參降湯對心肌缺血再灌注模型的影響研究*

蔡少峰 張新鳳 馮則一 鄖陽醫學院附屬東風總醫院 (十堰 442008)

參降湯是導師張新風主任多年從事中醫心血管病防治的臨床經驗方,由黨參、降香、水蛭、紅花、蘇木、香附、徐長卿等組成。主要用于冠心病之心絞痛、心律失常及介入治療后心功能低下者,在臨床上取得較好的療效。本實驗觀察參降湯對心肌缺血再灌注模型大鼠的影響,現報道如下:

1 材料 1.1 實驗動物 健康雄性 Wistar大鼠,體重200士 20g,由鄖陽醫學院提供,合格證號:SCXK(鄂 )2003-0005。

1.2 觀察藥品 參降湯主要由黨參、降香、水蛭、紅花、蘇木、香附、徐長卿等組成。購于東風總醫院 ,水煎煮 2次,合并所煎藥液,濃縮至每毫升含生藥 0.699(低劑量組)與每毫升含生藥 2.80(高劑量組)。卡托普利 (開搏通 )中美上海施貴寶制藥有限公司,批號:20061020。 12.5mg/片,溶解至每毫升含原藥0.137mg。

2 方法 2.1 實驗動物與給藥方法 將大鼠隨機分為 5組,每組 8只。① 假手術組;② 模型組;③參降湯低劑量組;④參降湯高劑量組;⑤對照組。假手術組與模型組每天灌服生理鹽水;低劑量組灌服參降湯藥含生藥 13.98? kg-1? d-1;高劑量組灌服參降湯藥含生藥 55.92? kg-1? d-1;對照藥組灌服卡托普利溶液含原藥 3.75mg? kg-1? d-1;各組均于試驗前一周開始給藥每天灌藥 2次每次 2mL。

2.2 心肌缺血再灌注模型的建立 按文獻[1]方法適當加以改進,末次給藥后 1h,大鼠腹腔注射 0.3%戊巴比妥那麻醉(30mg/kg),固定后,行氣管切開術,并給予人工機械通氣,呼吸頻率 65～ 70次 /min。于胸骨左緣 2～ 4肋間打開胸腔及心包膜,暴露心臟;在肺動脈圓錐右緣,于左心耳下緣 1～ 2mm處經左冠狀動脈下淺層心肌穿一 5/0號絲線,連同一直徑 2mm聚氯乙烯管結扎冠狀動脈左前降支(Left desending coronary artery,LAD),造成心肌缺血。結扎 LAD10min后將眼科剪伸入聚氯乙烯管,剪開管壁的同時剪斷絲線,使缺血心肌恢復血流灌注,再灌 30min后結束實驗。整個實驗過程中,用RM6240C多道生理信號采集處理系統連續記錄標準肢體Ⅱ導心電圖,以結扎后出現心電圖Ⅱ導 ST段抬高或降低為模型成功的標志。

2.3 標本采集 再灌注即刻從頸動脈取血 2mL,分離血清檢測 CK、LDH。并立即取左室心尖組織,以生理鹽水沖洗殘血,濾紙吸干水分,用生理鹽水制成 10%心肌均漿,分別測定心肌 SOD、MDA含量。步驟和計算公式嚴格按照試劑盒說明書操作。

3 實驗結果 見表 1、表 2。

表1 參降湯對缺血再灌注損傷大鼠血清LDH、CK含量的相互比較(±s)

表1 參降湯對缺血再灌注損傷大鼠血清LDH、CK含量的相互比較(±s)

與模型組比較△P＜0.01,與假手術組比較,▲P＜0.01,與低劑量組比較,◇P＜0.01,◆ P＜0.05,與高劑量組比較,□ P ＜ 0.01,■ P ＜0.05。

組 別 n CK(U/mL) LDH(nmoL/g)假手術組 8 66.63± 9.72△◇ 1370.80± 140.46△◇■模型組 8 175.14± 19.60▲◇□ 2616.15± 353.48▲◇□低劑量組 8 97.28± 13.83△▲■ 1977.31± 158.17△□高劑量組 8 73.44± 15.99△◇ 1656.85± 207.46△◇對照組 8 110.57± 12.52△▲□ 2002.17± 222.24△□

表2 參降湯對缺血再灌注后大鼠SOD、M DA水平的相互比較(±s)

表2 參降湯對缺血再灌注后大鼠SOD、M DA水平的相互比較(±s)

與模型組比較△P＜0.01,與正常對照組比較,▲P＜0.01,◇P＜0.05,與低劑量組比較,◆P＜0.01,與高劑量組比較 ,□P ＜ 0.01。

組 別 n SOD(U/mg) M DA(nmoL/g)假手術組 8 131.73± 22.30△◆ 6.60± 1.11△◆□模型組 8 66.82± 9.28▲◆□ 19.08± 1.90▲◆□低劑量組 8 110.14± 15.23△▲ 12.08± 1.91△▲□高劑量組 8 124.87±9.00△ 9.61±1.73△▲◆卡托普利組 8 116.03± 12.56△◇ 13.02± 2.17△▲□

實驗結果顯示①缺血再灌注模型組大鼠心肌組織的 MDA含量較假手術明顯升高(P＜0.01),而 SOD水平則顯著降低(P＜0.01),說明心肌缺血再灌注導致組織的抗氧化能力顯著降低。②對照組、參降湯高劑量及低劑量組的心肌組織 MDA含量均顯著低于缺血再灌注模型組 (P＜0.01),參降湯高劑量的心肌組織 MDA含量均顯著低于低劑量組及對照組;對照組、參降湯高劑量及低劑量組的心肌組織 SOD活性則顯著高于缺血再灌注模型組(P＜0.01)。說明參降湯對心肌細胞具有與卡托普利相近的保護作用,可明顯增強機體清除自由基的能力,且高劑量組優于低劑量組及對照組。

CK廣泛存在于細胞漿膜中,尤以心肌細胞最多,當心肌細胞受損傷時 ,CK滲到血液中 ,活性增高,故血清中 CK活性越高,心肌損傷越嚴重。LDH亦是一種心肌酶,當心肌缺血再灌注損傷時,心肌酶釋放增加。

實驗結果顯示:①心肌缺血再灌注模型組的血清 LDH、CK水平顯著高于假手術組 (P＜0.01),表明缺血再灌后血清LDH、CK水平顯著升高。②對照組、參降湯高劑量及低劑量組的血清 LDH、CK值均顯著低于缺血再灌注模型組(P＜0.01),參降湯高劑量組的血清 LDH、CK值顯著低于低劑量組及對照組,說明參降湯組及卡托普利均可以減少因缺血再灌注而引起的心肌酶的釋出,且高劑量參降湯作用優于卡托普利及低劑量參降湯。

4 討 論 目前,心肌缺血再灌注損傷的發病機制尚未徹底闡明,可能是多種因素共同作用的結果,如自由基的產生增加、細胞內鈣超載以及內皮損傷等的影響。在心肌缺血再灌注時,自由基的含量可增加數倍,過多的自由基可激發鏈式脂質過氧化反應造成細胞膜的損傷,嚴重時造成細胞的死亡[2]。M DA是氧自由基脂質過氧化的最終產物,可破壞細胞膜,使胞內 Ca2+、Mg2+嚴重超負荷,線粒體合成三磷酸腺昔(AT P)的量明顯減少,進而抑制心功能 ,引起嚴重的心律失常,最終導致心肌細胞死亡。因此測定 M DA含量能間接反映氧自由基的含量和脂質過氧化的程度。SOD是體內清除氧自由基抗氧化酶系統的成員之一,對一體內氧化和抗氧化平衡起著非常重要的作用,可清除超氧陰離子,保護細胞免受氧自由基損傷。因此測定SOD活性能反映機體內抗脂質過氧化的能力[3]。

中醫學中雖無心肌缺血再灌注損傷這一病名,但根據其臨床表現,應分屬中醫的“心悸”、“怔忡”等病范疇。祖國醫學關于“心悸”、“怔忡”證候表現的描述早在《內經》中即已有之,如《素問?至真要大論》篇曰:“心中澹澹大動”;《素問?三部九候論》曰:“叁伍不調者病”;以及《靈樞?本神》篇所講的“心休惕”等。心悸之病始見于漢代張仲景的《傷寒雜病論》,書中稱心悸為心動悸、心下悸、心中悸、驚悸等不同名稱。而心悸之病名則首見于唐?孫思邈的《千金要方》,書中曰:“陽氣外擊,陰氣內傷,……虛則驚,掣心悸……”。心悸、怔忡的產生多正虛在前,陳士鐸《石室秘錄》說:“怔忡之證,……此肝腎之虛,而心氣之弱也”。心主血脈,有賴心氣的推動 ,心氣不足,則血運無力 ,氣虛日久,血行滯緩則心脈瘀阻。近代許多醫家亦認為本病多屬虛證,以氣虛為本,血瘀為標。氣為血帥,心氣不足則血液運行無力,心失所養而致心悸、怔忡;氣行不暢,血脈瘀阻,脈道不通,故脈歇止不齊。

參降湯是導師張新風主任多年從事中醫心血管病防治的臨床經驗方,臨床觀察證實[4],該方對冠心病心律失常有較好的臨床作用。參降湯以黨參益氣養血為君以治本,紅花活血通經,祛瘀止痛,蘇木活血祛瘀通經以治標,共為臣藥,黨參與紅花、蘇木相配,共奏補氣活血化瘀之功。降香理氣化瘀,香附疏肝理氣,共為佐藥,與活血化瘀藥紅花、蘇木相配 ,根于“氣為血之帥,氣行則血行,氣滯則血瘀”。徐長卿鎮靜止痛,亦為佐藥協助君臣藥以加強治療作用。總之,諸藥合用共奏補氣活血化瘀,理氣止痛之功。

通過試驗,可得出如下結論:①參降湯能夠顯著抑制心肌SOD活力的下降 ,也可使 M DA生成量顯著減少,保護心肌細胞膜,進而保護缺血再灌的心肌。②參降湯可顯著減輕心肌細胞損傷程度,減少心肌損傷時引起的心肌酶 CK、LDH的釋放;③參降湯的作用優于西藥對照組,從而為中醫藥防治此病提供了理論依據。

[1] 齊志敏 ,張 瑩,王 倩.大鼠心肌缺血再灌注損傷實驗模型研究[J].中國臨床康復,2004.30(8):6620-6621.

[2] Pierre S,Jamme I,Droy L,et al.Ginkgo biloba extract(EGb 761)protects Na,K-ATPase activity during cerebral ischemia in mice[J].Neuroreport,1999,10(1):47.

[3] 王迪潯 ,金惠銘.人體病理生理學[M].北京:人民衛生出版社,2002,744-746.

[4] 蔡少峰 ,張新鳳,李繼端.參降湯治療冠心病室性早搏臨床觀察[J].中國中醫藥信息雜志,2007,14(1):68.