作物科學(xué)公司)、70%甲基托布津可濕性粉劑(江蘇龍燈化學(xué)有限公司)、40%稻瘟靈乳油(南京立派化工有限公司)、25%病毒克星乳油(山東成武縣有機(jī)化工廠)、75%三環(huán)唑可濕性粉劑(浙江龍灣化工有限公司)、45%咪鮮胺乳油(深圳諾普信農(nóng)化股份有限公司)、75%稻艷可濕性粉劑(美國(guó)陶氏益農(nóng)公司)。

1.2試驗(yàn)方法

采用菌絲生長(zhǎng)速率抑制法。將供試殺菌劑分別稀釋成系列濃度梯度的母液，按一定比例加入到融化好的PDA培養(yǎng)基中，混合后倒入滅菌的培養(yǎng)皿中，制成系列濃度梯度的含藥培養(yǎng)基平板。供試的稻瘟病菌株，先在PDA培養(yǎng)基上，置于25℃下培養(yǎng)7～10d，菌落長(zhǎng)至培養(yǎng)皿邊緣時(shí)，用直徑為5mm的打孔器在菌落邊緣打取菌餅，然后將菌餅移到上述含藥的培養(yǎng)基平板中央。以不加藥的平板培養(yǎng)基為對(duì)照。每平板接種1 塊，每種藥劑為1個(gè)處理，每處理3次重復(fù)，25℃全黑暗培養(yǎng)10d，用“十”字交叉法測(cè)定各處理的菌落增長(zhǎng)直徑。按以下公式計(jì)算藥劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的抑制率。

菌絲生長(zhǎng)抑制率=(對(duì)照菌落擴(kuò)展直徑－處理菌落擴(kuò)展直徑)/對(duì)照菌落擴(kuò)展直徑×100%。

將菌絲生長(zhǎng)抑制率轉(zhuǎn)換成幾率值(y)、藥劑濃度(μg/mL)轉(zhuǎn)換成以10為底的對(duì)數(shù)值(x)，做回歸直線，求出毒力回歸方程(y=a+bx)和相關(guān)系數(shù)(r)，計(jì)算殺菌劑對(duì)水稻稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)抑制的有效中濃度(EC50)，以此表示殺菌劑對(duì)稻瘟病菌抑制作用的強(qiáng)弱。

2結(jié)果與分析

測(cè)定的結(jié)果表明，供試的所有化學(xué)藥劑對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)均有一定的抑制作用，但抑制程度略有不同，其中稻艷、稻瘟靈和病毒克星3種藥劑對(duì)稻瘟病菌的菌絲生長(zhǎng)具有較強(qiáng)的抑制作用。毒力回歸方程依次為：Y=1.155x+7.382 7、Y=2.674 5x+9.367 8和Y=2.160 9x+6.865 9，相關(guān)系數(shù)(r)依次為0.894 3、0.935 2、0.997 7。3種藥劑中，稻艷的毒力最高，EC50為0.008 6μg/mL，明顯低于其他2種殺菌劑，病毒克星的毒力最低，EC50為0.136 9μg/mL。

3討論

本研究只是做了供試9種藥劑單劑對(duì)稻瘟病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制情況，篩選出稻艷、稻瘟靈、病毒克星、富士一號(hào)、多菌靈等對(duì)水稻稻瘟病菌絲生長(zhǎng)均表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。其有效成分也有所區(qū)別，所得結(jié)果能夠反映不同類型殺菌劑對(duì)水稻稻瘟病菌的抑制作用。對(duì)于這9種藥劑對(duì)稻瘟病菌孢子萌發(fā)有影響、藥劑的耐雨水沖刷、田間的藥效抑制等還需要進(jìn)一步地研究。為防止抗藥性的產(chǎn)生，今后的研究中還應(yīng)對(duì)不同類型藥劑混合的藥效進(jìn)行必要的研究。

4參考文獻(xiàn)

[1] 方中達(dá).植病研究方法(第三版)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，1996.

[2] 裴華，凌中專.遼寧丹東地區(qū)稻瘟病菌生理小種的研究[J].植物病理學(xué)報(bào)，1986，16(4)：197-203.

[3] BAKER B，ZAMBRYSKI P，STAKAWICZ B，et al.Dinesh-Kumar SP(1997) Signaling in plant-microbe interactions[J].Science，1997(276)：726-733.

[4] 周光召.面向21世紀(jì)的科技進(jìn)步與社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展[M].北京：中國(guó)科技出版社，1999.

[5] 孫漱元，孫國(guó)昌.我國(guó)稻瘟病研究的現(xiàn)狀和展望[J].植保技術(shù)與推廣，1996(3)：39-40.

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[7] 林代福.單孢分離的眉毛挑針?lè)╗J].山東農(nóng)業(yè)生物學(xué)報(bào)，2003，22(5)：462-463.