中藥復方對慢性心力衰竭大鼠心肌組織AngⅡ、BNP的影響*

宮麗鴻 張 艷△ 高 峰

1遼寧中醫藥大學附屬醫院（遼寧沈陽110032）

2遼寧中醫藥大學（遼寧沈陽110032）

△通信作者

慢性心力衰竭（CHF）是臨床常見病，多發病及危重病癥，常是所有不同病因所致器質心臟病的主要并發癥及終末表現，其發病率日益增高。CHF主要是RAS系統激活，血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）等血管活性物質增高所致，腦鈉素（BNP）激活導致心室重塑。本實驗觀察中藥益氣活血復方對CHF大鼠心肌組織AngⅡ、BNP的影響的干預機制。

1 材料與方法

1．1 實驗動物 普通級健康SD大鼠60只，體質量200～230g，12周齡，雄性，由遼寧中醫藥大學動物實驗中心提供。在通風、濕度、濕度適宜的動物室內常規飼養，自由飲水。

1．2 實驗藥物 益氣活血復方：由黃芪、人參、紅花、丹參、益母草、三七粉、葶藶子等組成（本溪第三制藥廠）。賴諾普利片：上海信誼萬象藥業股份提供，每片10mg，國藥準字H10960265。

1．3 模型制備 常規喂養大鼠1周，第2周飼料減1／2量，以使其饑餓，同時游泳至疲乏，每日1次，共4周。經多普勒超聲心動圖檢測左室射血分數（EF），計算 CI值，EF≤60%，CI≤180mL/（min·kg）者為左心衰；同時大鼠出現體質量減輕，精神萎靡，毛色無光澤。出現以上癥狀視為造模成功。

1．4 分組與給藥 將成模大鼠隨機分為中藥組、西藥組、模型組，每組15只。另取15只未造模大鼠作為正常組。各用藥組按人-鼠劑量換算（給藥劑量=人給藥劑量×0．018/體質量），中藥組予益氣活血方 9．2g/（kg·d）灌胃，西藥組予賴諾普利 1．5mg/（kg·d）灌胃，正常組和模型組大鼠灌胃等容積蒸餾水。每日1次，連續給藥6周。

1．5 標本采集 在對大鼠灌胃藥物（蒸餾水）6周后，禁食不禁水12h，麻醉處死全部大鼠。腹主動脈取血4mL，室溫下血液自然凝固20min，離心20min（3000r/min）。仔細收集上清液，低溫保存。取其大鼠心臟心肌組織，每組取8只，每只大鼠心臟按標準處理，于液氮中冷凍后在-80℃條件下保存待測，蛋白印跡分析法檢測。

1．6 檢測方法 BNP測定：按BNP試劑盒說明書步驟操作，試劑盒購自北京博士德公司。心肌組織AngⅡ表達檢測：按AngⅡ試劑盒說明書步驟操作，試劑盒購自大連TaKaRa公司；引物合成，北京華大基因公司。

1．7 統計學處理 應用SPSS 13．0統計軟件。 數據以（x±s）表示。組間比較采用完全隨機分組多組均數比較的單因素方差分析，若方差不齊采用Dunnett檢驗。P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結 果

2．1 益氣活血復方對CHF大鼠血清BNP水平的影響 見表1。與正常組相比，模型組血清BNP水平顯著升高（P＜0．05）；同模型組比較，中藥組與西藥組血清BNP水平降低（P＜0．05）；中藥組與西藥組比較，無顯著差異（P＞0．05）。

表1 各組大鼠血清BNP水平比較 （μg/L，±s）

表1 各組大鼠血清BNP水平比較 （μg/L，±s）

與模型組比較，*P＜0．05，**P＜0.01。 下同。

組別 n BNP正常組 8 14．49±2．18*模型組 8 39．16±5．83*西藥組 8 23．42±2．21*中藥組 8 24．42±1．98*

2．2 益氣活血復方對CHF大鼠心肌組織AngⅡ表達的影響見表2。與模型組比較，西藥組與中藥組AngⅡmRNA、AngⅡ蛋白表達有顯著差異（P＜0．01）；中藥組AngⅡ蛋白表達顯著高于西藥組（P＜0．05）。

表 2 各組大鼠心肌組織AngⅡ表達比較 （±s）

表 2 各組大鼠心肌組織AngⅡ表達比較 （±s）

與西藥組比較，△P＜0．05。

組別 n正常組 8模型組 8西藥組 8中藥組 8 AngⅡmRNA 1.00±0.00*1.418±0.545 1.206±0.498**1.227±0.788**AngⅡ蛋白表達51.938±6.919*180.232±3.047 83.197±4.919**90.387±6.606**△

3 討 論

本實驗驗證了益氣活血復方治療CHF的有效性，其治療效果與西藥療效相當。通過臨床大量試驗也發現益氣活血復方治療CHF有效可達85%以上［1］。根據中醫辨證論治的認識，CHF的病機關鍵是心（氣）陽虛，根據“虛則補之”的原則，臨床采用益氣溫陽的手段恢復陽氣，調整臟腑功能，平衡氣血陰陽。我們根據臨床經驗發現CHF患者多屬心氣虛，血脈不通，心血瘀阻，水濕內停所致。而血瘀與水飲又互相影響，如仲景所云“血不利則為水”，如使得水濕得化，瘀血得消，則陽氣自復，從而達治療之功。由此可見益氣活血是CHF，特別是氣虛血瘀證的治療大法，且貫穿于CHF各證型的治療大法。

BNP是利鈉肽類的一種肽類激素，在左右心房的含量最多。BNP的合成分泌受心室容量負荷和室壁張力的影響，故血BNP含量可直接反映心室功能。BNP的前體前腦鈉肽原 （prep roBNP）由心室細胞分泌，脫去N端28個氨基酸組成的信號肽，成為由108個氨基酸組成的腦鈉肽原，在分泌過程或進入血液過程中，由絲氨酸蛋白酶分解成為具有生物活性的含有32個氨基酸的BNP和含有76個氨基酸的無活性的氨基末端腦鈉肽前體（NT-proBNP）［2］。 外周血中 BNP 和 NT-proBNP 二者的濃度相等，但他們的半衰期卻有較大差別，BNP為20min，NT-proBNP為120min，故有些學者認為，通過測定NT-proBNP在血漿中的水平，更能反映BNP水平的變化［3］。腦鈉肽對CHF的影響其主要作用包括：對腎素-血管緊張素-醛固酮系統（RAAS）的拮抗作用，對交感神經系統的拮抗作用，舒張冠脈作用。 此外，BNP還具有抑制心肌纖維化，抑制血管平滑肌增生，抑制系膜細胞及纖維母細胞增生，在心室重構中作為一種局部調節因子起作用。另外，還可以抑制纖溶酶原激活物抑制因子-1（PAI-1）的表達，防止血栓形成［4］。

AngⅡ是造成心肌肥厚、心室重構，誘導心肌細胞凋亡，最終導致CHF重要且相對獨立、特異的指標。特別是對心肌細胞直接注射AngⅡ，而AngⅡ在不依賴血流動力學改變的情況下對心肌細胞增生及肥厚有明顯作用，嚴重時可造成心肌纖維化、心肌重構，導致心肌收縮與舒張功能受損，最終造成CHF的發生［5］。

通過本實驗證明，益氣活血復方對心肌組織中AngⅡ、BNP相對模型組有抑制其表達的作用，與西藥組相比療效相當；充分證明益氣活血復方可抑制或逆轉心室重構的過程，從而達到治療CHF的目的。

［1］ 張艷，楊碩，龐敏，等.益氣活血復方對慢性心衰大鼠心肌組織AngⅡ及 PKC 的影響［J］.中華中醫藥雜志，2008，23（11）：999-1001.

［2］ 盧飛舟，趙殿有．充血性心力衰竭患者血漿腦鈉肽素濃度與心功能的關系［J］．心臟雜志，2004，16（3）：266．

［3］ Szypryt E P， Twining P， Mulholland RC， et al．The prevalence of disc degenerationassociatedwithneuralarchdefectsofthelumbarspine assessed bymagneticresonanceimaging［J］.Spine，1989 ，14（11）：977.

［4］ 陶以嘉，李春慶，金偉東，等.血漿B型利鈉肽（BNP）在心功能不全中的診斷和治療效果中的應用 ［J］.中國微循環，2005，9（6）：433-435.

［5］ KannelWB，Ho K，Thorn T．Changing epidemiological featuresof cardiac failure［J］．BrHeart J，1994，72（5）：3-9.