劉保廷
山東省夏津縣人民醫院檢驗科(253200)
血常規檢驗是臨床檢驗工作的重要內容,是臨床常用的三大檢驗常規之一,隨著現代醫學科學技術的進步和發展,臨床檢驗結果日益成為臨床診斷、治療和搶救中不可缺少的重要依據。化驗結果受很多因素的影響,規范血液標本的采集程序,保證高質量的血樣標本,以提高檢驗結果的準確性。更好地為臨床診斷和治療服務。
采血部位可分為末梢毛細血管法和靜脈采血法,手指血是末梢毛細血管血樣中與靜脈血差異最小且較為穩定的血樣。但有研究表明[1],手指血白細胞計數明顯升高而血小板計數明顯減低,與靜脈血相比準確性和可重復性仍然較差,因此,絕大多數專家建議:血常規檢驗特別是應用血液分析儀時,應使用靜脈血。各類文獻均表明,靜脈血血樣是最可靠的標本,因其可防止血樣中小凝塊的形成,保證儀器進樣時標本能充分混勻。采血時所選擇采血部位的皮膚應完整、無潰爛、無燒傷、凍瘡、發紺、水腫或炎癥等。還應特別觀察標本稀釋、樣本抗凝不佳和溶血等現象。如遇有患者輸液時,應在對側采血,這樣可以減少血樣被稀釋的可能,避免交叉感染。如果從患者輸液留置針處或患者輸液的同側手背抽血,易造成血液稀釋,離心后上層血漿沒有黏性,還常見樣本抗凝不完全的現象,凝塊較小,有時肉眼難以辨認,做完之后發現血小板很低和臨床不符,這種情況下要與臨床聯系后重新抽血。采血時一般選擇暴露明顯的、清晰的、較粗、平直無彎曲易固定的血管,如上肢、肘部的表淺靜脈。不宜在關節處等影響活動的部位采血,防止因關節活動不宜按壓穿刺點,以防造成皮下血腫。止血帶不宜扎太緊,勿讓患者反復做攥拳運動,當需要重復使用止血帶時,應使用另一上臂。止血帶結扎時間最好不超過2min,以免瘀血和血液濃縮,大靜脈回流受阻而使毛細血管內壓增高,血管內液與組織液交流,使分子質量<5000的物質逸入組織液,或缺氧引起血液成分的變化,使檢查結果增高或減低[2]。采血前檢查注射器和針頭,避免因連接不緊而使空氣進入產生泡沫致溶血;采血時應定位準確,嚴禁針尖在靜脈中反復穿刺,否則可造成血腫和血標本溶血;采血完成將血從注射器中推入試管時應把針頭拔掉;采血時體位不同對血常規檢驗結果也有影響靜脈滲透壓增加,一部分水從心血管系統轉移到間質中去,直立位與臥位相比易導致血紅蛋白、白細胞、紅細胞、血細胞比容等項目測定值偏高[3],因此,采血時應盡量統一采血姿勢。采集末梢血標本時應嚴格按照操作規程進行,第1滴血擦去不用,采用第2滴血;血液檢查的標本量與抗凝劑比例要合適。血液比例過高時,容易出現微凝塊,可能阻塞血細胞儀,同時影響一些檢驗結果;血液比例過低,抗凝劑相對過剩,會引起血細胞形態和體積的一些改變,導致結果不準確。采集標本最好采用封閉式真空采血管,既有利于標本的收集、運送和保存,又便于防止血液交叉感染。
住院患者標本應有明確標記,與醫師申請單內容相符,標本運送要做到專人專送。采血完成后,應盡快送檢,采血后要及時與抗凝劑溫和地充分混勻,避免晃動血樣產生溶血,盡快檢測,盡量減少運送和保存的時間,因為標本保存時,血細胞的代謝活動、蒸發和升華作用以及化學反應、微生物降解等因素均會直接影響標本的質量,因而采血后到檢驗間隔的時間越短,檢驗結果越可靠。如果不能及時檢測應放置室溫保存,用EDTA抗凝靜脈血標本在標本采集后的5min內或30min后8h內(室溫)檢測,可以得到最佳的檢測結果。出血性疾病的標本應盡快檢測,全部操作在室溫下2h內完成,置4℃冰箱保存不超過4h,如因故不能及時檢測,樣品必須置冰箱內,但最長不能超過1h。如果不需要血小板和白細胞分類的準確資料,則標本可以在2℃~8℃的條件下保存到24h。低溫(4℃)保存血液可使血小板計數結果減低,因此標本保存不當直接影響實驗結果。血細胞內外各種成分有梯度差,故在采集、運輸和保管、分離血細胞時應盡量避免溶血,使紅細胞計數、血細胞比積等多項指標檢驗結果增高或減低,不能確切反映原始標本的實際含量。
為了取得高質量的標本,采集標本方式到血樣運輸、貯存等多種非疾病因素對檢驗結果的影響。只有對這些因素系統全面的認識,操作規范化、完善制度、加強責任心,才能保證高質量的標本。
患者的活動情況、精神狀態、年齡、性別、種族、樣本采集時間、吸煙、服用藥物、季節等因素都會影響檢測結果。如正常人一日之內,白細胞數、嗜酸性粒細胞數、血小板數等均有一定的波動。因此采血時應詢問是否服用過明顯干擾檢驗的藥物,血液采集前應避免跑步、騎自行車等劇烈運動,冬季應將患者暖和后再采血。不同生理狀態下血細胞各參數也會有所不同,比如妊娠5個月以上或新生兒WBC總數會明顯增高;暴熱或嚴寒常出現一過性WBC總數增高。進食喝水后,血液會有生理性稀釋作用,RBC和Hb檢測結果會有所下降,劇烈運動后血液濃縮,此時迅速采集血液標本可使RBC和Hb檢測結果增高,非急診患者最好固定某一時間檢查,以盡量減少不同生理狀態對檢測結果的影響。
血細胞分析儀只能用儀器配套的校準物對儀器進行校準,一些血細胞分析儀無配套的校準物,這種情況下,實驗室只能使用經二級標準血液分析儀或規范操作的監測系統定值的新鮮血作為校準物對儀器進行校準。有數臺的分析儀的需先對其中一臺進行校準后,在用新鮮的全血對其他臺進行校準。至少半年校準一次。實驗室有數臺血細胞分析儀的,為了保證不同儀器間檢測結果的可比性和準確性,需對每臺儀器進行室內質控、儀器校準等,以保證檢測質量的措施,此外,還需定期用新鮮血標本在實驗室內不同型號的儀器上進行結果比對。自動化儀器的應用大大提高了檢驗工作的效率,減少了標本的人為誤差,血液分析儀分類法有三分群和五分類兩種,速度快、準確性高、易于標準化,能提示異常結果。是白細胞分類和篩檢首選方法,但不能完全代替顯微鏡檢查法對異常白細胞進行鑒別和分類。
用于血常規檢驗的血樣必須經抗凝劑抗凝處理,在目前的眾多抗凝劑中,EDTA鹽是對白細胞形態和血小板影響相對較小的抗凝劑,最適合用于血常規檢驗。血樣的質量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時,由于抗凝劑相對不足,血漿中出現微凝血塊的可能性增加 ,微凝血塊阻塞儀器,影響檢驗指標。血液比例過低,抗凝劑相對過剩,對檢驗指標會造成嚴重影響。血液經EDTA抗凝后,白細胞的形態會發生改變,這種改變和時間及EDTA濃度有關。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5mg/mL,如果血樣少,EDTA的濃度達到2.5mg/mL,中性粒細胞腫脹、分葉消失,血小板腫脹、崩解、產生正常血小板大小的碎片,這些改變都會使血常規檢驗和血細胞計數得出錯誤結果。另外,要嚴格按照儀器的操作規程進行,如儀器的每日清洗和定期保養等。
總之,影響血常規檢驗結果的因素很多,要想取得準確的檢驗結果,就要在實驗的每一步驟中認真操作,把人為因素引起的誤差降到最低,消滅過失誤差,盡量減少偶然誤差和系統誤差,手動檢測要認真觀察儀器的操作狀態,自動進樣器檢測也要隨時觀察,不能放上架就不管了,包括儀器運行是否正常,是否卡管,是否有結果異常,發現問題及時解決,妥善處理,及時糾正潛在引起檢驗結果因素的影響,提高檢驗質量。
[1] 陳芳建.血液標本保存時間對各生化檢測指標的影響[J].檢驗醫學,2006,21(1):87.
[2] 馬雙雙,王紅艷,楊俊.提高血常規檢驗質量的方法和策略[J].臨床誤診誤治,2006,19(11):79-80.
[3] 張云霞.血液細胞分析儀檢驗中的點滴體會[J].實用醫技雜志,2007,14(1):46.