１４３份微生物室間質控模擬標本檢測及分析

摘 要 目的:通過回顧分析歷年參加全省微生物室間質控143份模擬標本鑒定情況，總結經驗，提高微生物檢驗質量。方法:對微生物室間質控143份標本的所有菌株結果進行統計分析。結果:通過參加質控活動，大大提高了日常工作能力。結論:做好細菌鑒定除實驗室的試劑齊全和鑒定儀器完備外，對檢驗人員的基礎知識、基本技術的要求也很高，必須掌握一些關鍵性試驗。

關鍵詞 微生物 質量控制 鑒定及分析

doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2009.19.190

資料與方法

1994～2008年所有微生物室間質控模擬標本共143份均來自甘肅省臨床檢驗中心，每年6～12份。

模擬標本分離與鑒定:標本接種按全國臨床檢驗操作規程(第2版)、(第3版)^[1，2]、診斷細菌學^[3]進行，在質控活動規定時間內回寄鑒定結果及藥敏結果，省臨床檢驗中心于2～3個月后反饋評定結果。

藥敏試驗方法:采用美國臨床實驗室標準化委員會(CLSI)推薦的紙片擴散法(K-B法)進行藥敏試驗，根據CLSI判斷標準判斷藥敏結果。

特殊耐藥酶檢測:MRSA、ESBLs、AMPC、β-內酰胺酶均按CLSI推薦的方法進行表型確證試驗。

結 果

143份模擬標本中腸桿菌最多，占30.0%;真菌、G+球菌各占14.7%、19.6%;非發酵占13.3%;少見菌占14.0%;弧菌科、厭氧菌最少，各占4.2%。鑒定準確率平均達到89.5%，其中分別為腸桿菌最高，達到95.3%，少見菌為95.0%，真菌為90.5%，G+球菌為89.3%，弧菌科為83.3%，非發酵為73.7%，厭氧菌最少，為66.7%。

143份模擬標本中鑒定錯誤的菌株共15例，錯誤率為10.5%。鑒定錯誤菌與模擬標本對照見表1。

常規藥敏試驗:各種抗菌藥物的藥敏結果報告符合率，見表2。

混合模擬標本致病菌分離:自2004年開始陸續調查混合模擬標本致病菌分離情況。我科有3例未分離出，占23.1%，正確率為76.9%。

討 論

表1顯示，我科微生物質控鑒定準確率達到89.5%，尤其對于腸桿菌科細菌、少見菌、真菌、G+球菌、弧菌科細菌鑒定符合率較高，連年取得優良以上成績，反映出我科在微生物鑒定方面有較為扎實的工作基礎。

表2顯示，我室鑒定錯誤主要發生在同一菌屬內不同菌種一級的水平上，大方向正確，問題出現在一些細節方面。例如熒光假單胞菌鑒定成惡臭假單胞菌，是由于透明脂酸酶的實驗結果出現誤差而導致;2003年發放的卡他布蘭漢氏菌模擬菌株為多次傳代后凍干菌株，生物學特性發生了變異，其DNA關鍵性鑒別試驗不典型，是我室鑒定為莫拉氏菌的主要原因;產吲哚金黃桿菌鑒定成芳香黃桿菌對糖類發酵分解試驗把握不夠，導致鑒定錯誤;厭氧菌由于平時工作開展的少，缺乏經驗，鑒定符合率較低。

我室在藥敏試驗及耐藥酶檢測符合率基本達到100%，符合率較高，這與工作人員經常翻閱《中華檢驗醫學雜志》等醫學檢驗刊物、資料、嚴格NCCLS(CLSI)標準規范操作、時刻關注對特殊耐藥菌、耐藥酶檢測等知識積累等有很大的關系。例如在1999年發放的標本中，涉及ESBLs、Ampc的檢測，由于我們在接到標本之前已經基本掌握了有關最新耐藥酶檢測的知識，就輕松地切入了鑒定思路。

應做到:①鑒定所用的各種試劑質量一定要過關;②試驗過程中陰、陽性對照一定要做;③對凍干標本質控菌株，分離后往往由于細菌多次傳代后生物學特性發生變異，所以一定不能在初次分離后就急于鑒定，最好多分離幾次，待生物學特性恢復后鑒定;④注意無菌操作，避免污染環境中的細菌;⑤盡可能完善基礎設施;⑥全面考慮，把鑒定工作做實、做細;⑦訂購一些參考書籍，堅持學習，不斷擴大知識面，記錄新出現的細菌生物學特性，為細菌鑒定做好充分的準備工作。

參考文獻

1 葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規程.南京:東南大學出版社，2006.

2 衛生部臨床檢驗中心細菌室.2005年衛生部臨床檢驗中心關于臨床微生物實驗室室內質控要求，2005.