替加環(huán)素對鮑曼不動桿菌的體外抗菌活性

徐嬌君，呂火祥，胡慶豐，殷 偉，沈蓓瓊，朱永澤，徐 娟

(1、浙江省金華市人民醫(yī)院檢驗科，浙江 金華 321000；2、浙江省人民醫(yī)院檢驗醫(yī)學中心，浙江 杭州 310014)

鮑曼不動桿菌(Acinetobacter baumanni)是一種非發(fā)酵的革蘭陰性條件致病菌，也是醫(yī)院內(nèi)不動桿菌屬爆發(fā)流行中最主要的菌種，它廣泛分布于水，土壤，人體皮膚，口腔粘膜，呼吸道和泌尿道中，尤其醫(yī)院環(huán)境中從各種用具和醫(yī)務人員手的檢測率均很高且可長期存活，可引起菌血癥，腦膜炎，肺炎及傷口感染等，對危重患者和CCU及ICU中的患者威脅很大，此類感染也被稱作ICU獲得性感染。另外，隨著廣譜抗生素的廣泛使用及介入性操作的普及，導致鮑曼不動桿菌的耐藥率也逐年增高，出現(xiàn)了多重耐藥甚至“全耐藥”的鮑曼不動桿菌[1]，因而給感染性疾病的治療帶來相當大的困難。替加環(huán)素[2]是近年來開發(fā)的甘氨酸環(huán)素類抗生素藥物，已在美國上市[3]由于在國內(nèi)還未上市，本文用K-B法檢測臨床分離的100株鮑曼不動桿菌菌株對替加環(huán)素的藥敏情況，為臨床治療，控制醫(yī)院感染提供參考依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1 .1資料來源 100株鮑曼不動桿菌分離自浙江省人民醫(yī)院2009年7月至2010年2月住院患者送檢標本。分別來自痰液56株、咽拭子25株、血液11株、分泌物6株、腹水1株、膿液1株。同一患者多次分離的菌株只取1株。

1.1 .2儀器與試劑 VITEK-32型全自動微生物分析儀、M-H瓊脂均購自法國生物梅里埃公司、替加環(huán)素紙片15μg/片(Oxoid公司，美國輝瑞公司惠贈)。

1.2 方法

1.2 .1菌種分離與鑒定 將待檢標本接種于羊血哥倫比亞瓊脂平板，35℃培養(yǎng)18～24h，分離純化后，用VITEK-32型全自動微生物分析儀配套的革蘭陰性菌鑒定卡GNI和GNS藥敏卡進行菌株鑒定及常規(guī)藥物敏感性檢測，具體操作按使用說明書。

1.2 .2 K-B紙片擴散法 取0.5麥氏單位的菌液，按標準的K-B法將菌液涂布于M-H平板上，室溫放置15min，待表面干后，將紙片貼在瓊脂表面。35℃孵育16～18h，用精密度為1mm的游標卡尺量取抑菌圈直徑 (抑菌圈的邊緣應是無明顯細菌生長的區(qū)域)。目前CLIS2009版沒有替加環(huán)素的藥敏結果的判定標準，本研究的判定標準參照美國FDA給出的替加環(huán)素的抑菌圈的直徑(mm)來判讀結果。對于不動桿菌屬：抑菌圈的直徑≥16mm為敏感(S)，抑菌圈的直徑在13～15(mm)之間為中介(I),抑菌圈的直徑≤12mm為耐藥(R)。

2 結果

100 株鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素的檢測結果見表1顯示：這100株鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素的敏感率為57%。

3 討論

替加環(huán)素是米諾環(huán)素的衍生物，是第一個應用于臨床的甘氨酸環(huán)素類抗生素。替加環(huán)素適用于18歲以上患者敏感菌所致感染的治療，2005年FDA已批準的適應癥包括：復雜性皮膚和皮膚軟組織感染、復雜性腹腔內(nèi)感染、社區(qū)獲得性細菌性肺炎。研究表明替加環(huán)素作用機制是以陽離子-四環(huán)素類復合物形式通過主動轉運機制穿過細菌外膜并聚積在包膜間質(zhì)，接著復合物解離，具有弱親和脂性、電中性的四環(huán)素分子通過彌散方式透過細胞膜進入細胞。一旦進入細胞質(zhì)，四環(huán)素很可能與陽離子形成螯合物，并與核糖體30S亞基結合，阻斷氨酰基-轉移RNA(t-RNA)進入A位點，從而阻斷肽鏈的延長繼而抑制細菌蛋白質(zhì)的合成[4,5]。四環(huán)素類和甘氨酰環(huán)素類共享一個核糖體結合位點，該位點位于16S rRNA的30S亞基上。替加環(huán)素與核糖體結合的緊密度為四環(huán)素和米諾環(huán)素的5倍[6]。替加環(huán)素也可能通過另外的結合位點，使其對核糖體保護介導的耐藥菌仍保持活性[7]。

表1 100株鮑曼不動桿菌對替加環(huán)素抗菌藥物耐藥情況

表2 替加環(huán)素與常用藥物對100株鮑曼不動桿菌耐藥性比較

鮑曼不動桿菌屬非發(fā)酵菌，是能在人類皮膚表面生存的革蘭陰性桿菌。本屬菌對營養(yǎng)無特殊要求，抵抗力強，可在環(huán)境中廣泛存在，在干燥物體表面存活時間較長。在健康人群中其定植率為40%，在住院病人中定植率為75%[8]。不動桿菌在臨床標本分離率僅次于銅綠假單胞菌[9]，醫(yī)院感染不動桿菌屬較社區(qū)獲得性感染的菌株藥耐性高，易于發(fā)生耐藥菌的傳播和擴散，特別是產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶菌株常造成感染的流行與暴發(fā)[10]。同時由于長期抗生素選擇壓力使泛耐藥株明顯增加，特別是對廣譜β-內(nèi)酰胺類藥物的耐藥，給臨床抗菌治療帶來了極大的困難。研究顯示，100株鮑曼不動桿菌對常用抗菌藥物的藥敏試驗結果表明：頭孢西丁的耐藥率已達到了91%；其他如亞胺培南，美洛培南，頭孢吡肟,左氧氟沙星,慶大霉素耐藥率都達到了50%以上分別為69%，65%，71%，66%，55%。相對阿米卡星的耐藥率稍微低些，為38%；多粘菌素B的耐藥率為0。本試驗所研究的替加環(huán)素的耐藥率為22%，中介率為21%，敏感率為57%。在本研究中，替加環(huán)素對鮑曼不動桿菌感染有一定的抑菌效果，臨床可結合病情，考慮合理使用抗菌藥物以降低鮑曼不動桿菌的耐藥性。

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