ＥＬＩＳＡ法檢測ＩｇＭ抗體診斷小兒肺炎支原體感染的價值

摘要：目的：探討IgM抗體檢測診斷小兒肺炎支原體感染的價值。方法：對以呼吸道感染收治的102例臨床診斷MP感染住院患兒，隨機選取臨床診斷非MP感染住院呼吸道感染患兒102例作對照，采用酶聯免疫吸附試驗進行血清MP－IgM抗體檢測。結果：MP感染組MP－IgM陽性率(81.4％)明顯高于非感染組(8.8％)，P<0.05。差異有顯著性。3個月～1歲組呼吸道感染MP－tgM陽性率低于另外3個年齡組，P<0.05，差異有顯著性；1～3歲組、3～6歲組及6～12歲組的MP－IgM陽性率相當，均無統計學意義(P>0.05)。結論：ELISA法檢測MP－IgM的結果有較高的靈敏性和特異性，可以MP感染的早期診斷；且MP感染的發病有低齡化趨勢。

關鍵詞：IgM抗體檢測 肺炎支原體感染 小兒

肺炎支原體是引起呼吸道感染的主要病原體，通過呼吸道和飛沫傳播，多發生于冬春及夏秋之交。以往多見于青壯年，近年來在兒童人群中發病率呈上升趨勢，在人群集中的地方，有時呈流行態勢。本病不僅可引起多種呼吸系統疾病，還可導致其他系統的多種并發癥，如心肌炎、腦炎、腎炎等。MP－IgM檢測是目前公認的早期診斷肺炎支原體感染的可靠指標，其特異性強靈敏度高，主要檢測方法有對抗體、抗原及核酸的檢測。我科2007年10月～2008年12月采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)對本院呼吸道感染患兒進行血清MP－IgM抗體檢測和分析，以探討MP－IgM在MP感染中的診斷價值。現報告如下。

資料和方法

標本來源：來自本院兒科病房以呼吸道感染收治的住院患兒102例，其中男55例，女47例；年齡3個月～1歲21例，～3歲26例，～6歲25例，～12歲30例；均符合MP感染臨床診斷標準：①發熱38～39℃，呈弛張熱或不規則熱；刺激性咳嗽，咳非膿性黏稠痰，偶帶血絲。②年長兒常有咽痛、頭痛、胸痛、口腔潰瘍、鼻衄、皮疹；小嬰兒表現為呼吸困難、喘憋。③肺部I羅音不典型，胸片x線表現顯著。白細胞數正常或下降，分類正常，伴血沉增快。④用β－內酰胺類藥物治療無效，經大環內酯類治療效果滿意。⑤MP特異性檢查至少一項陽性。隨機選取臨床診斷非MP感染住院呼吸道感染患兒102例作對照，其中男57例。女45例；年齡3個月～1歲20例，～3歲23例，～6歲28例。～12歲31例；兩組年齡、性別具有可比性。每例均于入院第2天抽血，靜脈抽血后分離血清，置于4～8℃冰箱保存，并于24小時內測定。

檢測方法：采用酶聯免疫吸附試驗，使用深圳安群生物技術有限公司提供的MP－IgM ELISA檢測試劑盒，嚴格按說明書進行操作。測定前血清與吸附劑作用20分鐘。用Rayto RT2100C型酶標儀判讀結果，效價≥1:64為陽性。

統計學方法：采用SPSS10.0軟件包進行統計學分析，計量資料采用t檢驗，計數資料采用X²檢驗。

結果

MP感染組與非感染組MP－IgM檢測結果比較：感染組MP－IgM陽性率(81.4％)明顯高于非感染組(8.8％)，P<0.05，有統計學意義。見表1。

MP-IgM陽性的呼吸道感染患兒年齡分布構成：3個月～1歲組MP-IgM陽性率低于另外3個年齡組，經統計學處理，P<0.05，差異有顯著性；1～3歲組、3～6歲組及6～12歲組的MP－IgM陽性率相當，均無統計學意義(P>0.05)。見表2。

討論

肺炎支原體是介于細菌與病毒之間一種無細胞壁的原核細胞微生物，以呼吸道感染為主要表現，占小兒呼吸道疾病的30％以上，且仍有增加趨勢。MP感染引起的呼吸道感染與病毒及細菌感染難以區別，臨床癥狀多不典型，早期易于誤診，而臨床上早期診斷，早期治療可明顯縮短MP感染病程。發達國家已將肺炎支原體的實驗室診斷列為呼吸道感染性疾病的常規檢測項目。目前，其診斷主要依靠支原體分離培養、血清學檢查和抗原檢測等實驗室檢查手段。培養分離MP雖對診斷和鑒別診斷有決定意義，是確定病原體最可靠的方法，但臨床標本中病原體含量少，呼吸道污染的雜菌較多，陽性率低，且需時長，操作繁瑣，檢出率較低，在臨床上難以推廣。因此。MP的實驗室診斷主要依靠血清學試驗。抗MP－IgM是機體受MP感染時最早出現的特異性抗體，MP感染臨床癥狀出現3天后血清中IgM可被檢出，10～30天達高峰，12～26周消失，故發病lO天后檢測MP－IgM為最佳時期。本文資料顯示臨床診斷MP感染組的MP-IgM陽性率為81.4％，而非MP感染組MP-IgM陽性率僅為8.8％，兩組別間差異有統計學意義(P<0，05)，表明MP－IgM的ELISA檢測結果有較高的靈敏性和特異性。從表2可以看出MP－IgM陽性的呼吸道感染患兒年齡分布，3個月～1歲組MP－IgM陽性率低于另外3個年齡組(P<0.05)；1～3歲組、3～6歲組及6～12歲組的MP－IgM陽性率相當(P>0.05)。表明MP感染的發病有低齡化趨勢。

臨床醫師需要注意的是MP－IgM的陽性率受到年齡、病程、敏感性、免疫狀態等因素的影響。由于嬰兒免疫系統發育不完善，機體感染MP病原體后抗體生成不足；初次感染MP時IgM抗體產生量小，效價不高，由于抗MP－IgM在發病后1周左右才開始上升，對于1周內處于窗口期的MP感染檢測不出抗體；另外，對于免疫功能低下患兒，其免疫反應低，IgM升高幅度很小。因此，MP－IgM抗體陰性并不能否定MP感染。為了彌補抗MP－IgM檢測的上述不足，對于有條件的實驗室可進行MP的PCR法測定，以提高診斷的靈敏性。另外，MP－IgM的產生可因漿細胞受非相關抗原的刺激后產生非特異性反應出現假陽性，而MP－IgA的產生并不受非特異性因素影響，對疑診MP肺炎患兒作MP－IgA與MPIgM聯合檢測，提示IgA比IgM出現稍晚，但持續時間長，特異性強，并與IgM抗體滴度及呼吸道感染關系密切。故認為測定MP－IgA抗體更有價值，提高診斷特異性，兩者同時測定，具有提高MP感染的早期診斷，但目前尚未普及。