草履蟲的采集\\培養(yǎng)與觀察

初中生物教材在介紹單細(xì)胞生物時，常常以草履蟲作為代表動物進(jìn)行描述。因此，對于生物教師和生物愛好者而言，學(xué)習(xí)和掌握一些采集、培養(yǎng)與觀察草履蟲的方法是非常必要的。同時，用自己培養(yǎng)的草履蟲來觀察它們的形態(tài)結(jié)構(gòu)也是一件有趣的實驗。

一、草履蟲的采集

采集的方法有兩種。一是在水溝、池塘采集。選擇污染較輕的水溝、池塘岸邊，枯枝落葉多的地方，沿水面用廣口瓶采集水。采集后，在瓶內(nèi)放入一些水草，不要蓋瓶蓋，以免草履蟲缺氧死亡。二是去稻田采集。在灌水的稻田的舊稻茬附近，用廣口瓶采集水。采集后，在瓶內(nèi)放入幾段舊稻草，不要蓋瓶蓋。

取當(dāng)年新鮮的稻草，將根部的幾節(jié)剪成3cm長的小段，放入廣口瓶內(nèi)。然后注入潔凈的清水，并用玻璃蓋將口蓋上，防止灰塵進(jìn)入。注意稻草約占水量的1/10~1/4，水占容器的3/4~4/5為宜。一次最好培養(yǎng)3~5瓶母液，而各瓶用的稻草應(yīng)分別選自不同的稻田。將稻草水培液置于20℃~27℃的光亮的地方，一般培養(yǎng)5~10天，便可使稻草上的草履蟲包囊發(fā)育成草履蟲。此時，若在強光下觀察，便可在培養(yǎng)液表面水層看到許多小白點在迅速移動，這就是我們所需要的草履蟲。

無論是采集的草履蟲還是室內(nèi)培養(yǎng)的草履蟲，都要經(jīng)過鏡檢，檢查其濃度與純度。鏡檢時，用吸管吸取一滴培養(yǎng)液表面有小白點的水，滴在已擦干凈的載玻片的中央，蓋上載玻片，用顯微鏡觀察。在顯微鏡下可能會看到許多種微小的動植物，如果見到形如倒置的草鞋并在不停地游動的小動物，那就是草履蟲。不過，采集的草履蟲在鏡檢之前，需要先將采集的水樣帶回實驗室，放在溫暖明亮的地方使其繁殖。3~5天后，用肉眼對著光線看瓶內(nèi)有無小白點在移動，若有，再進(jìn)行鏡檢。

二、草履蟲的提純培養(yǎng)

1.稻草水培養(yǎng)法(經(jīng)典培養(yǎng)法)

取干凈新鮮的稻草100g，剪去頂端和靠根部的幾節(jié)，將中段剪成2~3cm的小段，按1∶100的比例加入清水于大燒杯中，加熱煮沸10~15分鐘左右，以殺死稻草上的其他生物。用雙層紗布將燒杯口封嚴(yán)后置于溫暖明亮處進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。經(jīng)3~5天，稻草液中枯草桿菌的芽孢開始萌發(fā)、繁殖，液體逐漸混濁。當(dāng)液面出現(xiàn)一層灰白色的薄膜時，采用PH試紙測試液體的酸堿性，并調(diào)到弱堿性(PH≤7.5，草履蟲喜歡弱堿環(huán)境)，稻草培養(yǎng)液便配制好了。

接種時，要嚴(yán)防其他原生動物進(jìn)入而使純度降低。先將少量含有草履蟲的水液用吸管吸置于表面皿中，然后把表面皿放在放大鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)草履蟲后，用口徑0.2mm的干凈微吸管將草履蟲吸出，接種到盛有培養(yǎng)液的廣口瓶中。如果表面皿中的水液太多，可用吸水紙吸出一部分水液，便于操作。

把接種有草履蟲的廣口瓶的瓶口用紗布封嚴(yán)，放到溫暖明亮的地方，大約7~10天后便有大量的草履蟲繁殖出來。

如果需要長期培養(yǎng)草履蟲，需要及時更補營養(yǎng)液。因為大量的蟲體在消耗營養(yǎng)的同時又不斷排出代謝廢物，如不及時更補營養(yǎng)液，草履蟲的數(shù)量會因生存環(huán)境的惡化迅速減少，甚至死亡。需要每隔3~4天，用吸管從廣口瓶的底部吸取沉淀物和一半左右的營養(yǎng)液，并加入等量的新鮮培養(yǎng)液，可使草履蟲長期保存。

2.牛奶液培養(yǎng)法

在潔凈的廣口瓶內(nèi)注入適量的涼開水，然后將煮過牛奶而未刷洗的奶鍋內(nèi)注入少量開水使牛奶稀釋。用潔凈的吸管吸取稀釋牛奶水一兩點于廣口瓶中。此時，廣口瓶中的水進(jìn)一步將牛奶水稀釋，水成淡乳白色。經(jīng)1~2天，廣口瓶中的牛奶逐漸變清，水表面形成一層薄薄的菌膜。取幾滴草履蟲母液滴入牛奶培養(yǎng)液中，置溫暖處，2~3天后，便會有大量草履蟲繁殖出來。此時，如果輕輕振動廣口瓶，便會看到培養(yǎng)液水表面有許多小白點向水中下層移動。這說明已有大量草履蟲繁殖生長。一般情況下，每隔3~7天加一次稀釋的牛奶水，以滿足細(xì)菌的生長，從而使草履蟲得到食物。加牛奶時，草履蟲培養(yǎng)液變混濁。大致經(jīng)過2天左右，培養(yǎng)液變清，細(xì)菌大量繁殖，草履蟲密度加大。

注意:牛奶培養(yǎng)液用水必須是涼開水，切不可直接用涼水。加入牛奶后，如果3~4天水不清，說明有大量的蛋白蟲出現(xiàn)，已不適于培養(yǎng)草履蟲了。

3.玉米根浸培養(yǎng)法

取一支潔凈的試管，注入清水，將一粒萌發(fā)的玉米種子浸入其中，使其發(fā)芽長根。一般來說，一支試管內(nèi)有一株帶根的玉米幼苗為宜。

將帶有玉米幼苗的試管放到溫暖向陽處，然后從草履蟲母液中取幾滴液體滴進(jìn)玉米幼根培養(yǎng)液中。玉米生長過程中，根部有許多細(xì)菌在生活著，這些細(xì)菌便是草履蟲極好的食物。一般情況下，約經(jīng)5~7天左右，便會看到，在玉米根周圍的水中有許多小白點出現(xiàn)。

三、草履蟲的觀察

觀察草履蟲的方法比較簡單，一般按課本上的要求去做就可以了，即從草履蟲培養(yǎng)液的上層用吸管吸取一滴培養(yǎng)液，滴在載玻片的中央。為限制草履蟲的活動，便于觀察，在載玻片上鋪上少許棉纖維。

在觀察實驗中，學(xué)生可能會發(fā)現(xiàn)形態(tài)結(jié)構(gòu)不同的草履蟲，這時，教師應(yīng)向?qū)W生補充一些草履蟲的分類知識。我國常見的草履蟲有四種:A.大草履蟲(尾草履蟲)，長180~280μm，后端呈圓錐形，有2個伸縮泡均有收集管，一個小核，橢圓形。B.多小核草履蟲，長180~310μm，形狀同前，但有3~12個泡狀小核。C.雙小核草履蟲，長80~170μm，后部比前部更寬，2個伸縮泡，收集管較短，2個小核。D.綠草履蟲，長80~150μm，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有綠藻與其共生，見光生活時，身體呈綠色，1個小核。前3種草履蟲生活在有機質(zhì)豐富的死水或緩流中，而后者生活在清水池塘中。