秦香止瀉方對小鼠小腸推進功能及鎮痛作用的機制研究

朱 克 ，彭芝配 ，張金慧 ，李文龍 ，肖瑞飛 ，田志剛 ，江壯嵐 ，滕久祥

（1.湖南中醫藥大學2008級碩士研究生班，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫藥大學，湖南 長沙 410007；3.韶關醫學院藥學系藥學教研室，廣東 韶關 512026；4.湖南中醫藥大學2008級博士研究生班，湖南 長沙 410007）

秦香止瀉方對小鼠小腸推進功能及鎮痛作用的機制研究

朱 克1，彭芝配2*，張金慧3，李文龍4，肖瑞飛2，田志剛3，江壯嵐1，滕久祥2*

（1.湖南中醫藥大學2008級碩士研究生班，湖南 長沙 410007；2.湖南中醫藥大學，湖南 長沙 410007；3.韶關醫學院藥學系藥學教研室，廣東 韶關 512026；4.湖南中醫藥大學2008級博士研究生班，湖南 長沙 410007）

目的 探討秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能及冰醋酸致痛的鎮痛作用。方法（1）將40只SPF級昆明小鼠隨機分為空白對照組、秦香止瀉方低、中、高劑量組，分別給藥后灌服碳末，處死動物觀察小腸碳末推進率：（2）將50只SPF級昆明小鼠分組給藥方法同（1），給藥后腹腔注射2 mL冰醋酸，觀察第1次扭體時間和30 min內各組小鼠扭體次數。結果（1）秦香止瀉方低、中、高劑量組與空白對照組組比較，小腸推進率基本相同，差異無統計學意義（P>0.05）；（2）秦香止瀉方低、中、高劑量組、腸康片組與空白對照組比較，疼痛潛伏時間均較空白對照組延長，差異具有統計學意義（P<0.05）；扭體次數相比差異具有統計學意義（P<0.01）；秦香止瀉方中、高劑量組與腸康片組比較,疼痛潛伏時間延長，扭體次數亦減少，差異具有統計學意義（P<0.05）。結論 秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能無明顯抑制及推進作用;秦香止瀉方低、中、高劑量組與腸康片組比較,扭體次數明顯減少，提示秦香止瀉方具有較好的鎮痛作用。

秦香止瀉方；小腸碳末推進；抗炎鎮痛;小鼠；秦皮；木香

秦香止瀉方是湖南中醫藥大學滕久祥教授在臨床運用多年的經驗方，擬用此方治療濕熱腹瀉取得較好的臨床療效。該方由秦皮、木香、白頭翁等藥物組成，具有清熱燥濕、澀腸止瀉、理氣止痛之功，本文對該方進行小腸碳末推進及冰醋酸所致扭體鎮痛實驗，探討其作用機制，現將實驗方法及結果報道如下。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 動物 90只SPF級昆明小鼠，體質量（18±2）g，雌雄各半。動物由上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供（許可證編號：SCXK(滬)2008-0002）。

1.1.2 藥物 秦香止瀉方藥材購于湖南中醫藥大學第一附屬醫院；腸康片由張家界元爾藥業有限公司生產，批號：20100802，規格 0.05 g/片×24 片。

1.1.3 儀器 電子稱：ESP－3001型，長沙湘平科技發展有限公司；TF－1000型電子天平，湘儀天平儀器廠；軟尺、柳葉刀等。

1.1.4 試劑 冰醋酸：AR級，汕頭市西隴化工廠生產，批號：090414-2。 生理鹽水：500 mL/瓶，上海德勝科技集團 （安慶）制藥有限公司生產，批號：09103201。

1.1.5 藥物制備 秦香止瀉方（秦皮、木香、白頭翁等藥）藥材購自湖南中醫藥大學第一附屬醫院，取生藥材120 g，水煎煮2次，合并濾液，濃縮至120 mL，即每毫升水煎液含1 g生藥，置4℃保存備用。

1.2 方法

1.2.1 動物分組 ①小腸碳末推進實驗動物分組：將 40 只 SPF 級昆明小鼠，體質量（18±2）g，雌雄各半,按性別分層后編號，按隨機數字表法隨機分為4組，即：空白對照組，秦香止瀉方低、中、高劑量組，每組小鼠10只，觀察其碳末推進率。②扭體實驗動物分組：將 50 只 SPF 級昆明小鼠，體質量（18±2）g，雌雄各半,按性別分層后編號，按隨機數字表法隨機分為5組，即：空白對照組，秦香止瀉方低、中、高劑量組及腸康片組，每組小鼠10只，觀察記錄扭體次數。

1.2.2 小腸碳末推進實驗 ①小鼠給藥：實驗前小鼠禁食不禁水24 h，秦香止瀉方低、中、高劑量組分別給予臨床等效劑量1、3、9倍濃度（濃度分別為1.6、4.8、14.4 g/kg）灌胃，對照藥物組腸康片組，以臨床等效劑量3倍濃度給藥（濃度為：0.94 g/kg）,給藥劑量均按照60 kg成人體表面積換算。②觀察方法：各藥物組均灌胃相應藥物劑量2次，給藥間隔20 min，空白對照組灌胃同體積生理鹽水，第2次給藥后15 min，各組小鼠均灌胃10%碳末生理鹽水，體積均為0.1 mL/10 g，20 min后處死動物，解剖，測量小腸長度及墨汁前端至幽門距離。③檢測指標：測量小腸長度及碳末汁前端至幽門距離，P=小腸炭末推進長度(cm)/小腸全長(cm)×100%。百分率數據進行數據轉換，以百分率的平方根的反正弦數值(Arcsin)為統計指標。

1.2.3 冰醋酸扭體實驗 ①小鼠給藥：各組給藥劑量同小腸碳末推進實驗，均灌胃給藥1次，模型組給予等量蒸餾水，20 min后各組小鼠均腹腔注射0.6%冰醋酸0.2 mL/只。②觀察記錄：小鼠注射冰醋酸溶液后30 min內扭體反應（腹部收縮內凹、伸展后肢、臀部抬高、蠕行）的次數和時間。③檢測指標：扭體次數和疼痛潛伏時間；鎮痛率（%）=空白對照組平均扭體次數-給藥組平均扭體次數/空白對照組平均扭體次數×100%。

1.3 統計學分析

所有數據均采用SPSS 16.0軟件進行處理。計量資料用“”表示。兩組間用t檢驗，多組間用方差分析。

2 結果

2.1 秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能影響

實驗結果顯示，秦香止瀉方低、中、高劑量組與空白對照組比較，小腸推進率基本接近，差異無統計學意義（P>0.05），見表 1。

表1 秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能影響（n=10，）

表1 秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能影響（n=10，）

組 別空白對照組秦香止瀉方低劑量組秦香止瀉方中劑量組秦香止瀉方高劑量組藥物劑量(g/kg)-1.6 4.8 14.4小腸推進率（P）74.49±6.16 73.63±5.47 73.79±2.62 74.56±5.16 Arcsin（P1/2）1.00±0.07 1.00±0.06 1.00±0.07 1.01±0.05

2.2 秦香止瀉方對冰醋酸所致小鼠扭體疼痛的影響

秦香止瀉方低、中、高劑量組、腸康片組與空白對照組比較，疼痛潛伏時間均較空白組延長，差異具有統計學意義（P<0.05）；與空白組比扭體次數明顯減少，差異具有統計學意義（P<0.01）；秦香止瀉方中、高劑量組與腸康片組比較,疼痛潛伏時間延長，扭體次數亦減少，差異具有統計學意義（P<0.05）。秦香止瀉方低、中、高劑量組及腸康片組鎮痛率均大于50%，提示具有較好的鎮痛作用，見表2。

表2 秦香止瀉方對冰醋酸所致小鼠扭體疼痛的影響（n=10，）

表2 秦香止瀉方對冰醋酸所致小鼠扭體疼痛的影響（n=10，）

注：與空白對照組比較﹡P﹤0.05，**P﹤0.01；與腸康片組比較▲P﹤0.05。

組 別空白對照組腸康片組秦香止瀉方低劑量組秦香止瀉方中劑量組秦香止瀉方高劑量組疼痛潛伏時間（min）4.38±0.96 7.49±2.01*7.69±2.00*10.68±3.12**▲10.59±2.45**▲扭體次數（次）56.3±7.12 29.0±5.85**29.0±6.24**21.7±5.18**▲19.9±5.11**▲鎮痛率（%）-57.54 52.92 60.00 61.22

3 討論

腹瀉是指原來的大便習慣發生變化，每日排便量達200 g以上，次數超過3次，糞便稀薄，水分超過糞便總量的85%，或含脂肪，或帶有不消化食物，有時帶有黏液或膿血，可伴腹痛、里急、肛周不適、失禁等癥狀。重者可引起消瘦、電解質紊亂[1]。急性腹瀉屬中醫學“泄瀉”之“暴瀉”范疇。目前西醫對急性腹瀉的治療藥物主要有抗生素類，用慶大霉素、氟哌酸、氟嗪酸等藥物，其容易產生耐藥性，對肝、腎等器官的毒副作用較大并價格昂貴，在臨床上不利于廣泛應用。

秦香止瀉方是導師在治療濕熱腹瀉多年臨床研究的經驗方，且價格低廉、安全、毒副作用小、有利于推廣。方中以秦皮清熱燥濕、解毒止瀉為君。現代藥理研究表明秦皮主要成分為香豆素類(秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷、秦皮素)[2]。秦皮甲素、秦皮乙素、秦皮苷均有明顯抗炎鎮痛作用[3]。體外實驗秦皮對金黃色葡萄球菌、福氏痢疾桿菌、宋內氏痢疾桿菌有顯著的抑制作用，對傷寒桿菌，副傷寒桿菌也有一定程度的敏感性，體外實驗顯示秦皮可降低由傷寒桿菌引起的小鼠急性腹膜感染的死亡率[4]。秦皮還有一定的抑制病毒作用,如抗流感病毒、皰疹病毒等。木香能調節胃腸運動，抗消化性潰瘍，抗腹瀉和抗炎作用[5]。白頭翁醇提物對TNBS誘導大鼠結腸炎腸上皮細胞緊密連接蛋白的調控，起到對腸黏膜屏障的保護作用[6]。且白頭翁的抗菌有效成分有原白頭翁素、白頭翁素，二者對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、痢疾桿菌、結核桿菌、白喉桿菌、鏈球菌等均有強烈活性，其在MIC 8x10—2x10之間，并與鏈霉素有協同作用[7]。全方諸藥合用，相輔相承，配伍得當，主次分明，共奏清熱燥濕、澀腸止瀉、行氣止痛之功。

正常小鼠的小腸碳末推進作為藥效學重要的實驗部分，而實驗表明秦香止瀉方對正常小鼠小腸推進功能無推動及抑制作用，即可能是秦香止瀉方對病態小鼠的腸蠕動有抑制作用或者是直接作用于腸道炎癥部位而產生止瀉效果。扭體實驗結果表明秦香止瀉方能明顯減少冰醋酸所致小鼠腹痛的扭體次數，說明此方具有明顯的鎮痛作用。

[1]陳其奎，何興祥，朱兆華，等.消化疾病診斷學［M］北京：人民衛生出版社，2006：389.

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[3]李存紅，徐 燕.秦皮的研究進展[J].焦作大學學報，2004,10(4):34-35.

[4]楊天鳴，葛 欣，王曉妮.秦皮抗菌作用研究[J].西北國防醫學雜志，2O03，24(5)：387-388.

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[6]張文遠,姜偉煒.白頭翁醇提物對大鼠結腸炎腸黏膜上皮細胞緊密連接蛋白的保護作用[J].世界華人消化雜志，2009,17(30):3 134-3 139.

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（本文編輯 彭芝配）

Mechanism study of Qinxiang Zhixie decoction on promoting small intestine and analgesic effect in mice

ZHU Ke,PENG Zhi-pei,LI Wen-long,XIAO Rui-fei,TIAN Zhi-gang,JIANG Zhuang-lan,TENG Jiu-xiang
(TCM University of Hunan,Changsha,Hunan 410007,China)

Objective To investigate the effect of Qinxiang Zhixie decoction on promoting small intestine and analgesic effect in mice.Methods(1)40 SPF mice were randomly divided into control groups,and low,medium and high dose of QinXiang Zhixie groups,after feeding medicine and then carbon powder respectively,the mice were killed to observe its propelling of small intestine.(2)50 SPF miceweregrouped and feed like(1),and then injecting 2 mL glacial acetic acid into abdominal cavity,the first writhing time and times of writhing within 30 min.Results(1)compared with the control group,the propelling rates in low,medium and high dose groups were nearly same(P>0.05).(2)Compared with control group and intestine tablet group,the pain latency time in all low,medium and high dose groups was longer(P<0.05),the differencesofthe writhing timeswere significant(P<0.01);compared with the intestine tablet group,the pain latency prolonged and the writhing reduced in medium and high dose group(P<0.05).Conclusion QinXiang Zhixie decoction is not suppressed and is effective to remove pain.

QinXiang Zhixie decoction;carbon propelling in small intestine;anti-inflammatory analgesic;mice;Fraxinus rhynchophylla Hance;Aucklandia lappa Decne

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674－070X.2011.05.007.023.03

2011-02-11

長沙市科技局課題（K1009002-31）。

朱 克(1985-),男，河北邯鄲人，在讀碩士研究生，主要從事中老年病及消化系統疾病臨床及實驗研究。

*彭芝配，女，研究員，碩士研究生導師，E-mail：pengzhipei805@126.com；*滕久祥，男，教授，博士研究生導師，國家食品藥品評審專家。