利用畢赤酵母系統表達重組人生長激素的研究

朱振洪　葛立軍　劉文洪　趙偉春　萬海同

摘要：為了獲得重組人生長激素在畢赤酵母中高表達的菌株，按畢赤酵母基因密碼子偏愛性，人工合成hGH的全基因序列，該基因被克隆到穿梭質粒pPIC9K中，PEG1000介導轉入畢赤酵母GS115細胞，通過G418篩選獲得高拷貝轉化子。在甲醇的誘導下，實現了hGH在畢赤酵母中的成功表達。通過發酵條件的優化，發酵上清中的表達量達1537mg/L經過超濾和兩步層析。重組蛋白的得率達35％，純度為97％。相對分子質量測定表明重組蛋白的相對分子質量與理論值相近，N-端氨基酸測序證實hGH基因在畢赤酵母中獲得正確的表達。

關鍵詞：重組人生長激素；畢赤酵母；表達；純化

中圖分類號：Q78文獻標識碼：A文章編號：1007－7847(2009)01－0020－05