重組人干擾素α－2b對復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者免疫功能的影響

楊衛(wèi)琴，羅利飛

(1.浙江省臺州市路橋區(qū)婦幼保健所，浙江 臺州 318050; 2.浙江省臺州醫(yī)院路橋院區(qū)檢驗科，浙江 臺州 318050)

生殖器皰疹是主要由單純皰疹病毒Ⅱ(HSV－Ⅱ)引起的一種性傳播疾病，極易復(fù)發(fā)。近年來，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹(recurrent genital herpes)的發(fā)病率逐年上升，能明顯增加艾滋病等其他性傳播疾病的感染機(jī)會，越來越受到重視。它可反復(fù)發(fā)作，難以治愈，主要與患者細(xì)胞免疫功能低下有關(guān)[1－2]。干擾素α－2b是一種基因重組干擾素，具有廣譜抗病毒作用及免疫調(diào)節(jié)功能，近年來研究發(fā)現(xiàn)其治療復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的效果確切[3]。筆者觀察了重組人干擾素α－2b治療復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的效果，并探討其對免疫功能的影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2009年1月至10月我院婦科和泌尿科的門診復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者60例作為治療組，診斷均符合2000年我國衛(wèi)生部疾病控制司和全國性病、麻風(fēng)病控制中心聯(lián)合頒布的《生殖器皰疹診斷標(biāo)準(zhǔn)》。其中男 21例，女 39例;年齡 19～46歲，平均(30.4±7.1)歲;病程 6 個月至 10 年，平均(2.8 ±0.7)年。所有患者均抽取皰液作PCR檢測，單純皰疹病毒均呈陽性，并排除自身免疫性疾病及其他系統(tǒng)性疾病，半年內(nèi)未接受任何免疫調(diào)節(jié)劑治療。另選擇相同年齡段、性別相仿的門診健康體檢者30例作為對照組。

1.2 治療與觀察方法

治療組患者予重組人干擾素α－2b 300萬U肌肉注射，隔日1次，共用30 d。分別于治療前和治療后3個月檢測患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、自然殺傷(NK)細(xì)胞、淋巴因子活化殺傷(LAK)細(xì)胞的變化，并進(jìn)行臨床療效觀察。對照組在行健康體檢時檢測上述指標(biāo)。采用流式細(xì)胞法檢測外周血T淋巴細(xì)胞(CD3+，CD4+，CD8+和CD4+/CD8+值)，具體步驟按說明書進(jìn)行操作。取淋巴細(xì)胞分離液，常規(guī)分離淋巴細(xì)胞，用RPMI 1640培養(yǎng)液洗滌3次，調(diào)整細(xì)胞密度為5×108/L～5×109/L，加入白細(xì)胞介素 －2(IL－2，調(diào)終濃度為500 mL/L)培養(yǎng)72 h，即可誘生出LAK細(xì)胞。參照王甫厚等[4]采用的方法，以K562細(xì)胞作為靶細(xì)胞，采用乳酸脫氫酶釋放法測定NK和LAK細(xì)胞的殺傷活性。觀察治療組治療前后3個月平均復(fù)發(fā)頻率和治療前后皮損平均愈合時間。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

數(shù)據(jù)以均值±標(biāo)準(zhǔn)差(X ±s)表示，使用 SPSS 11.5統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，計量資料采用 t檢驗，P＜0.05表示有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果見表1和表2。

表1 兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK和LAK細(xì)胞活性變化(±s，%)

表1 兩組外周血T淋巴細(xì)胞亞群及NK和LAK細(xì)胞活性變化(±s，%)

注:與對照組比較，＊P ＜0.01;與治療前比較，△P ＜0.05，▲P ＜0.01。

檢測指標(biāo)CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+NK LAK治療組(n=60)治療前45.54 ± 9.61＊38.59 ± 7.94＊37.62 ± 8.69＊1.03 ± 0.19＊1.74 ± 0.48＊1.02 ± 0.35＊治療后62.74 ± 11.54△46.51 ± 6.52△28.46 ± 5.82△1.63 ± 0.32▲2.76 ± 0.74△2.36 ± 0.68△對照組(n=30)74.35 ± 14.69 48.26 ± 9.97 25.34 ± 7.56 1.89 ± 0.41 3.27 ± 0.91 2.81 ± 0.82

表2 治療組治療前后每3月復(fù)發(fā)頻率和皮損愈合時間均值(±s)

表2 治療組治療前后每3月復(fù)發(fā)頻率和皮損愈合時間均值(±s)

注:與治療前比較，＊P ＜0.01。

治療前后治療前(n=60)治療后3個月(n=60)皮損愈合時間(d)7.04 ± 1.82 4.94 ± 1.08＊每3月復(fù)發(fā)頻率(次)3.84 ±1.37 1.76 ±0.64＊

3 討論

初次感染HSV－Ⅱ后，只有少數(shù)患者出現(xiàn)典型癥狀，而大多數(shù)患者無明顯癥狀，呈亞臨床狀態(tài)(潛伏感染狀態(tài))，HSV－Ⅱ可持續(xù)潛伏于骶神經(jīng)節(jié)。當(dāng)過度勞累、免疫系統(tǒng)疾病、全身應(yīng)用免疫抑制劑等因素使機(jī)體免疫力降低時，潛伏病毒可被激活而發(fā)病。可見，機(jī)體免疫功能正常是維持潛伏感染的關(guān)鍵，免疫功能低下是引起潛伏病毒被激活的主要原因。免疫學(xué)研究證實，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者存在明顯的細(xì)胞免疫功能受抑制現(xiàn)象，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的感染和復(fù)發(fā)與細(xì)胞免疫功能有關(guān)[1]。本研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者外周血CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞明顯減少，CD8+細(xì)胞明顯增加，CD4+/CD8+值明顯下降，可見復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者確實存在細(xì)胞免疫功能紊亂，這與馬黎民等[5]的報道相一致。筆者認(rèn)為，CD4+細(xì)胞數(shù)明顯下降，則明顯減弱了其介導(dǎo)的對單純皰疹病毒抗原的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng);另一方面，CD8+細(xì)胞數(shù)明顯升高，表現(xiàn)出機(jī)體的免疫抑制功能增強，造成單純皰疹病毒的繁殖和擴(kuò)散。因此，CD4+細(xì)胞數(shù)下降、CD8+細(xì)胞數(shù)升高是本病反復(fù)發(fā)作的重要原因。NK細(xì)胞是機(jī)體中重要的免疫細(xì)胞，可直接殺傷被病毒感染的細(xì)胞;并可分泌IL－2和干擾素－γ等，發(fā)揮其免疫增強作用[6]。LAK細(xì)胞來源于NK細(xì)胞，其殺傷活性遠(yuǎn)高于NK細(xì)胞。馬黎民等[5]研究發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者細(xì)胞免疫功能缺陷以及NK細(xì)胞數(shù)目的下降可能是導(dǎo)致生殖器皰疹患者復(fù)發(fā)的原因。田中偉等[7]報道，生殖器皰疹患者的細(xì)胞免疫功能明顯降低，外周血NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的活性降低。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者外周血NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞的活性降低，與上述報道相符[5，7]。

干擾素能增強免疫功能，作用機(jī)制在于調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫監(jiān)視、防御和穩(wěn)定功能，使NK細(xì)胞、細(xì)胞毒性細(xì)胞的細(xì)胞毒殺傷作用增強，吞噬細(xì)胞的活動增強，能誘導(dǎo)外周血中單核細(xì)胞的2，5－寡核苷酸合成酶活性，從而增加或誘導(dǎo)細(xì)胞表面主要組織相容復(fù)合物抗原的表達(dá)。因此，理論上干擾素對防止?jié)摲《镜脑俅螐?fù)制和提高機(jī)體抵抗力有一定的作用。近年來研究證實，干擾素α在體外細(xì)胞培養(yǎng)中具有抑制HSV－Ⅰ型和HSV－Ⅱ型的作用[8]。肖光明等[9]發(fā)現(xiàn)，干擾素－α能使慢性乙型肝炎患者血漿CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+值顯著提高，增加細(xì)胞免疫功能。楊根明等[3]發(fā)現(xiàn)，重組人干擾素α－2b治療復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的臨床療效確切，能明顯降低復(fù)發(fā)率。本研究結(jié)果也證實了這一點，重組人干擾素α－2b治療復(fù)發(fā)性生殖器皰疹的作用機(jī)制可能是通過提高外周血CD3+細(xì)胞、CD4+細(xì)胞、CD4+/CD8+值，提高血NK細(xì)胞和LAK細(xì)胞活性，從而增強機(jī)體的免疫功能。

[1]Posavad CM，Wald A，Hosken N，et al.T cell immunity to herpes simplex viruses in seronegative subjects:silent infection or acquired immunity[J].J lmmunol，2003，170(8):4 380 － 4 388.

[2]畢 超，曹文苓，黃 平，等.生殖器皰疹初發(fā)患者外周血淋巴細(xì)胞檢測結(jié)果分析[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志，2008，20(1):69－70.

[3]楊根明.重組人干擾素α－2b治療生殖器皰疹的療效觀察[J].山西醫(yī)藥雜志，2004，33(10):890 －891.

[4]王甫厚，陳紹先，郭彩云，等.LDH釋放法測定NK細(xì)胞毒的方法研究[J].中國免疫學(xué)雜志，1996，6(2):115 －117.

[5]馬黎民，李 亞，孫 麗，等.復(fù)發(fā)性生殖器皰疹患者外周血T細(xì)胞亞群和NK細(xì)胞檢測分析[J].嶺南皮膚性病志，2005，12(3):213－214.

[6]Giron － Gonzalez JA，Moral FJ，Elvira J，et al.Consistent production of a higher Th1:Th2cytokine ratio by stimulate T cells in men compared with women[J].Eur J Endocrinol，2000，143:31.

[7]田中偉，宋向鳳，彭振輝.生殖器皰疹患者治療前后血清IL－2/IFN－γ水平及NK/LAK細(xì)胞活性的變化[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2004，20(2):217.

[8]徐 冰，王淑琴，李玉環(huán)，等.重組集成干擾素а體外抗單純皰疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型的藥效學(xué)研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2006，6(4):397－399.

[9]肖光明，何凱茵，連粵湘，等.α干擾素治療慢性乙型肝炎早期外周血T淋巴細(xì)胞亞群和血清肝纖維化指標(biāo)的變化[J].實用肝臟病雜志，2005，8(2):80 － 82.