復(fù)爾康注射液熱原檢查試驗(yàn)＊

李蓉 任美萍 陳海霞 肖順漢 李茂 劉明華

(瀘州醫(yī)學(xué)院藥理毒理學(xué)研究室,四川 瀘州 646000)

復(fù)爾康注射液是我院藥研所馮文宇教授研制的具有靶向功能的多相脂質(zhì)體注射液,體內(nèi)外藥效學(xué)試驗(yàn)表明,該制劑具有抗肝癌[1]、肺癌[2]、白血病[2,3]的作用。本試驗(yàn)對該藥給予動(dòng)物后的熱原反應(yīng)進(jìn)行了研究,為該藥安全有效地應(yīng)用于臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 藥品 復(fù)爾康注射液：批號：090923,090926-2,由瀘州醫(yī)學(xué)院藥研所提供,給藥劑量設(shè)為 2.5ml?kg-1。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 日本大耳兔,白色,普通級,體重2.0～2.2kg,雌雄各半,購自瀘州醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心(合格證號：川實(shí)動(dòng)證第17號)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)在瀘州醫(yī)學(xué)院普通級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,溫度：22～25℃。

1.3 方法[4]

1.3.1 供試用家兔的篩選

檢查供試品前3～7日內(nèi)預(yù)測體溫,進(jìn)行挑選,每隔30min測量體溫1次,共測8次,8次體溫均在 38.0～39.6℃的范圍內(nèi),且最高與最低體溫相差不超過0.4℃的家兔,方可供熱原檢查用。用于熱原檢查后的家兔,如供試品判定為符合規(guī)定,至少應(yīng)休息48h方可供熱原檢查用,其中升溫達(dá)0.6℃的家兔應(yīng)休息2w以上。如供試品規(guī)定為不符合規(guī)定,則組內(nèi)全部家兔不再使用。

1.3.2 試驗(yàn)前的準(zhǔn)備

在做熱原檢查前2d,供試用家兔處于同一溫度的環(huán)境中,實(shí)驗(yàn)室和飼養(yǎng)室的溫度相差不大于3℃,并控制在17～25℃,在試驗(yàn)全部過程中,試驗(yàn)室溫度變化不大于5℃,同時(shí)防止動(dòng)物騷動(dòng)并避免噪聲干擾。與供試品接觸的試驗(yàn)用器皿應(yīng)無菌、無熱原。

1.3.3 正常體溫的測定

家兔在試驗(yàn)前2h開始停止給食,并置于寬松適宜的裝置中,直至試驗(yàn)完畢。測量家兔體溫均使用精密度為±0.1℃的測溫裝置。肛溫計(jì)插入肛門的深度和時(shí)間各兔均相同,深度為6cm,時(shí)間不得少于3min,每隔30min測量體溫1次,測量2次,兩次體溫之差不得超過0.2℃,以此兩次體溫的平均值作為該兔的正常體溫。當(dāng)日使用的家兔,正常體溫應(yīng)在38.0～39.6℃的范圍內(nèi),且同組各兔間正常體溫之差不超過1℃。

1.3.4 給藥后體溫測定及溫差計(jì)算

兩個(gè)批次的復(fù)爾康注射液分別用家兔3只,測定其正常體溫后15min以內(nèi),自耳緣靜脈緩緩注入規(guī)定劑量(2.5ml?kg-1)并溫?zé)嶂良s38℃的供試品溶液,然后每隔30min按前法測量其體溫1次,共測6次,以6次體溫中最高的一次減去正常體溫,即為該兔體溫的升高溫度(℃)。

在初試的3只家兔中,體溫升高均低于0.6℃,并且3只家兔體溫升高總和低于1.4℃,則判定供試品的熱原檢查符合規(guī)定。當(dāng)家兔升溫為負(fù)值時(shí),以0℃計(jì)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

注射兩個(gè)批次的復(fù)爾康注射液后,同批次的3只家兔體溫升高均低于0.6℃,并且3只家兔體溫升高總和均低于1.4℃,給藥后各時(shí)間點(diǎn)的體溫值與正常體溫相比,P＞0.05,差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。故判斷供試的兩個(gè)批次的復(fù)爾康注射液均無熱原反應(yīng)(見下表)。

表 家兔體溫記錄表(,n=3)

表 家兔體溫記錄表(,n=3)

供試藥批次正常體溫(℃)給藥不同時(shí)間點(diǎn)家兔體溫(℃)30min 60min 90min 120min 150min組內(nèi)最高升高溫度(℃)組內(nèi)體溫升高總和(℃)090923 38.84±0.48 38.43±0.59 38.47±0.46 38.67±0.31 38.43±0.40 38.43±0.42 38.73±0.21 0.3 0.4090926-2 39.05±0.25 38.77±0.25 39.00±0.10 39.10±0.17 39.17±0.06 39.07±0.23 39.07±0.12 0.4 0.55

3 討論

復(fù)爾康注射液作為一種具有靶向功能的脂質(zhì)體注射液,將應(yīng)用于肝癌、肺癌、白血病等惡性腫瘤的治療中,本研究考察了其靜脈注射于家兔后的熱原反應(yīng)情況,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示復(fù)爾康注射液不引起熱原反應(yīng),將為復(fù)爾康注射液安全應(yīng)用于臨床惡性腫瘤的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 劉明華,李蓉,李茂,等.復(fù)爾康注射液對HepG2細(xì)胞增殖及血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)的影響[J].時(shí)珍國醫(yī)國藥,2009,20(9)：2249-2250.

2 馮文字,肖順漢,何兵,等.復(fù)爾康注射液對人肺癌和白血病細(xì)胞株的生長抑制作用[J].瀘州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,31(1)：9-11.

3 馮文宇,何兵,劉明華,等.復(fù)爾康注射液抗白血病的實(shí)驗(yàn)研究[J].中成藥,2008,30(9)：1377-1378.

4 中國藥典(2005版)[S]第二部：附錄85.