碟脈靈注射液對(duì)兔缺血再灌注損傷心肌保護(hù)作用的研究

摘 要 目的:比較研究碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)于缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)兔缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)作用。方法:48只新西蘭大耳白兔隨機(jī)分為假手術(shù)對(duì)照組，缺血再灌注組，碟脈靈預(yù)適應(yīng)組和缺血預(yù)適應(yīng)組，觀察碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)知缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)心肌缺血再灌注時(shí)左室收縮壓峰值(LVSP)左室舒張末期壓(LVEDP)等容收縮期左室內(nèi)壓最大上升速率(+dP/dtmax)等容舒張期左室內(nèi)壓最大下降速率(-dP/dtmax)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸磷酸激酶同工酶(CK-MB)、三磷酸腺苷(ATP)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影響。結(jié)果:碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)與缺血預(yù)適應(yīng)均能改善缺血再灌注時(shí)左心室功能，減少心肌LDH、CK-MB的漏出，提高心肌ATP含量和血清SOD活性，降低MDA含量。結(jié)論:碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)能誘導(dǎo)心肌缺血預(yù)適應(yīng)樣保護(hù)作用。

關(guān)鍵詞 心肌缺血再灌注損傷 碟脈靈注射液 藥理性預(yù)適應(yīng) 缺血預(yù)適應(yīng)

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.20.200

Abstract:Objective:To ComparativeIy study the protective effects of DIEMAILING for injection(DMLI)preconditigning(IPC)on myocardial ischemia-reperfusion injury in rabbits.Methods:48 Rabbits were randomly divided into 4groups:the sham operation contr011ed(soc) group，ischemia-reperfusion(IPR)group，DMLI group，and IPC group.rhe myocardial ischemia-reperfusion model was induced by left anterior descending coronary occutusion in 30 min and reperfusiOn in 120 min in rabbits.To explore the effects of DMLI preconditioning and IPC on leftventricular Systolic pressure(LVSP)，left ventricular end diastolic pressure(LVEDP)，+dp/dtmax，-dp/dtmax Lactic dehydrogenase(LCH)，MB of isoenzyme of creatin kinase(CK-MB)，adenosine triphosphate(ATP)and superoxide dismutase(SOD)and maleic dialdehyde(MDA)in serum during myocardial ischemic reperfusion in rabbits.Results:DMLI and IPC couldimprove the funct ion of the left vertricular，decrease the level of LDH，CK-MB and MDA，rai se the level of ATP and the activity of SOD significantly.Conclusion:CIEMAILING for injection(DMLI)Can induce myocardial protective effects of ischemic‘preconditioning.Key words:myocardial ischemia and reperfusion injury;DIEMAILING for injecrion(DMLI);pharmacological preconditioning:Ischemic preconditioning.

碟脈靈注射液(DMLI)系由菊科植物抱莖苦荬菜Ixeris Sonchifolia(Bge.)Hance全草制備的純中藥制劑，有效成分為腺苷及黃酮類物質(zhì)，具有抗血小板聚集、抑制血栓形成[1]、增加纖溶酶活性、促進(jìn)血栓溶解、增加腦血流量、降低腦血管阻力[2]、降低心肌耗氧量、增加冠脈流量[3-4]、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜等作用，本課題采用兔在體心肌缺血再灌注模型，對(duì)比研究碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)與缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)兔缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)。

材料與方法

動(dòng)物模型制備及分組健康新西蘭白兔48只，體重2.0~2.5kg，由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，參照文獻(xiàn)方法[5]建立心肌缺血再灌注損傷模型。麻醉家兔，仰臥位固定于操作臺(tái)，多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)連續(xù)記錄標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)心電圖，沿胸骨左緣第3、4肋間逐層打開胸腔，暴露心臟，剪開心包，于冠狀動(dòng)脈左前降支中上1/3處穿過絲線，并用膠管將其套住，拉緊套管造成冠狀動(dòng)脈阻塞，心肌缺血依據(jù)心肌局部青紫，心電圖ST段上抬，放松套管局部心肌反應(yīng)性充血，ST段下移，表明再灌注成功。

48只兔隨機(jī)分為4組，每組12只，假手術(shù)對(duì)照組:做開胸術(shù)，穿線但不結(jié)扎，心臟曠置180分鐘;缺血再灌注組:結(jié)扎冠脈左前降支30分鐘，放松套管再灌注120分鐘;碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)組:以碟脈靈注射液(吉林通化白山藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)20060319)/ml/kg于冠狀動(dòng)脈結(jié)扎前經(jīng)耳緣靜脈滴注，注入藥物30分后按缺血再灌注組組操作;缺血預(yù)適應(yīng)組:結(jié)扎冠脈5分后放松套管再灌注5分，反復(fù)3次，再按缺血再灌注組組操作。

左心室功能測(cè)定沿頸正中切口，經(jīng)右頸總動(dòng)脈插管至左心室后固定，通過壓力換能器聯(lián)接多道生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)，記錄心室內(nèi)壓變化曲線，獲得左室收縮壓峰值(1eftventricular systol ic presstlre，LNSP)左室舒張期末期壓(INEDP)等容收縮期左室內(nèi)壓最大上升速率(+dp/dtmax)。

血清心肌酶含量測(cè)定:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，頸動(dòng)脈取血，分離血清，用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清中乳酸脫氫酶(LDH)及肌酸磷酸激酶同工酶(CK一MB)含量。

ATP含量測(cè)定:用高效液相色譜儀測(cè)定心肌組織ATP含量:取左室心尖部100mg心肌組織置于玻璃勻漿器中，加1ml預(yù)冷的3.6%高氯酸在冰浴條件下制成心肌勻漿，1200r/分鐘低溫離心，取上清直接進(jìn)樣。分離柱:Hypersil，ODS₂，5um，4.0×200mm，柱溫35℃;流動(dòng)相:pH6.0，0.1MKH₂P04/K2HP04#8226;3H₂0:甲醛=88:12:流速:1.0m1/分鐘，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng):254nm。

血清SOD活性和MDA含量測(cè)定:實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，頸動(dòng)脈取血，分離血清，采用黃嘌呤氧化酶測(cè)血清SOD活性，用硫代巴比妥酸(TBA)發(fā)測(cè)MDA含量，操作嚴(yán)格按照試劑盒(購(gòu)自北京生物工程研究所)說明書進(jìn)行，721分光光度計(jì)檢測(cè)血清SOD活性和MDA含量。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±S)表示，用SPSS 11.0 for windows進(jìn)行單因素方差分析，組間比較用q檢驗(yàn)，P<0.05表示差異具有顯著性。

討 論

心肌缺血預(yù)適應(yīng)(IP)是預(yù)防心肌缺血再灌注損傷的有效方法之一，但由于缺血損傷性應(yīng)激過程本身是一種創(chuàng)傷，實(shí)施缺血預(yù)適應(yīng)在臨床還難以接受[6]因此，通過藥理性預(yù)適應(yīng)對(duì)缺血再灌注損傷心肌保護(hù)作用的研究顯得尤為重要[7]。本研究發(fā)現(xiàn)碟脈靈

注射液藥理性預(yù)適應(yīng)能改善兔心肌缺血再灌注時(shí)左心室功能，減少LDH，CK—MB的漏出，改善心肌細(xì)胞ATP的代謝，提高血清SOD活性，減低MDA含量。表明碟脈靈注射液藥理性預(yù)適應(yīng)能減輕心肌缺血再灌注損傷，其保護(hù)效應(yīng)強(qiáng)度與缺血預(yù)適應(yīng)相比無明顯差異，提示碟脈靈注射液的這種保護(hù)作用是通過激發(fā)機(jī)體自身的內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制的結(jié)果。而清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化可能是碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)對(duì)缺血再灌注損傷心肌保護(hù)作用的重要機(jī)制之一。此外，碟脈靈注射液明顯改善心肌血流量的減少及冠脈血管阻力的增加，改善缺血心肌供血，亦可能是其抗心肌缺血的作用機(jī)制之一。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)比探討了碟脈靈注射液藥理性預(yù)適應(yīng)與缺血預(yù)適應(yīng)對(duì)兔缺血再灌注損傷心肌的保護(hù)效應(yīng)，我們初步觀察到，碟脈靈注射液預(yù)適應(yīng)能誘導(dǎo)心肌缺血預(yù)適應(yīng)樣保護(hù)作用，但兩者作用機(jī)理的異同有待進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)

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