小鼠ｇｄｎｆ基因在真核細胞ＮＩＨ－３Ｔ３中的表達
2009-04-29 00:44:03王慶忠潘智芳石玉強
生命科學(xué)研究 2009年1期
關(guān)鍵詞：小鼠
王慶忠 潘智芳 石玉強
摘要：為了得到超量表達膠質(zhì)細胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-derived neuotrophic factor，GDNF)的NIH-3T3細胞株，用于制作精原干細胞(spermatogonial stem cells，SSCs)培養(yǎng)的飼養(yǎng)層，通過RT-PCR方法成功地從幼年小鼠睪丸中克隆了gdnf基因，構(gòu)建了真核表達載體pcDNA3.1-gdnf，并用其轉(zhuǎn)染NIH-3T3細胞，對篩選出的陽性細胞克隆進行的免疫熒光染色、RT－PCR和Western blottig的結(jié)果表明，獲得了超量表達gdnf基因的NIH－313細胞株，這為精原干細胞的培養(yǎng)奠定了基礎(chǔ)。
關(guān)鍵詞：GDNF；RT－PCR；NIH－3T3；基因表達
中圖分類號：R742.5文獻標(biāo)識碼：A文章編號：1007－7847(2009)01－0055－05
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