呼吸道感染革蘭陰性桿菌的分布及藥敏分析

胡耀文 樓亞玲 趙志偉 (浙江余姚市人民醫(yī)院 35400; 遼寧錦州市中心醫(yī)院)

近年來由于慢性阻塞性肺疾病患病率增高,臨床濫用抗生素現(xiàn)象較為普遍，加上化療及免疫療法的應用等，使呼吸道感染的菌譜構成及其抗生素的敏感性發(fā)生明顯變化。為了解引起呼吸道感染的革蘭陰性桿菌菌譜構成及其對抗生素的耐藥性，本文分析了我院近1年半來引起呼吸道感染的革蘭陰性桿菌分布及耐藥性，為監(jiān)測耐藥菌株變化趨勢及臨床用藥提供依據(jù)。結果報道如下：

1 材料與方法

1.1 標本來源 收集2006年6月至2008年1月我院臨床各科診斷為呼吸道感染的住院患者(短期內多次檢測出同一種類細菌者只計1次)的痰液及咽部分泌物標本319份。標本采集前，患者晨起常規(guī)刷牙，用0.9%氯化鈉注射液(生理鹽水)漱口3次，深咳留痰或經(jīng)支氣管無菌毛刷采取標本，然后立即送檢。

1.2 培養(yǎng)方法 送檢標本均接種于血平板、麥康凱平板，巧克力色平板。按要求分別置普通培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)，箱內溫度37℃，培養(yǎng)時間24h。經(jīng)分離培養(yǎng)后取單一菌落進行細菌鑒定。

1.3 鑒定與藥敏試驗 使用VITEK 32全自動微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)，對分離培養(yǎng)的菌落進行鑒定和藥敏試驗，選用大腸桿菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 29213和銅綠假單胞菌ATCC 27853進行質控，嚴格按照美國國家臨床檢驗標準委員會(NCCLS)推薦的方法對菌株的耐藥監(jiān)測結果進行分析[1]。

1.4 超廣譜β－內酰胺酶試驗(ESBLs)使用VITEK 32全自動微生物鑒定/藥敏分析系統(tǒng)進行ESBLs檢測[2]。

2 結果

2.1 細菌分布 送檢痰液及咽部分泌物標本共319份，經(jīng)培養(yǎng)鑒定獲得致病菌232株。在分離到的致病菌中，以革蘭陰性為主，占68.1%(158/232)。所有檢出的革蘭陰性菌中，占致病菌前5位的依次是：銅綠假單胞菌(49株,31.0%),大腸埃希菌(40株,25.3%),肺炎克雷伯菌(26株,16.5%),陰溝腸桿菌(18株,11.4%)；不動桿菌(11株,7.0%)；其他革蘭陰性菌14株(8.9%)。

2.2 藥物敏感性分布 5種主要致病菌對10種抗生素敏感率分布見表1。10種抗生素中，銅綠假單胞菌對頭孢他啶的敏感率最高（79.6%），對亞胺培南的敏感率位于第二位(73.5%)；大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌、不動桿菌均對亞胺培南的敏感率最高，分別為97.5%、96.2%、94.4%、90.9%。5種致病菌對氨芐西林的敏感率最低。

2.3 革蘭陰性桿菌超廣譜、β-內酰胺酶(ESBLs)檢出率及藥敏結果 檢出率：銅綠假單胞菌46.9%(23/49)，大腸埃希菌32.5%(13/40)，肺炎克雷伯菌42.3%(11/26)。3種產(chǎn)ESBLs的革蘭陰性桿菌，針對除亞胺培南外的其他9種抗生素，僅肺炎克雷伯菌對頭孢哌酮舒巴坦的敏感率稍高，為54.5%，對其他藥物的敏感率均低于50%或更低。3種產(chǎn)ESBLs的革蘭陰性桿菌對亞胺培南的敏感率較為理想，分別為：銅綠假單胞菌(95.7%)，大腸埃希菌(92.3%)；肺炎克雷伯菌(90.9%)。

表1 臨床常用抗生素對檢出的5種主要致病菌療效情況 [有效株數(shù)(%)]

3 討論

對于呼吸道細菌感染，抗生素的臨床應用仍是目前控制感染的有效方法，但由于濫用或不合理使用抗生素，引發(fā)細菌耐藥菌的變遷和抗生素耐藥率的上升，影響臨床療效。痰液及呼吸道分泌物培養(yǎng)是呼吸道感染病原菌診斷的重要手段，分析痰液及呼吸道分泌物病原菌菌株種類和耐藥情況對指導臨床用藥具有重要意義。

本次研究分離的232株致病菌中，革蘭陰性桿菌共158株，占68.1%。前5位依次是銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝桿菌、不動桿菌，構成了引起呼吸道感染的主要致病菌。藥敏結果表明，上述細菌對多種抗生素均有較高的耐藥性，銅綠假單胞菌是本次檢測到的首要病原菌，對多種常用抗生素敏感性均較低，應引起高度重視。分析這種情況的產(chǎn)生一方面與抗生素本身有關，另一方面與抗生素廣泛應用有關。由于濫用廣譜抗生素，使細菌很快產(chǎn)生耐藥性[3]。近年來β-內酰胺類抗菌藥物的大量使用，導致產(chǎn)ESBLs菌株明顯增多，本文檢測到的主要致病菌大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌和不動桿菌對亞胺培南的敏感性均較高，其原因是由于亞胺培南具有β-內酰胺環(huán)的獨特結構，使其免受β-內酰胺酶的影響[4]，故能發(fā)揮良好的抗菌作用。但ESBLs可以通過接合、轉化和轉導等形式使耐藥基因在細菌間擴散[5]。近年來，產(chǎn)β-內酰胺酶細菌的耐藥性逐年升高。從本文研究可以看出，產(chǎn)ESBLs菌對第三代頭孢菌素、氨基苷類、喹諾酮類和磺胺類呈多重耐藥，頭孢三代加酶抑制藥(頭孢哌酮舒巴坦)的耐藥率也幾乎達到了50%，對亞胺培南耐藥率卻很低。因此，對產(chǎn)ESBLs的革蘭陰性桿菌，亞胺培南的抗菌活性最強，這與碳青酶烯類抗生素特殊的空間構象有關[5]，臨床上可考慮將亞胺培南等碳青酶烯類作為抗上述病原菌的首選藥。

筆者認為，對感染性疾病的治療應強調在病原菌的分離培養(yǎng)和藥敏試驗的基礎上嚴格掌握抗菌藥物的適應證，合理使用抗生素，以減少耐藥菌的產(chǎn)生。

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