周 瓊,付志紅,柳英霞,翟 旋,胡著云
(1.江西中醫(yī)學(xué)院,江西 南 昌 330004;2.南昌大學(xué)分析測試中心,江西 南 昌 330047)
《胎產(chǎn)心法》曰:“胎之所養(yǎng),賴母之所嗜,因子母之氣呼吸相通,是以胎氣肥瘦,在母之素日奉養(yǎng)厚薄如。”妊娠是一個(gè)生理過程。從一個(gè)受精胚細(xì)胞成為一個(gè)健康新生兒,它必須也只能完全依靠從母體獲取營養(yǎng)來完成宮內(nèi)孕育這一過程。營養(yǎng)物質(zhì)的缺乏對妊娠結(jié)局及胎兒發(fā)育可產(chǎn)生不良影響[1]。
中藥無論是單方還是復(fù)方都含有很多化學(xué)成分,除各種有機(jī)成分外,幾乎每一種中藥都含有數(shù)十種微量元素,它是中藥歸經(jīng)和藥性物質(zhì)基礎(chǔ)的重要組成部分。胎元飲一方出自《景岳全書》,為婦科安胎常用名方,臨床上具有補(bǔ)氣養(yǎng)血、固腎安胎之功,能有效防治先兆流產(chǎn)[2]。本實(shí)驗(yàn)采用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜儀快速測定胎元飲中多種微量元素,為從營養(yǎng)學(xué)角度探討胎元飲養(yǎng)胎安胎的物質(zhì)基礎(chǔ)提供理依據(jù)。
Optima-5300DV型等離子體發(fā)射光譜儀(美國PE公司),波長范圍:165~872nm,分段式電感耦合檢測器SCD,寶石噴嘴十字交叉霧化器與Scott霧室,儀器工作參數(shù)如表1所示;ETHOS E微波消解儀(意大利Mile stone公司);Milli-QS超純水器(美國Millipore公司)。

表1 儀器工作參數(shù)Table 1 The operating parameter of instrument
多元素混合標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.0mg·mL-1)由美國SPEX公司提供,HNO3、H2O2均為優(yōu)級純,實(shí)驗(yàn)用水為Millpore-Q裝置處理過的超純水(18.2KΩ·cm)。玻璃儀器均經(jīng)10%的HNO3浸泡過夜,用超純水清洗。
黨參、當(dāng)歸、杜仲、白芍、熟地、甘草、陳皮、白術(shù)均由江西中醫(yī)學(xué)院提供,于80℃烘干(約5h)、粉碎,過40目篩,置于干燥器中備用。烘箱內(nèi)烘干,待冷卻后粉碎過60目篩備用。
1.3.1 供試樣品的制備 首先按經(jīng)典配方比例(4∶4∶4∶4∶4∶2∶2∶1)準(zhǔn)確稱取黨參2.0g、當(dāng)歸2.0g、杜仲2.0g、白芍2.0g、熟地2.0g、甘草1.0g、陳皮1.0g、白術(shù)0.5g共12.5g置于燒杯中混勻,加水125mL浸泡30min后再煎煮40min,煎煮過程保持微沸狀態(tài),然后將煎煮液離心,上層清液轉(zhuǎn)入燒杯中,離心液濃縮制得煎煮液浸膏。
1.3.2 HNO3-HClO4消解 將上述供試樣品分別加入一定量的混酸30 mL(HClO4∶HNO3=1∶5),先在電熱板上小火加熱消化約30min,待黃煙冒盡后,升高溫度加熱至大量白煙冒盡并有白色固體析出。冷卻后加2%HNO3溶解,均定容于50mL的容量瓶中,同時(shí)平行做一份空白試液,在選定的工作條件下對樣品進(jìn)行測定。
表2顯示,ICP-AES法對每個(gè)元素的測定都可以同時(shí)選擇多條特征譜線,一般在實(shí)驗(yàn)中選擇共存元素譜線干擾少、精密度好和信噪比高的譜線。

表2 各元素波長Table 2 The wavelengths of element analysis
表3顯示,將各元素的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液配制成一系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,濃度分別為0.1、1.0、10.0、100.0mg·L-1。在選定的儀器操作條件下對標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行測試,化學(xué)工作站自動繪制工作曲線。

表3 各元素的標(biāo)準(zhǔn)曲線Table 3 Regress equation and interrelated coefficient
考察了胎元飲中K、Ca、P、Mg、Na、Fe、Mn、Zn、Cu及Pb、Cd、As等共存元素對待測元素的影響。結(jié)果表明,8.0 mg·mL-1的Pb,10mg·mL-1的Cd,10mg·mL-1的As對待測元素幾乎沒有影響。由于實(shí)際樣品中共存元素濃度均低于上述濃度,因此上述結(jié)果可以確保用于實(shí)際樣品中10種伴生元素的無干擾測定。
表4顯示,配制14份試劑空白,在選定的工作條件下測量,以3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差計(jì)算方法檢出限(DL)。從表中可以看出,檢出限(DL)為1.5~4.7ng·mL-1。
表5顯示,在樣品中加入各待測元素標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,按實(shí)驗(yàn)方法及選定的檢測條件做標(biāo)準(zhǔn)加入回收試驗(yàn)。

表4 元素分析性能Table 4 Analytical performance of elements

表5 回收率試驗(yàn)Table 5 Recovery tests
表6顯示,將樣品采用ICP-AES法進(jìn)行測定,含量較高的元素K、Na、Ca、Mg、P經(jīng)稀釋后測定。

表6 胎元飲水煎劑各微量元素的含量(μg·g-1)(n=6)Table 6 The content of trace elements in taiyuan decoction(μg·g-1)(n=6)
近年來,微量元素對人體妊娠的作用,尤其對胎兒和新生兒生長發(fā)育的作用,已引起廣泛的注意。妊娠期由于生理活動和代謝水平的變化,微量元素的含量也發(fā)生相應(yīng)變化。當(dāng)微量元素水平不平衡時(shí),直接影響到胎兒的發(fā)育。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果中我們可看出,胎元飲中含有豐富的K、Ca、P、Mg、Na及Fe、Mn、Zn、Cu等微量元素,為養(yǎng)胎保胎提供必要的物質(zhì)基礎(chǔ),其中Fe、Cu、Zn和Mn各元素互相協(xié)同,組成了重要的生血四要素。此外,胎元飲還含有Al、B等其他一些微量元素,而易引起先兆流產(chǎn)孕婦和死胎孕婦血Pb、Cd和As含量都相對較低[3],低于儀器的檢測限,滿足我國中藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
[1]葉 薇.孕期營養(yǎng)與胎兒健康的研究現(xiàn)況[J].臨床進(jìn)展,2009,10(11):3.
[2]趙 偉.臍療法配合胎元飲治療先兆流產(chǎn)30例[J].河南中醫(yī),2007,27(9):51-52.
[3]朱文彪,馮煒強(qiáng),盧海濤.微量元素異常與不良妊娠結(jié)局的關(guān)系初探[J].中國婦幼保健,2008,23(8):1089-1090.