腦脊液Tau蛋白及β淀粉樣蛋白水平對(duì)阿爾茨海默病和輕度認(rèn)知障礙診斷的意義

趙荷劍 李郭飛 郭 亞 王朝輝 崔 蓓 賀維亞 魯廣秀 劉 森 劉大建

河南大學(xué)淮河醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科 開封 475000

輕度認(rèn)知損害(mild cognitive impairment,MCI)是介于正常衰老和癡呆之間的一種認(rèn)知功能損害狀態(tài)。Johnson等報(bào)道,40%的 MCI患者 2年后可進(jìn)展為 Alzheimer病(AD)[1];McKelvey等報(bào)道,53%的MCI患者3年后可發(fā)展為AD[2];相同年齡的正常個(gè)體每年發(fā)生AD的概率為1%～2%。鑒于此,許多學(xué)者認(rèn)為,MCI是AD的極早期階段。已有研究證實(shí)AD、MCI患者和正常對(duì)照健康人的腦脊液Tau蛋白和Aβ水平有顯著差異,腦脊液中Tau蛋白和Aβ的濃度水平變化可以作為 MCI及 AD的診斷依據(jù),本研究對(duì)MCI患者和MCI患者的腦脊液 Tau蛋白和Aβ水平進(jìn)行了比較,以期探討和驗(yàn)證Tau蛋白和 Aβ 1-42在MCI和AD的診斷及鑒別診斷中的臨床應(yīng)用價(jià)值和意義。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象 MCI病例的納入標(biāo)準(zhǔn):(1)僅有記憶缺陷,沒有其他認(rèn)知障礙等癥狀;(2)經(jīng)神經(jīng)心理測(cè)試證實(shí)存在記憶損害;(3)患者日常生活能力正常;(4)根據(jù)美國統(tǒng)計(jì)診斷手冊(cè)第4版修訂本(DSM-IV)標(biāo)準(zhǔn)確診為非癡呆患者;(5)簡(jiǎn)易智能狀態(tài)檢查量表(MMSE)≥27分;(6)MCI和對(duì)照組的患者無發(fā)熱癥狀和感染發(fā)生;(7)MCI患者和對(duì)照組的紅細(xì)胞沉降率均在正常范圍內(nèi);(8)所有患者均沒有伴發(fā)惡性腫瘤;(9)M CI患者和對(duì)照組均無自身免疫異常等相關(guān)疾病,且沒有接受過免疫抑制治療。根據(jù)以上納入標(biāo)準(zhǔn),本研究共篩選納入MCI患者32例,其中男17例,女 15例,年齡51～ 84歲,平均(65±12.5)歲。

AD病例入組標(biāo)準(zhǔn):(1)符合美國國立神經(jīng)病、語言障礙和腦卒中研究所-老年性癡呆及相關(guān)性疾病協(xié)會(huì)的“很可能AD”的診斷標(biāo)準(zhǔn);(2)簡(jiǎn)易智能狀態(tài)檢查量表(MMSE)評(píng)分＜24分;(3)Hachinski缺血指數(shù)量表評(píng)分＜4分;(4)根據(jù)臨床表現(xiàn),詳細(xì)的神經(jīng)、精神檢查,經(jīng)頭顱CT或MRI檢查和相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢查排除其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)以及其他系統(tǒng)和物質(zhì)原因等所致癡呆患者。據(jù)此標(biāo)準(zhǔn),納入AD患者30例,其中男16例,女14例,年齡 51～86歲,平均(67±12.1)歲。

本研究以無中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、無癡呆的非神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者作為正常對(duì)照組,據(jù)此選擇接受硬膜外麻醉的手術(shù)患者31例非神經(jīng)系統(tǒng)疾病病人,男 17例,女 14例,年齡50～83歲,平均(66±11.8)歲。所有研究對(duì)象均自愿加入本研究,并簽署了知情同意書。

1.2 材料與方法 對(duì)納入的研究對(duì)象行腰椎穿刺術(shù),分別抽取腦脊液(CSF)2 ml,標(biāo)記后置于-70℃冰箱中凍存?zhèn)溆谩Ｍ瑫r(shí)采用MMSE、CDR和Hachinski等評(píng)分量表對(duì)研究對(duì)象的神經(jīng)認(rèn)知及精神狀況進(jìn)行評(píng)定。CSF中tau蛋白和Aβ1-42的檢測(cè)采用雙抗夾心ELISA試劑盒(Innogenetics公司)測(cè)定CSF中 tau蛋白和Aβ1-42的水平。采用DG5032型酶標(biāo)儀(南京華東電子集團(tuán))檢測(cè)吸光度,操作的具體程序參考試劑盒說明書。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管濃度及吸光度建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并根據(jù)各孔的吸光度計(jì)算tau蛋白和Aβ1-42蛋白的濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。多組均數(shù)的比較采用單因素方差分析,均數(shù)的兩兩比較采用最小顯著差法(LSD),顯著性水準(zhǔn)取α=0.05。

2 結(jié)果

3組的CSF檢測(cè)結(jié)果見表1。與對(duì)照組比較,M CI和AD患者腦脊液Tau蛋白水平明顯升高,Aβ-42水平明顯下降(均 P＜0.01)

表1 3組腦脊液 Tau蛋白及Aβ1-42水平

3 討論

AD是一組原因未明的原發(fā)性腦變性疾病,常起病于老年或老年前期、多緩慢發(fā)病,逐漸進(jìn)展,以癡呆為主要表現(xiàn)。一般認(rèn)為,年齡每增加5年,患病率將增加1倍。隨著病情的逐漸加重,將會(huì)對(duì)患者的生活和學(xué)習(xí)等產(chǎn)生嚴(yán)重影響。而當(dāng)前對(duì)該疾病的診斷通常根據(jù)病史和病人所出現(xiàn)的癥狀,評(píng)估患者的神經(jīng)和精神狀況,在排除了其他可引起類似癥狀的疾病后方可作出診斷,具有諸多影響因素和診斷的不確定性。

AD的重要病理特征是老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié),老年斑的主要組織成分是Aβ,神經(jīng)元纖維纏結(jié)的主要原因是tau蛋白的過度磷酸化[3]。許多學(xué)者將Tau蛋白和Aβ的腦脊液水平異常作為AD診斷的分子標(biāo)志物。Dubois等認(rèn)為有記憶缺失等癥狀的MCI是AD發(fā)展的極早期階段,是介于正常和AD之間的一種認(rèn)知功能損害狀態(tài),而研究表明在AD的臨床前期腦內(nèi)已經(jīng)出現(xiàn)老年斑和神經(jīng)元纖維纏結(jié)發(fā)生[4],有學(xué)者通過檢測(cè)MCI患者腦內(nèi)Tau蛋白和Aβ水平,認(rèn)為Tau蛋白和Aβ1-42亦可作為MCI診斷的分子標(biāo)志物。檢測(cè)這些分子的水平可能有助于MCI的診斷。

胡元元等報(bào)道,AD組腦脊液Tau蛋白及其磷酸化水平均顯著高于血管性癡呆和非癡呆性神經(jīng)系統(tǒng)疾病及正常對(duì)照[5],本研究的正常對(duì)照組的結(jié)果與胡氏等研究結(jié)果較為接近,而在MCI組Tau蛋白水平較胡氏AD組低,雖然Mesulam等證實(shí),膽堿能神經(jīng)元從衰老到MCI最終發(fā)展為AD這一過程中,Tau蛋白在免疫病理學(xué)方面均存在相應(yīng)的變化[6],提示 Tau蛋白在MCI的進(jìn)展過程中發(fā)揮重要作用,但在MCI與AD組之間Tau蛋白水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

萬毅等[7]的研究報(bào)道表明,AD組的 Aβ1-42的水平明顯低于對(duì)照組。本研究所測(cè)得正常對(duì)照組結(jié)果與萬氏的正常組結(jié)果近似,而MCI組Aβ1-42的水平高于萬氏 AD組Aβ1-42的水平,雖然Kanai等證實(shí),隨著 AD的加重 Aβ1-42腦脊液濃度下降,認(rèn)為AD患者Aβ1-42腦脊液水平下降可能與神經(jīng)元死亡或Aβ1-42的清除障礙有關(guān)[8],說明 Aβ1-42的水平隨著疾病的進(jìn)展?jié)舛冉档?但未顯示 MCI與AD間Aβ1-42水平有顯著差異。

我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,腦脊液 Tau蛋白和Aβ1-42的水平在MCI階段已經(jīng)有明顯的變化,但與AD發(fā)展階段無統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián),Tau蛋白和Aβ1-42的水平不能作為區(qū)分MCI與AD的鑒別診斷指標(biāo),仍需結(jié)合臨床及其他檢測(cè)結(jié)果。

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