土牛膝水煮液對正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影響

魏得良 黃志芳 黃志紅 胡吉林 李秋

(1.湘南學院化學與生命科學系 湖南 郴州 423000; 2.廣州市第十二人民醫院 廣東 廣州 510620)

土牛膝水煮液對正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影響

魏得良1黃志芳2黃志紅1胡吉林1李秋1

(1.湘南學院化學與生命科學系 湖南 郴州 423000; 2.廣州市第十二人民醫院 廣東 廣州 510620)

目的 研究了土牛膝水煮液對正常及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影響。方法 采用正常小鼠和四氧嘧啶糖尿病模型小鼠,用鄰甲苯胺法測定血糖值。結果 土牛膝水煮液對正常小鼠空腹血糖無明顯降低作用,能降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的空腹血糖水平。結論 土牛膝水煮液對糖尿病小鼠有較好的降糖作用。

土牛膝水煮液 四氧嘧啶 血糖

土牛膝,別名倒扣草,《中國藥典匯編》對土牛膝有如下記載:藥性:苦、涼。歸肺、脾、肝、膀胱經。藥效:敗毒抗癌、逐淤除痹,消炎利尿。現代醫學研究證明,土牛膝具有改善機體微循環,調整新陳代謝,改善免疫功能等作用。具有明顯的抗炎抗菌、鎮痛、抗衰老作用等[1～3]。近年來有研究表明與牛膝含有成分的齊墩果酸、牛膝多糖具有治療糖尿病的功效［4～6],但土牛膝水煮液在治療糖尿病方面的研究尚無報道。以本地野生土牛膝為原料經過水煮濃縮、過濾得到土牛膝水煮液,觀察土牛膝水煮液對正常小鼠以及四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖的影響,如果能確定土牛膝也具有降糖作用,將對糖尿病的治療具有重要意義。

1 材料

(1)土牛膝水煮液,取干燥土牛膝(湖南郴州郊外野生),用冷水浸泡20min后取出,置煎鍋中,加水500mL,大火加熱至沸騰,改小火再煎50min,將水煮液倒入收集燒杯中,再加水適量同法煎煮3次,將藥汁合并過濾,用水浴加熱濃縮至60mL,臨用前用生理鹽水配成所需濃度。

(2)動物昆明種小鼠,體重20～25g,雄性,湘南學院醫學動物實驗中心提供。

(3)試劑和儀器,四氧嘧啶(Alloxan)北京恒業中遠化工有限公司;生理鹽水(自制);肝素鈉,天津藥業焦作有限公司;鹽酸苯乙雙胍(Phen-formin)25mg/片,山東仁和堂藥業有限公司,批號:080612;鄰甲苯胺,海寧市通元化工廠;其余試劑均為市售分析純。電子天平,上海精密儀器儀表有限公司;離心機,江蘇牡丹離心機制造有限公司;722型分光光度計,上海天翔光學儀器有限公司;小鼠用灌胃針頭。

2 方法與結果

2.1 有效劑量的換算

參考徐叔云教授主編的《藥理實驗方法學》[7],通過人和動物間按體表面積折算的等效劑量比值來進行換算,通過計算每只小鼠的保守有效劑量是1.82g·kg-1。

2.2 土牛膝水煮液劑量組配制

分別取土牛膝水煮液用生理鹽水稀釋,配制低(2g·kg-1)、中(4g·kg-1)、高(6g·kg-1)3個劑量組。

2.3 實驗性糖尿病模型的制作

將四氧嘧啶用生理鹽水配成濃度為0.7%的溶液。取昆明種小鼠,試驗前禁食12h,腹腔注射四氧嘧啶0.12g·kg-1,第2天同樣在禁食12h后腹腔注射四氧嘧啶0.1g·kg-1,72h后從小鼠眼眶或尾靜脈取血,用鄰甲苯胺法測血糖,選給藥后血糖值>13.8mmoL·L-1者作為糖尿病模型小鼠。

2.4 對正常小鼠血糖的影響

取30只昆明種小鼠,隨機分成3組,每組10只,即土牛膝水煮液中等劑量組(4g·kg-1);陽性對照組(鹽酸苯乙雙胍0.1g·kg-1);陰性對照組(生理鹽水);均按20mL·(kg·d)-1體積灌胃給藥,連續14d,于末次給藥前禁食12h,給藥后1h小鼠眼眶或尾靜脈取血,用鄰甲苯胺法測定血糖值,所得數據進行組間t檢驗。由表1可見,空白對照組的血糖值即為小鼠的正常血糖,而正常給藥組的血糖值比空白組的略高,但仍處于正常范圍內,并無降糖作用(P＞0.05):而陽性對照組的血糖比空白組略低,但也處于正常范圍內,無明顯的降糖作用。這表明土牛膝水煮液對正常小鼠血糖無明顯影響,有利于開發成為降糖中藥制劑。

2.5 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響

將糖尿病模型鼠隨機分為5組,每組10只,分別為模型對照組(生理鹽水),土牛膝水煮液3個劑量組(2g·kg-1,4g·kg-1,6g·kg-1),陽性對照組(鹽酸苯乙雙胍0.1g·kg-1),給藥方法均同前,連續給藥14d。在末次給藥前12h禁食,給藥1h后眼眶或尾靜脈取血,用鄰甲苯胺法測定血糖值,所得數據進行組間t檢驗。由表2可見,與糖尿病模型組比較,土牛膝水煮液低劑量組能夠降低血糖,中劑量組有明顯的降血糖作用、高劑量組能顯著降低四氧嘧啶模型小鼠的血糖(P<0.05),與對照組(鹽酸苯乙雙胍)具相似降糖效果。與參考文獻[6]中的結果基本相符。

3 討論

表1 對正常小鼠血糖的影響(n=10,)Table 1 the effects on blood glucose in normal mice (n= 10,)

表1 對正常小鼠血糖的影響(n=10,)Table 1 the effects on blood glucose in normal mice (n= 10,)

注:與空白對照組比較(1)P＞0.05

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表2 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響(n=10,)Table 2 the effects on blood glucose in alloxan-induced diabetes mice (n=10,)

表2 對四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖的影響(n=10,)Table 2 the effects on blood glucose in alloxan-induced diabetes mice (n=10,)

注:與模型對照組比較(1)P＜0.05

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實驗結果表明土牛膝能夠降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠血糖水平,對糖尿病小鼠有較好的治療作用,降血糖作用和劑量相關。另外,對正常動物血糖影響較小,有利于今后開發成為低毒的降糖中藥制劑。降糖組分及降糖機理還有待于進一步的深入研究。

[1]史玉芬,鄭延彬.牛膝抗炎、抗菌作用的研究[J].中藥通報,1988,13(7):44～47.

[2]陸兔林,毛春芹,張麗.牛膝不同炮制品鎮痛抗炎作用研究[J].中藥材,1997,20(10):507～509.

[3]馬愛蓮,郭煥.懷牛膝抗衰老作用研究[J].中藥材,1998,21(7):360～362.

[4]唐黎明,呂志鈞,張小萍,等.牛膝多糖藥效學研究[J].中成藥,1996,18(5):31～33.

[5]郝志奇,王瑛.齊墩果酸對小鼠的降血糖作用[J].中國藥科大學學報,1991,22(4):210.

[6]李海泉.牛膝多糖降糖作用實驗研究[J].安徽醫藥,2004,8(5):326～327.

[7]徐叔云,卞如濂,陳修.藥理實驗方法學[M].北京:人民衛生出版社,2002,1(3):202～204.

The Effects of Decoction of Achyranthes Aspera on Normal and Alloxan Diabetic Mice

WEI Deliang1HUANG Zhifang2HUANG Zhihong1HU Jilin1LIQiu1
1.Department of Chemistry and Life Science,Xiangnan University,Chenzhou 423000; 2.No.12 People's Hospital of Guangzhou,Guangdong 510620,China

Objective To study the effects of the decoction of local achyranthes aspera on normal and alloxan diabetic mice.Methods Normal and alloxan diabetic mice are used.Determining their blood glucose by means of o-Toluidine method (O-T).Results the decoction of local achyranthes aspera has no obvious effecs on normal limosis mice,but has obvious effects on lowering the blood glucose in alloxan induced diabetic limosis model mice.Conclusion The decoction of local achyranthes aspera has quite obvious fuctions of lowing blood glucose in the diabetic mice treatment.

Decoction of local achyranthes aspera;Alloxan;Blood glucose

R587.1

A

1674-0742(2010)08(c)-0008-02

2010-06-10