動脈外膜交感神經網剝脫切除術后肢體骨內壓、血液流變學、神經肽改變的實驗研究

吳珊鵬，林 欣

（1.福建醫科大學附屬泉州市第一醫院骨科，福建泉州 362000；2.首都醫科大學附屬北京天壇醫院骨科，北京 100050）

目前已知許多常見的骨科疾病均與骨內壓增高有關，如股骨頭壞死、骨性關節炎、跟痛癥等[1-4]，所以骨內壓作為骨科臨床和基礎研究日益引起人們的注意。骨內高壓臨床治療上較棘手，本課題從自主神經系統入手，探討交感神經對骨內血管舒縮活動的影響。以往有報道將頸總動脈周交感神經網剝脫切除后，腦部血管出現擴張[5]。交感神經對骨內血管是否也產生同樣的作用，這是本課題要研究的重點。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 選取新西蘭純種大白兔15只，雌雄不拘，體重（2.16±0.35） kg，右側膝關節“V”形聚乙烯夾板伸直位持續固定35d，制成固定側脛骨上端骨內高壓模型。

1.1.2 儀器與試劑 YH-4型生理壓力傳感器（北京航天醫學工程研究所），BL-420生物機能實驗系統（成都泰盟科技有限公司），R80血液流變儀和紅細胞變形與聚集儀（北京世帝科學儀器公司），r計數器（合肥眾成機電技術開發有限責任公司），放免分析試劑（北京晶美生物公司提供的試劑盒）。

1.2 實驗方法

1.2.1 脛骨上端骨內壓測量 將15只大白兔用3%戊巴比妥鈉（25 mg/kg體重）進行靜脈麻醉，在脛骨結節上方約0.5 cm內側平坦面將側壓針（內徑0.95 mm，外徑1.5 mm）刺入骨髓腔內，抽出針芯，滴入2 500 U/ml的肝素生理鹽水，將其連接到YH-4型生理壓力傳感器，再連接在BL-420生物機能實驗系統，進行測壓，每個部位觀測10～15 min，待骨內壓穩定后，記錄其壓力值及曲線。

1.2.2 股動脈外膜交感神經網剝脫切除術 15只大白兔采用3%戊巴比妥鈉靜脈麻醉，行右大腿上段股動脈外膜交感神經網剝脫切除術，術后再測量脛骨上端骨內壓值及曲線。

1.2.3 脛骨骨髓內血液流變學測量 術前及交感神經網剝脫切除術后第2天，15只兔3%戊巴比妥鈉靜脈麻醉后，分別抽取每只兔右脛骨上端骨髓內血約3 ml，在R80血液流變儀和紅細胞變形與聚集儀上測量血液流變學數值。

1.2.4 NPY和CGRP測檢 抽取15只兔手術前、后右脛骨上端骨髓內血2 ml，注入含10%EDTA二鈉30 μl和抑肽酶40 μl的試管中，混勻后離心（4℃，3 000 r/min，10 min），分離血漿，-70℃保存待測。檢測前，將樣品置于室溫或冷水中逐漸復融，再次離心（4℃，3 000 r/min，10 min），取上清液測定。采用放免分析法進行分析，用r計數器分別測定骨髓血中NPY和CGRP的含量。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 術后骨內壓結果

術后整體骨內壓值有下降趨勢（P<0.05），但有2只兔骨內壓值略增高（圖1）。

2.2 骨髓內血液流變學結果

術后脛骨上端骨髓內血漿黏度值、紅細胞剛性指數、全血黏度值、紅細胞變形指數、紅細胞剛性指數均較術前明顯下降，而紅細胞聚集指數出現明顯上升（表1）。

2.3 NPY和CGRP檢測結果

手術前、后 NPY 值由（17.23±9.58）ng/L 下降至（14.26±8.23） ng/L， 差異有統計學意義（P<0.01）；CGRP 由（28.86±9.76） ng/L 上升至（33.89±9.63） ng/L，差異有統計學意義（P<0.01）（表1）。

3 討論

筆者以往曾有報道本研究單項指標的結果及分析[6-8]。本文在此基礎上，側重對實驗組的幾項指標綜合進行分析，以期進一步了解幾項指標在交感神經與骨內壓關系研究中的意義。

正常情況下，NPY與CGRP在血漿中的濃度是維持在相對平衡狀態的，而NPY、CGRP活性物質對血管調節又是對立統一的，以保持血管的正常舒縮功能，保證組織血液供應。當CGRP釋放增加（或NPY釋放減少），將出現血管擴張，促使血液流變學改變，使血漿黏度下降，血小板凝聚性下降。本實驗結果顯示，交感神經切斷后，脛骨骨髓血CGRP含量顯著增加，NPY含量下降，全血黏度值及血漿黏度值均出現下降，血液出現稀釋傾向。骨內壓于術后也出現下降，說明交感神經切斷與血液黏度下降、血液稀釋及骨內壓下降呈正相關關系，從該角度說明了交感神經切斷有降低骨內壓作用。

表1 實驗組手術前、后血液流變學測量值和NPY、CGRP值比較（±s，n=15）Tab.1 Comparison ofdetected hemorrheological value and NPY,CGRP level before and after the operation in experimentgroup(±s,n=15)

表1 實驗組手術前、后血液流變學測量值和NPY、CGRP值比較（±s，n=15）Tab.1 Comparison ofdetected hemorrheological value and NPY,CGRP level before and after the operation in experimentgroup(±s,n=15)

P值NPY（ng/L）CGRP（ng/L）全血黏度值（mPa·s）切變率（200/s）切變率（300/s）切變率（5/s）切變率（1/s）血漿黏度值（mPa·s）全血高切還原度（BRVi-H）全血低切還原度（BRVi-L）紅細胞剛性指數（IR）紅細胞變形指數（TK）紅細胞聚集指數（EagI）指標名稱 術前 術后17.23±9.58 28.86±9.76 14.26±8.23 33.89±9.63<0.01<0.01 6.29±0.72 7.67±0.80 13.56±1.61 20.93±2.23 1.60±0.18 15.18±2.11 59.20±8.43 8.08±1.96 1.25±0.18 3.34±0.23 4.64±0.63 6.34±0.81 10.53±1.42 17.54±3.53 1.41±0.18 10.45±1.75 49.46±8.13 6.26±2.00 1.05±0.20 3.94±0.43<0.01<0.01<0.01<0.01<0.01<0.01<0.05<0.01<0.05<0.01

股動脈外膜交感神經網剝脫切除術是一種治療肢體骨內高壓新方法，以往報道較少，本課題從基本實驗指標做起，探索該方法的可行性。從實驗結果看，該方法有降低骨內壓作用，課題選擇手術前后骨內壓、血液流變學和神經肽三項指標，尚不能完全體現該方法對骨內壓的影響。因此，在此基礎上，筆者正計劃做更進一步的實驗檢測，如血流動力學、血管周圍分子因素及該方法是否對肢體產生副作用等指標。從多方面來驗證該方法的可行性，為今后過渡到臨床治療骨內高壓患者做好前期準備。

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[3]李宏宇,安洪.骨內高壓癥的治療[J].中國臨床康復,2006,10(48):148-150.

[5]田洪孝,張廣國,尹燕新,等.頸總動脈交感神經網剝脫術治療腦癱近期隨訪[J].中國矯形雜志,2006,14(13):1025-1026.

[6]吳珊鵬,孔抗美,王新家.股動脈外膜交感神經網剝脫切除對骨內壓超微結構的影響[J].中華實驗外科雜志,2004,21(8):986-987.

[7]吳珊鵬,孔抗美,王新家.股動脈外膜交感神經網剝脫切除對骨內高壓血液流變學的影響[J].中華實驗外科雜志,2004,21(9):1119-1120.

[8]吳珊鵬,孔抗美,齊偉力,等.股動脈外膜交感神經網剝脫切除對骨內高壓神經肽的影響[J].中華實驗外科雜志,2006,23(1):88-89.