環(huán)保透明脫蠟液替代二甲苯在病理制片中的應(yīng)用

姜紅飛

(九江市第一人民醫(yī)院病理科,江西九江332000)

二甲苯作為傳統(tǒng)的透明脫蠟溶劑,被長(zhǎng)期廣泛應(yīng)用于常規(guī)石蠟制片中,然而二甲苯是一種毒害性較大的試劑,早已引起環(huán)保部門的重視。國(guó)家有關(guān)部門規(guī)定室內(nèi)空氣中二甲苯最高允許濃度為100 mg·m-3[1],而醫(yī)院病理技術(shù)室的二甲苯室內(nèi)空氣含量往往會(huì)超標(biāo)數(shù)倍。二甲苯對(duì)人體的毒害主要通過呼吸道吸入和皮膚接觸進(jìn)入體內(nèi),損害神經(jīng)系統(tǒng)和血液系統(tǒng),長(zhǎng)期接觸引起神經(jīng)衰弱綜合征和植物神經(jīng)紊亂以及皮膚黏膜刺激癥狀,還可引起免疫功能低下、貧血、白細(xì)胞減少、皮炎、濕疹和皮膚干燥,尿中也可以出現(xiàn)蛋白管型等。2009-2010年九江市第一人民醫(yī)院使用環(huán)保透明脫蠟液對(duì)組織進(jìn)行透明、脫蠟,取得了良好效果,報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

本院送檢的病理組織標(biāo)本,包括胃、腸、肝、脾、腎、淋巴結(jié)、乳腺、子宮等組織,選取環(huán)保透明脫蠟液和二甲苯制片各1 000張。環(huán)保透明脫蠟液:江原@牌,無(wú)錫江原實(shí)業(yè)技貿(mào)總公司生產(chǎn);二甲苯:重慶市天府精細(xì)化學(xué)品廠生產(chǎn)。

1.2 方法

按照常規(guī)操作程序使用全自動(dòng)脫水機(jī)進(jìn)行固定、脫水、透明、浸蠟。透明采用二甲苯和環(huán)保透明脫蠟液各2缸,時(shí)間均為20 min·缸-1。將處理好的組織常規(guī)包埋,在專用病理組織切片機(jī)上切成3～4 μ m,烘片、脫蠟。組織脫蠟分別采用環(huán)保透明脫蠟液和二甲苯各2缸,每次15 min。最后通過HE染色用光學(xué)顯微鏡觀察。

根據(jù)常規(guī)石蠟包埋-HE染色質(zhì)量的基本標(biāo)準(zhǔn)[2]進(jìn)行效果判定。脫蠟后組織切面完整,透明度好,厚薄均勻:細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)染色對(duì)比清晰的切片為優(yōu)質(zhì)片,稍差的為良片,不好的定為差片。優(yōu)良率=(優(yōu)質(zhì)片數(shù)+良片數(shù))/總制片數(shù)×100%。

2 結(jié)果

2種制片方式的效果比較見表1。由表1可見,環(huán)保透明脫蠟液與二甲苯制片優(yōu)良率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),優(yōu)良率(均≥90%)達(dá)到了常規(guī)石蠟包埋-HE染色基本標(biāo)準(zhǔn)。

表1 環(huán)保透明脫蠟液與二甲苯制片效果比較張

3 討論

二甲苯價(jià)格低廉,制片效果好,長(zhǎng)期以來在病理組織透明和制片中被廣泛應(yīng)用,但它屬于芳香族化合物,折光率1.495,沸點(diǎn)144℃,氣味難聞,毒性較強(qiáng),易揮發(fā),在空氣中最高濃度為100 g·m-3[3]。長(zhǎng)期吸入皮膚會(huì)危害健康、污染環(huán)境,而且制片過程中二甲苯的透明時(shí)間如果掌握不好,易使組織收縮、變硬、變脆[4],影響制片質(zhì)量。

本科使用的一種新型試劑——環(huán)保透明脫蠟液是專門為組織病理學(xué)和細(xì)胞學(xué)樣品處理設(shè)計(jì)的無(wú)色無(wú)味的有機(jī)溶劑,不含芳香族化合物,是一種環(huán)保的二甲苯替代物,可用于組織脫水及染色過程中,對(duì)儀器無(wú)腐蝕性,且無(wú)須改變?cè)谐绦?安全無(wú)毒,無(wú)異味符合GB18583-2001《室內(nèi)裝飾裝修材料粘劑中有害物質(zhì)限量》標(biāo)準(zhǔn),透明效果與二甲苯相同,長(zhǎng)時(shí)間浸泡組織不會(huì)使組織變脆,還能增強(qiáng)浸蠟效果,反而有利于切片;不與水混合,即使在潮濕的環(huán)境下使用,也不會(huì)因吸收水汽而濃度下降;對(duì)于脂肪類組織脫水效果更優(yōu)于二甲苯,其高純度、高穩(wěn)定性可確保實(shí)際應(yīng)用的質(zhì)量,是二甲苯的理想代替品。

當(dāng)然,相對(duì)于二甲苯低廉的價(jià)格來說,環(huán)保透明脫蠟液價(jià)格偏高,溶解中性樹膠速度較慢,有時(shí)還需要放在烤箱中加熱以加速其溶解;但透明脫蠟液試劑能很好地應(yīng)用于外檢常規(guī)制片工作中,同時(shí)也適用于冷凍切片、特殊染色、免疫組織化學(xué),并完全能夠達(dá)到滿意的效果,尤其它具有安全性、環(huán)保、無(wú)毒的優(yōu)點(diǎn),為了病理工作人員的健康和保護(hù)環(huán)境,可以取代毒性較大的二甲苯而應(yīng)用于臨床。

[1] 中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部.工業(yè)企業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1979:11-12.

[2] 中華醫(yī)學(xué)會(huì).臨床技術(shù)操作規(guī)范:病理學(xué)分冊(cè)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2004:3.

[3] 譚常蘭,劉付華,賀美華,等.松節(jié)油代替二甲苯快速脫蠟在病理切片中的應(yīng)用[J].懷化醫(yī)專學(xué)報(bào),2003,2(1):91.

[4] 龔志錦,詹镕洲.病理組織制片和染色技術(shù)[M].上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,1994:19.