【關鍵詞】真菌;氫氧化鉀
【中圖分類號】R969.4【文獻標識碼】A
【文章編號】1007-8517(2010)16-109-1
真菌的檢驗方法較多,但直接涂片鏡檢方法簡便,可快速為臨床提供診斷依據。直接涂片鏡檢的浮載液有多種[1],其中KOH液最常用。但由于皮屑等標本溶解不徹底,容易出現假陰性而誤診。我們在臨床上將KOH液進行了改良,現將改良浮載液和推薦的浮載液進行比較,結果報告如下。
1材料與方法
1.1臨床資料368例均為2008年3月之2009年2月在我科門診就診患者,臨床表現為皮膚紅斑、丘疹、水皰、鱗屑或指趾甲損害,可疑有真菌感染的患者。男性198例、女性170例。年齡5-63歲,平均年齡35歲。病程為28天-15年不等。
1.2標本采集標本為患處皮屑、痂皮、水皰液、病發、甲屑等,取材前要求患者近一周內未采用任何內外用抗真菌藥物。
1.3試劑將鏡檢液分為A液和B液兩組。A液為178mol/L KOH液。B液為改良液,制備方法為KOH10g加入DMSO(二甲基亞砜)40ml、甘油10ml加蒸餾水混合搖勻配成100ml溶液備用。
1.4方法將采集的標本均勻等量分為兩份,置于兩載玻片上,分別加入A與B液各1-2滴,蓋上蓋玻片,吸凈周邊溢液。加入A液的玻片在酒精燈上微加熱后在顯微鏡下鏡檢。B液的玻片直接鏡檢。
2結果
2.1結果判定鏡下若發現分支分隔的折光菌絲或孢子即報告陽性結果。
2.2實驗結果在296例患者皮損中,用A液檢出真菌134例,B液檢出真菌164例。兩組鏡檢結果比較:X2=5.5135,0.01<0.05,兩組檢出率比較。B液檢出率優于A液。
3討論
真菌鏡檢常用178mol/L KOH液作為鏡檢浮載液,但其缺點是角質溶解慢,常需要加熱,在使用酒精燈加熱時操作不當容易使標本出現氣泡,甚至烤焦標本,造成實驗結果出現偏差。而改良液加入的DMSO(二甲基亞砜)又稱“萬能溶液”,是一種無色透明液體,有較強的穿透力,能與水或有機溶劑任意混合。與水混合時能產生熱[2],在KOH液中加入DMSO能使角質溶解更完全,更快,且無需加熱,簡化程序。加入甘油,能增加標本的透明度,并且保存時間長,更有利于教學。
參考文獻
[1] 吳紹熙,廖萬清.臨床真菌學彩色圖譜[M].廣州:廣東科技出版社,1999:268-269.
[2] 于秀路,杜步云,李季明,等.新編外用藥物手冊[M].濟南:山東科技出版社,1996.286.