4-叔丁基環(huán)己醇:敏感肌膚的“舒緩調(diào)節(jié)器”

　　摘要：
　　敏感性肌膚作為令人困擾的皮膚問題已經(jīng)成為影響生活質(zhì)量的關(guān)鍵因素之一。敏感肌膚通常伴隨末梢神經(jīng)感受器的過度反應(yīng)，尤其是由于TRPV1過度活躍所導(dǎo)致的灼燒、刺痛的等不良感覺。之前的研究顯示，末梢神經(jīng)感受器的TRPV1受體對(duì)于辣椒素的敏感性與自述的敏感肌膚現(xiàn)象具有明確的相關(guān)性。通過篩選我們確認(rèn)4-叔丁基環(huán)己烷作為特定的TRPV1拮抗劑，并經(jīng)人體測試證明可有效阻斷由辣椒素引起的灼燒感或刺痛感，從而有效舒緩肌膚不適感。
　　體外測試In vitro：HEK293細(xì)胞能夠穩(wěn)定地表達(dá)重組人類TRPV1受體，可用來篩選潛在的TRPV1拮抗劑。由于辣椒素能激活TRPV1，誘導(dǎo)FLEX系統(tǒng)中鈣離子濃度的變化(鈣離子的連續(xù)變化)，并對(duì)鈣離子濃度的變化進(jìn)行測定。體內(nèi)測試In vivo：30位志愿者對(duì)辣椒素的敏感性進(jìn)行研究測試，使用兩種不同的軟膏涂于面部，一種含有辣椒素，另一種含有辣椒素和0.4％的4-叔丁基環(huán)己烷。在隨后的3分鐘評(píng)價(jià)其刺痛感和灼燒感，按以下幾個(gè)等級(jí)評(píng)分：0(沒有感覺)——4(強(qiáng)烈的感覺)；使用Wilcoxon平行對(duì)照方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　4-叔丁基環(huán)己烷可以抑制由于辣椒素誘導(dǎo)的通過TRPV1的鈣離子流量，在人體測試中，其IC50為34μM。刺痛的感覺評(píng)分顯著降低，由1.6降至0.6(p＜0.001)，灼燒感的感覺評(píng)分也明顯降低，從2.8降至0.8(p＜0.0001)。基于這些結(jié)果，我們確認(rèn)4-叔丁基環(huán)己烷是有效的TRPV1拮抗劑，無論體外實(shí)驗(yàn)還是活體實(shí)驗(yàn)都得到了很好的證明。此外，該活性物能有效舒緩敏感肌膚，從而抑制刺痛感和灼燒感。
　　關(guān)鍵詞：TRPVI受體　TRPV1拮抗劑　辣椒素誘導(dǎo)的抑制　敏感肌膚
　　
　　介紹
　　
　　敏感肌膚作為常見的困擾肌膚狀態(tài)普遍存在，且很大程度上影響了生活的質(zhì)量。超過50％的消費(fèi)者自述為敏感性肌膚。據(jù)報(bào)道，敏感性肌膚在消費(fèi)者所占比例，在歐洲和美國人群中占50％，在日本和中國人群中占36％。
　　敏感性肌膚的臨床表現(xiàn)通常伴隨著灼燒、刺痛和瘙癢的面部不適感。由于外界的因素引起了肌膚的敏感，如氣流或快速變化的溫度，抑或使用了化學(xué)或天然的混合物。敏感肌膚是一種神經(jīng)現(xiàn)象，與超敏性或特異性皮炎無關(guān)。試驗(yàn)結(jié)果提示，敏感肌膚與表皮敏感神經(jīng)的生理機(jī)制有關(guān)，臨床測試研究中，敏感肌膚的受試者使用了辣椒素這一對(duì)皮膚具有高反應(yīng)性的原料。
　　辣椒素是瞬時(shí)感受器電位離子通道香蘭素亞家族(TRPV1，辣椒素受體，VR1)的天然拮抗劑。TRPV1用于表達(dá)中樞和末梢神經(jīng)。不同類型的刺激物對(duì)受體進(jìn)行激活，如低pH值(＜5.9)，損害性高溫(＞42℃)，大麻／內(nèi)源性大麻素，白三烯B4和外源性辣椒素。
　　因此，如：使用辣椒素后，TRPV1被激活，引起灼痛感或灼燒感。此外，TRPV1受體會(huì)被緩激肽和前列腺素、以及神經(jīng)生長因子所激活，并降低響應(yīng)閾值，使疼痛及癢感更易發(fā)生。由于TRPV1的感覺功能(灼燒感，瘙癢癥)，可以推測TRPV1與敏感肌膚相關(guān)。
　　TRPV1在很多非神經(jīng)細(xì)胞上表達(dá)，其中包括角化細(xì)胞，分化的皮脂細(xì)胞，毛囊細(xì)胞，汗腺導(dǎo)管，肥大細(xì)胞，3T3-L1-前脂肪細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，辣椒素或高溫激活在角化細(xì)胞中的TRPV1，促進(jìn)炎癥因子前列腺素PGE2和白介素IL-8的釋放，并誘導(dǎo)釋放MMP-1。此外，辣椒素可作為毛發(fā)生長的抑制劑。最近，有研究報(bào)道在溫度34℃或42℃時(shí)，屏障修復(fù)的時(shí)間會(huì)顯著延緩。辣椒素也會(huì)延遲屏障修復(fù)，而TRPV1拮抗劑阻斷了這種延遲。因此提示TRPV1也參與了表皮屏障的動(dòng)態(tài)平衡。
　　由于TRPV1廣泛分布在皮膚細(xì)胞中，且與刺痛感、皮膚炎癥、皮膚老化、甚至頭發(fā)的生長調(diào)節(jié)等功能具有相關(guān)性，使得TRPV1在美容行業(yè)成為被高度關(guān)注的焦點(diǎn)。因此，我們專門開發(fā)了TRPV1拮抗劑引入化妝品領(lǐng)域。
　　
　　實(shí)驗(yàn)：原料和方法
　　
　　In vitro體外測試：利用可以穩(wěn)定表達(dá)人體TRPV1的HEK293細(xì)胞系，進(jìn)行篩選測試。測試有效范圍在0.5-50μM的潛在的拮抗劑。被測試的化合物不但平行加入30nM的辣椒素，且在加入辣椒素之前10分鐘加入。以藥理TRPV1拮抗劑釕紅(1μM)作為陽性對(duì)照。通過對(duì)TRPV1活化誘導(dǎo)的鈣流量使用鈣敏感熒光染料fluo-4(494/516nm(ex/em))進(jìn)行測定。
　　
　　結(jié)果和討論
　　
　　通過