摘要:根據各藥劑的藥效范圍和理化特性選擇了11種單劑及其部分復配劑進行了室內藥劑篩選試驗。結果表明:72%農用硫酸鏈霉素及氧氯化銅:消菌靈=1:1對煙草青枯病的抑菌效果較好,且藥效穩定。
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中圖分類號:S435.72 文獻標識號:A 文章編號:1001—4942(2010)0g—0076—03
煙草青枯病[Pseudomonas solarlacearul'n(E.F Smith)Dowson],于1880年在美國首次報道,現已成為世界各產煙區最主要的病害之一,是威脅世界煙草生產的一大毀滅性病害。在中國,此病在河南、山東、江蘇、云南、廣西、河北、湖南、廣東、福建等地普遍發生。近年來,煙草青枯病在山東有逐年加重的趨勢,且常與黑脛病并發,使危害更加嚴重。本試驗選擇了11種單劑及其部分復配制劑進行室內篩選,以確定各種藥劑的抑菌效果,為煙草青枯病的綜合防治提供依據。
1 材料與方法
1.1供試病菌
煙草青枯病病原菌:采自山東省主產煙區,并由本實驗室分離保存。
1.2供試藥劑 72%農用硫酸鏈霉素可溶性粉劑(華北制藥集團制劑有限公司)、90%新植霉素可溶性粉劑(四川省廣漢農豐化工廠)、77%可殺得2000可濕性粉劑(美國國信公司)、10%細菌殺可溶性粉劑(石家莊曙光制藥廠)、50%氧氯化銅可濕性粉劑(上海華亭化工廠有限公司)、25%多菌靈可濕性粉劑(四川國光農化有限公司)、3%克菌康可溶性粉劑(廈門凱利生物制品有限公司)、50%消菌靈水溶性粉劑(南京農業大學試驗農藥廠常州分廠)、60%百菌通可濕性粉劑(齊齊哈爾市億達高科技化工研究所)、30%DT可濕性粉劑(齊齊哈爾市化工研究所)、40%菌核凈可濕性粉劑(浙江省溫州市鹿城植?;瘜W廠)。
1.3試驗方法
l. 3.1不同單劑對煙草青枯病菌的抑制效果活化病原菌,用無菌水配成濃度約為3×108cfu/ml的細菌懸浮液。將滅菌的100 ml NA培養基加熱溶化完全,冷卻至45~C左右,迅速吸取10ml細菌懸浮液注入培養基內,充分混勻后迅速倒入培養皿,制成平板,待凝固后備用。
將各藥劑配置成100倍的母液,再分別用無菌水稀釋到200、400倍,將蘸有各種藥劑的直徑為6 mm的無菌濾紙圓片平放于制好的平面培養基中央,重復3次,蘸有無菌水的無菌濾紙片作為對照。將培養皿置于生化培養箱內(27±1)℃培養,分別于24、48 h檢查抑菌效果,并用十字交叉法測量抑菌圈直徑并觀察透明度。
1.3.2復配藥劑對煙草青枯病痛原菌的抑制效果篩選抑菌效果好的單劑經優化組合進行復配,濃度比為1:l,用無菌水稀釋到400倍,進行抑菌效果測定,方法同1.3.1。
藥劑抑菌效果的穩定性可以用抑菌圈直徑縮小率來表示:
抑菌圈縮小率(%):(第一次測量直徑一第二次測量直徑)/第一次測量直徑×100
2 結果與分析
2.1不同單劑對煙草青枯病菌的抑制效果
試驗結果(表1)表明:供試藥劑大多數對青枯病菌有抑制作用,不同藥劑之間的抑菌作用有較明顯差異,根據24、48 h抑菌效果的測定,其中農用硫酸鏈霉素效果最好且穩定,且隨著稀釋倍數的增大,抑菌效果變化不大,其中24 h時100倍液抑菌圈直徑為27.5 mn'l,透明度高,400倍液抑菌圈直徑為26.O mm。新植霉素、氧氯化銅、可殺得效果次之,24 h抑菌圈直徑在12.1—16.7mm之間,多菌靈、克菌康、消菌靈、百菌通、DT抑菌效果差,24 h抑菌圈直徑在6.5—10.1mm之間;細菌殺和DT在低濃度下無抑菌效果;菌核凈無抑菌效果。

2.2復配藥劑對煙草青枯病菌的抑制效果
選擇了抑菌效果及抑菌圈透明程度中等以上的單劑復配進行抑菌效果的測定,結果(表2)表明,復配劑Ⅻ對煙草青枯病病原菌抑制效果最好,400倍液24 h抑菌圈直徑達16.5 mm,且透明度高,變化率低,抑菌圈縮小率為1.2%,穩定性好。復配劑I、Ⅳ、Ⅶ、Ⅱ抑制效果次之,24 h抑菌圈直徑在12.8一14.8/11/11之間,且透明度高。藥劑X、Ⅲ、Ⅵ、Ⅷ、V、Ⅺ、Ⅸ抑菌效果依次降低,24 h抑菌圈直徑在8.8一12.4 ml之間,抑菌圈縮小率大,抑菌效果差。

3 結論與討論
通過對各種藥劑藥效范圍和作用特點的分析,選擇了11種單劑進行室內抑菌試驗。結果表明:72%農用硫酸鏈霉素、50%氧氯化銅、90%新植霉素、77%可殺得、50%消菌靈、3%克菌康、25%多菌靈對煙草青枯病菌均有抑制效果,但差別明顯,隨著稀釋倍數增大,抑菌效果降低,且穩定性較差。其中72%農用硫酸鏈霉素穩定性高,1(90倍液抑菌圈直徑為27.5 mla'l,400倍液抑菌圈直徑為26.0 mm,隨稀釋倍數的增大,抑菌效果變化不大。
為了選擇更有效的藥劑,對抑菌效果較好的單劑進行了復配,挑選抑菌效果較好的復配劑進行400倍液的藥效試驗。結果表明:復配劑Ⅻ、I、Ⅳ、Ⅶ、Ⅱ抑制效果較好,其中藥劑Ⅻ400倍液抑菌圈直徑為16.5 mm,透明度高,穩定性好,抑菌圈縮小率為1.2%。
室內毒力測定抑菌圈直徑大的和抑菌圈直徑變化小的,其田間藥效較好。抑菌圈直徑雖然大,但隨著時間的變化縮小得較快,田間藥效則不理想。單獨考察農藥的抑菌圈是不全面的,綜合考慮抑菌圈和抑菌圈的變化情況可以反映出田間藥效的好壞。
綜合考慮各種藥劑抑菌圈直徑的大小、透明度和抑菌圈直徑變化??梢钥闯觯?2%農用硫酸鏈霉素的效果最為理想,抑菌圈直徑最大,透明度高,穩定性好。復配藥劑Ⅻ次之,抑菌圈縮小率低,較為穩定。
關于針對細菌的抑菌活性生物測定試驗報道很多,但目前還沒有一個能夠精確測定細菌抑菌效果的標準生物測定方法,通過一般的測定方法只能夠得到抑菌圈大小和藥劑計量的線性關系。鑒于以上原因,關于復配劑的效果是否與單劑相比具有拮抗、加和或增效作用就很難衡量,更不可能用精確的數據來表達。同時由于本試驗結果是通過室內毒力測定得出,各藥劑的防治效果還需要通過盆栽試驗和田間試驗進一步驗證。