甘藍(lán)型油菜BnCOP1基因的原核表達(dá)和純化

摘要：COP1蛋白是植物光信號(hào)調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中介導(dǎo)光信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的一個(gè)關(guān)鍵因子，對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育起重要調(diào)控作用，通過(guò)RT-PCR方法從甘藍(lán)型油萊中克隆BnCOP1基因編碼區(qū)全長(zhǎng)序列，并將其連接到冷誘導(dǎo)原核表達(dá)裁體pCold TF上，構(gòu)建原核重組表達(dá)裁體pCold TF/BnCOP1，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL(21)star通過(guò)IPTG法低溫誘導(dǎo)表達(dá)融合蛋白，結(jié)果表明，重組質(zhì)粒在大腸桿菌中獲得高效表達(dá)，融合蛋白分子質(zhì)量約為128 kD，融合蛋白在上清液和包涵體中均有表達(dá)，可溶性部分經(jīng)親和層析純化和Western blotting檢測(cè)證實(shí)獲得了高純度的重組蛋白，這些結(jié)果為進(jìn)一步研究油菜BnCOP1的結(jié)構(gòu)和功能奠定了基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞：BnCOP1基因；pCold TF；原核表達(dá)；融合蛋白；蛋白純化

中圖分類號(hào)：0786 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1007-7847(2011)03-0203-06