ELISA法與膠體金試紙條檢測HBsAg差異分析

章小軍 丁曉美

(江蘇省泰興市第二人民醫院檢驗科 江蘇泰興 225411)

我國乙肝病毒人群攜帶率大約為10%,乙型肝炎是目前流行最廣泛、危害最嚴重的病毒性肝炎之一。乙肝病毒主要通過血液傳播、性傳播及非消化道傳播。我們應用膠體金試紙條對轄區內人群進行篩查,并與ELISA法進行比較,分析二者在結果上有何差異,然后將強陽性的10份標本作倍比稀釋分析二者靈敏度的差異。

1 材料與方法

1.1 材料

膠體金試紙條為艾康生物技術(杭州)有限公司乙肝病毒表面抗原(HBsAg)膠體金法診斷試劑,酶聯免疫吸附試驗試劑為上海榮盛生物技術有限公司乙肝病毒表面抗原診斷試劑,所有試劑均在有效期內。

1.2 標本來源

1.2.1 我院所屬轄區內的各類人群共360例,分別采集末梢血與靜脈血。

1.2.2 取HBsAg強陽性樣品10例,分離血清1m L,再用生理鹽水作倍比稀釋(原液1∶1；1∶2；1∶4至1∶512)[2]。

1.3 方法

2種方法均嚴格按照試劑說明書進行操作。

1.4 結果判斷

(1)膠體金試紙條。試紙條在檢測線和對照線位置出現兩條紫紅色線結果為陽性,僅在對照線位置出現紫紅色線結果為陰性,試紙條上對照線位置未出現紫紅色結果為無效。(2)ELISA法樣品A值S/CO≥1.0者HBsAg為陽性。

1.5 統計學處理

表1結果采用χ2檢驗,表2結果采用配對t檢驗。

表1 人群篩查結果

2 結果

2.1 人群篩查結果(表1)

從表1可看出,360例人群用ELISA法檢測HBsAg,其中陽性34例,陽性率9.44%;膠體金試紙條檢測HBsAg,其中陽性32例,陽性率8.89%,2法結果經c2檢驗,P>0.001,結果顯示2種方法測定的HBsAg結果間差異無顯著性。

2.2 將倍比稀釋后的標本分別用ELISA法和膠體金試紙條檢測HBsAg結果(表2)

兩法結果經配對t檢驗,ELISA法與膠體金試紙條比較靈敏度有顯著差異(P＜0.001)。

3 討論

ELISA法具有較高靈敏度、特異性強、重復性好等優點,是目前實驗最常用的檢測HBsAg的方法,但是該方法易受加樣、反應溫度、反應時間、洗滌徹底性等諸多因素的影響,而且操作步驟較多,實驗過程較長,因此不適用于急診及無償鮮血現場的篩查。膠體金試紙條法具有操作簡便、快捷、可單份檢測、便于保存、不需特殊設備等優點,在臨床對HBsAg初篩,急診及無償鮮血現場的篩查方面有實用價值,可避免無效采血造成的浪費,節省大量的人力、物力[3]。目前,國產的HBsAg膠體金試紙條檢測靈敏度已達到1ng/m L。但由于膠體金顯色需要較高濃度的標記物,故其靈敏度會受到一定限制,在HBsAg濃度較低時易出現假陰性,造成漏檢[1],為避免假陰性的產生最好用ELISA法進行HBsAg測定。對溶血標本尤其是大量溶血標本用膠體金試紙條檢測HBsAg對檢測結果有顯著影響,應避免使用。

[1]莊昕,姚宗蓓,楊蘭萍,等.膠體金免疫分析法檢測HBsAg效果評估[J].上海預防醫學雜志,2004.5.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].第3版.南京:東南大學出版社,2006:618～621.

[3]邢培清,溫濤,方建華,等.膠體金免疫層析法檢測HBsAg在無償獻血中的應用研究[N].河南醫學院研究,2003,(121):17～19.

表2 將倍比稀釋后的標本分別用ELISA法和膠體金試紙條檢測HBsAg結果