柴胡加龍骨牡蠣湯對去卵巢大鼠睡眠時相的影響

黃莉莉,于 爽,李秋紅,李廷利

(黑龍江中醫藥大學中藥藥理教研室,黑龍江哈爾濱 150040)

柴胡加龍骨牡蠣湯為張仲景《傷寒論》中為傷寒八九日,誤用攻下致變證而設。本證以“胸滿煩驚,小便不利,譫語,一身盡重,不可轉側者”為主要臨床表現,以病邪內陷、彌漫全身、表里俱病、虛實錯雜而至少陽樞機不利為主要病機,包括了現代醫學的神經系統、循環系統的部分疾病,以及某些精神疾病的臨床表現。近些年臨床報道,柴胡加龍骨牡蠣湯在治療更年期綜合征以及睡眠障礙等方面取得了很好的療效[1～3]。為此,本實驗采用大鼠皮層腦電圖描記技術,研究柴胡加龍骨牡蠣湯對去卵巢大鼠睡眠時相的影響,以期為中醫臨床應用提供現代藥理基礎。

1 材料與方法

1.1 藥物

柴胡加龍骨牡蠣湯各藥材均購自哈藥集團人民同泰藥店,并經黑龍江中醫藥大學生藥學教研室鑒定,分別為人參 Panax Ginseng C.A.Mey.;肉桂Cinnamomum casia Presl(嫩枝);半夏 Pinellia temate(Thunb.)Breit.r;茯苓 Poria c0o0s(Schw.)Wolf.;黃芩 Scutellaria baicalensis Georgi;柴胡 Bupleurum chinense IX;.;掌葉大黃 Rheum palmatum L.;姜Zingiber officinale Rose.(新鮮根莖);棗 Ziziphus juiuba Mil1.的干燥成熟(果實);長牡蠣等貝殼Concha Ostreae;三趾馬等骨骼化石 Os Draconis。各藥按原方用量比例(除大黃)加適量的水浸泡 2h,煮沸 30min過濾,將濾渣再加適量水煎煮 10min后,加入大黃共煎 10min,合并 2次濾液,濃縮至每毫升煎液相當于原藥材 1g。

1.2 動物

Wistar大鼠,雌性,體重 200g～ 240g,黑龍江中醫藥大學實驗動物中心提供,許可證號黑動字第P00101006。

1.3 儀器

16道生理信號記錄儀(美國 Stoelting公司),大鼠腦立體定位儀(美國 Stoelting公司),有機玻璃籠(自制),恒溫恒濕自動光控電子屏蔽室。

1.4 方法

1.4.1 手術操作 戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(40mg/kg),腦立體定位儀固定,頭部剪毛與消毒后,剪開頭部皮膚,分別于冠狀縫前 1mm及人字縫前 1mm與顱骨中線右側旁開 1mm交叉點處,用特制的止血鉗夾住 2個螺絲釘入顱骨內,使之與硬腦膜接觸,但不穿透硬腦膜,為皮層電極,用于記錄腦電。在兩側頸肌內分別插入銀絲電極以記錄肌電,4個電極分別焊至 4線微型插座上,借牙科水泥固定于顱骨上[5],同時無菌操作行雙側卵巢切除術[6]。假手術組安裝電極后僅切除約 1g重脂肪,不切除卵巢。術后放在特制的有機玻璃筒內單籠飼養,去卵巢大鼠 3d后進行陰道涂片,連續 5d,以證明去勢是否徹底。各組大鼠每天保證明暗交替 12h。

1.4.2 實驗步驟 實驗分為 3組,每組 8只,分別為手術組、假手術組和給藥組。手術組和給藥組為篩選合格的埋好記錄電極的去卵巢大鼠。術后1周,給藥組按 10g/kg(生藥量)的劑量灌胃給予柴胡加龍骨牡蠣湯,手術組和假手術組灌胃給予等容量蒸餾水,共 7d。末次給藥 30min后,頭部的記錄電極通過微型插座和連接線連接到 16道生理信號記錄儀上,記錄腦電和肌電(每日 9∶00～17∶00間進行,計算機自動連續記錄 8h)。

2 結果

柴胡加龍骨牡蠣湯對自由活動去卵巢大鼠睡眠時相的影響

表1 柴胡加龍骨牡蠣湯對自由活動去卵巢大鼠睡眠時相的影響(±s,n=8)

表1 柴胡加龍骨牡蠣湯對自由活動去卵巢大鼠睡眠時相的影響(±s,n=8)

注:與手術組比較:＊P<0.05

組別SWS1(min)SWS2(min)REM(min) WAKE(min)手 術 組 153.33±42.39 27.83±9.83 3.83±4.67 295.00±46.42假 手 術 組 153.41±40.83 49.24±11.42＊ 2.71±2.13 274.63±38.7柴胡加龍骨牡蠣湯 125.25±34.43 82.22±39.56＊ 2.11±1.22 270.42±65.80

表1顯示,去卵巢大鼠與假手術組比較,SWS2明顯縮短,柴胡加龍骨牡蠣湯灌胃 7d后能延長去卵巢大鼠 SWS2,對 SWS1和 REM沒有明顯影響。

3 討論

圍絕經期綜合征是指婦女在絕經前后,由于卵巢功能退行性改變、雌激素水平低下、神經內分泌功能失調、免疫功能下降所導致的以植物神經系統功能紊亂為主并伴有心理癥狀的一組證候群。主要癥狀按系統分為精神神經系統癥狀、血管舒縮失調癥狀、泌尿系統、生殖道及第二性征改變等[7]。

目前西醫治療上主要有激素替代法和以鎮靜催眠藥作為主要治療藥物,同時配合非藥物治療(如睡眠衛生教育、光照治療、心理和認知行為治療)等療法。鎮靜安眠藥物作用特點在于使失眠者入睡快,淺睡眠時間延長,中間不易醒,但都(95%以上)程度不等地縮短了 SWS2和 REMS睡眠,從而產生了嚴重的不良反應,如宿醉、耐受性及依賴型等,使其應用受到限制。隨著激素替代治療使用的不斷增加,其副作用受到越來越多的重視,如誘發乳腺癌、子宮內膜癌、肝腎功能異常等風險增加。

近年來,許多醫家以治療主癥睡眠障礙為主,采用中藥及復方治療圍絕經期綜合征均取得了滿意的臨床療效,且副作用少,故中醫藥治療本病已成為關注的焦點。因此,以治療睡眠障礙為切入點,對傳統的中醫藥進行挖掘研究將對圍絕經期綜合征的治療提供有效藥物。近些年臨床報道,柴胡加龍骨牡蠣湯在治療更年期綜合征以及睡眠障礙等方面取得了很好的療效。

本實驗采用大鼠皮層腦電圖描記技術,首先對去卵巢大鼠的腦電圖進行描記。結果發現,去卵巢大鼠在睡眠時相上表現為 SWS2明顯縮短。SWS2在整個睡眠時相中稱為慢波睡眠深睡期,是最重要的睡眠成分。據此,國內學者提出新型催眠藥物應選擇性地延長慢波睡眠深睡期,同時保證REM正常比例[8]。國內學者還研究發現[9],慢波失眠者有深睡眠減少甚至缺乏,REM(快動眼睡眠)活動度和密度低改變等。多項圍絕經期綜合征流行病學調查表明,我國圍絕經期癥狀中尤以睡眠障礙發生率高[10]。本研究結果表明,去卵巢大鼠與假手術組在睡眠時相上表現為 SWS2明顯縮短,與圍絕經期患者主要癥狀為睡眠障礙相一致,從腦電圖方面為圍絕經期患者的臨床表現提供了依據。柴胡加龍骨牡蠣湯灌胃 7d后能延長去卵巢大鼠 SWS2,對 SWS1和 REM沒有明顯影響。此研究結果在一定程度上明確了柴胡加龍骨牡蠣湯改善由于卵巢衰退而引起的睡眠障礙的藥理作用,為中醫臨床應用其治療更年期綜合征以及睡眠障礙提供了現代藥理基礎。

[1]彭光超.柴胡加龍骨牡蠣湯加減治療更年期綜合征 385例[J].河南中醫,2006,26(9):13-14.

[2]徐奕佳,盧瑜卿.柴胡加龍骨牡蠣湯加減治療更年期精神病50例臨床觀察[J].中醫藥臨床雜志,2006,17(1):32-33.

[3]王普京.柴胡加龍骨牡蠣湯加減治療更年期失眠的療效分析[J].中國中醫基礎醫學雜志,2006,12(5):369.

[4]李鐵成,劉茂祥.柴胡加龍骨牡蠣湯治療失眠癥 40例臨床觀察[J].中國中醫基礎醫學雜志,2008,24(3):24.

[5]程化奇.大鼠更年期實驗模型研究[J].上海實驗動物科學,1993,13(4):192.

[6]Depoortere H.Some aspect of the polygraphic studies on sleepwakefulness cycle in rat.Waking and Sleep,1980,4(1):47-62.

[7]陸洪波,揚曉釗,黃永興.圍絕經期綜合征流行病學研究現狀[J].廣西醫學,2001,23(5):1131-1134.

[8]庫寶善.催眠藥物開發新構想[J].生理科學進展,1992,23:107-109.

[9]李沖,賈福軍,杜好瑞,等.失眠患者的多導睡眠圖研究[J].中華精神科雜志,1999,32(1):35.

[10]閆雪,付桂玲,劉艷驕.女性失眠患者臨床特征的調查研究[J].中國中醫基礎醫學雜志,2006,12(11):855-857.