金辛鎮痛液對急性血瘀證大鼠PGF1α及TXB2的影響*

張紅星 黃國付 祁 青 易艷東 林世和周 利鄒 燃安 雪唐 雷

1湖北省武漢市中西醫結合醫院（湖北武漢430022）

2湖北中醫藥大學（湖北武漢430065）

金辛鎮痛液是武漢市中西醫結合醫院中藥外用制劑，主要成分為洋金花、細辛、乙醇等。其對動物急慢性炎癥、疼痛模型有明顯的抗炎、鎮痛作用［1］，臨床應用于痹證的關節、肌肉、筋骨疼痛等療效確切［2］。本研究在前期基礎上通過建立急性血瘀證模型，觀察其對大鼠血液流變學指標和血漿前列腺素F1α（PGF1α）、血栓素 B2（TXB2）的影響。

1 材料與方法

1.1 動物 SPF級SD大鼠（雌雄各半，體質量180～220g），由武漢大學動物實驗中心提供，許可證號：SCXK（鄂）2008-0004，合格證號為00008546。

1.2 藥物與試劑 金辛鎮痛液由武漢市中西醫結合醫院制劑中心提供，批號：051106；鹽酸腎上腺素注射液（武漢遠大制藥集團有限公司，批號：H42021700）；麝香舒活精（黃石飛云制藥有限公司，批號：050701）；肝素（萬邦醫藥，批號：H32020612）；PGF1α和TXB2試劑盒均由武漢華瑞康生物試劑有限公司提供。

1.3 分組及給藥 取大鼠60只，采用隨機數字表法分為正常對照組，模型對照組，麝香舒活精組，金辛鎮痛液低劑量組（100%金辛鎮痛液）、中劑量組（200%金辛鎮痛液）、高劑量組（400%金辛鎮痛液），每組10只。各組大鼠在乙醚淺麻下常規方法背部脫毛，面積約8cm2。第2日于脫毛區涂以相應藥物，每只大鼠用藥0.5mL/100g，每日2次，連續給藥5d。

1.4 造模及采血 于第6日第1次給藥后1h，除正常對照組外，其余各組均于皮下注射鹽酸腎上腺素0.08mL/100g，共2次，兩次間隔4h。在第1次注射鹽酸腎上腺素后2h將大鼠浸入冰水中游泳5min，以造成急性血瘀證模型［3］。造模后將所有大鼠禁食12h，次日晨用10%水合氯醛0.03mL/100g腹腔注射麻醉，腹主動脈采血。

1.5 觀察指標 （1）血液流變學指標測定：取血5mL肝素抗凝，進行全血黏度切變率（1.00，5.00，30.00，200.00）、血漿黏度、紅細胞聚集指數、全血高切相對指數、全血低切相對指數的檢測。（2）血漿 PGF1α 和 TXB2測定：取血 2mL，3000r/min，離心 10min分離血漿，采用酶聯免疫法（ELISA）測定血漿PGF1α和 TXB2含量。全部樣品測定均由專人負責，并嚴格按照試劑盒說明書所提供的方法操作。

1.6 統計學處理 應用SPSS17.0軟件，計量資料以 （x±s）表示，組間差異比較采用單因素方差分析法。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 金辛鎮痛液對血瘀證模型大鼠血液流變學的影響 見表1。模型組與正常組比較，血液流變學指標差異有統計學意義 （P＜0.01），結合生物表征，血瘀證模型成立。金辛鎮痛液3個劑量組和麝香舒活精組均能不同程度改善血液流變學指標，且與模型組比較，差異有統計學意義（P＜0.05或0.01）；金辛鎮痛液組與麝香舒活精組相比無明顯差異；提示金辛鎮痛液有改善急性血瘀證大鼠血液流變學的作用，降低血液濃、黏、聚、凝狀態。

表1 各組大鼠血液流變學指標比較

表1 各組大鼠血液流變學指標比較

與正常組比較，*P＜0.01；與模型組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。 下同。

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2.2 金辛鎮痛液對血瘀證模型大鼠血漿PGF1α和TXB2的影響 見表2。與正常組比較，模型組大鼠血漿PGF1α的含量明顯減少，而TXB2含量明顯增加，差異均有統計學意義（P＜0.01）。金辛鎮痛液3個劑量組和麝香舒活精組均能提高PGF1α的含量，降低TXB2的含量，TXB2/PGF1α值明顯改善，與模型對照組比較，差異有統計學意義（P＜0.05或0.01）。提示金辛鎮痛液能調節PGF1α/TXB2平衡，改善血瘀狀態。金辛鎮痛液高劑量組TXB2水平和麝香舒活精組相比，差異無統計學意義（P＞0.05）。提示金辛鎮痛液組與麝香舒活精組效果大致相等。

表2 各組血漿PGF1α和TXB2含量比較（）

表2 各組血漿PGF1α和TXB2含量比較（）

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3 討 論

中醫學認為寒凝等病因所致血行不暢，停遏于經脈之內及瘀積于臟腑組織器官均稱為瘀血。故根據寒凝則血瘀理論，本研究以冰水浴刺激結合皮下注射腎上腺素造成血瘀證模型。腎上腺素為α、β受體興奮劑，具有收縮外周血管和增加心臟收縮力的作用，與冰水浴刺激結合，可使外周血管強烈收縮，心臟后負荷增加，心肌耗氧代謝增加，心功能逐漸下降，從而使血液運行障礙，血液黏度增加，形成瘀血的病理改變［3］，從而建立急性血瘀證模型。實驗研究表明血瘀證與血液循環障礙和內皮功能、血液濃黏聚凝滯狀態、血小板活化和黏附聚集、組織細胞代謝異常、免疫功能障礙等多種生理病理改變有很大關聯，血液流變學指標異常為診斷血瘀證的重要客觀指標［4］。同時有研究表明，血栓素 A2（TXA2）、前列腺素（PGI2）代謝平衡在血瘀證發病中起著重要作用［5］。TXA2為血小板激活劑，是目前已知的最強的縮血管物質和血小板聚集劑之一，能促進血栓的形成，并誘導白細胞趨化、聚集，參與炎癥反應及組織損傷；PGI2是血小板功能抑制物，是最強的內源性血小板聚集抑制劑和血管擴張劑，對血小板聚集引起的血管痙攣有保護作用。正常狀態下，TXA2、PGI2的產生和釋放處于動態平衡，以防止血小板在血管壁上黏附和血小板的自發性聚集，保持血管活力，維持血小板及其他細胞機能，防止血栓形成［6］。當內皮細胞損傷后，血小板被激活，TXA2產生增多，其通過抑制腺苷酸環化酶使血小板和血管壁平滑肌內環磷腺苷（cAMP）減少，或者作為Ca2+載體直接促進Ca2+內流和致密管系統的Ca2+釋放，從而促進血小板聚積和局部血管收縮，加重內皮損傷。鄰近的正常血管內皮細胞能利用血小板釋放的前列腺素環內過氧化物來增加PGI2合成。PGI2通過興奮腺苷酸環化酶，增加cAMP濃度，起到擴張血管、限制血小板聚積和保護受損內皮的作用［7］。若TXA2/PGI2調節發生紊亂，能明顯影響凝血與抗凝血的平衡，導致脈絡瘀阻。血栓素A2（TXA2）、前列腺素（PGI2）均系前列腺素代謝衍生物，二者在體內極為不穩定，TXA2于30s、PGI2于3min后分別降解為無活性的 TXB2及 6-keto-PGF1α，因此血漿TXA2和PGI2的含量水平變化可通過檢測TXB2和6-keto-PGF1α的含量來反映。

在本研究中，金辛鎮痛液低中高劑量組、麝香舒活精組均能不同程度地降低大鼠血液流變學指標，使大鼠血漿TXB2含量減少和PGF1α含量明顯增多，TXB2/PGF1α比值相應增高。這些指標的變化提示金辛鎮痛液對血瘀證模型大鼠有著明顯的活血化瘀作用，抑制TXB2釋放，促進PGF1α分泌，糾正 TXB2/PGF1α平衡，從而抑制了血小板的聚集和炎癥介質活性，可能是其發揮抗血栓形成作用機制之一，但是其發揮作用的物質基礎和深層機理有待于進一步研究。

［1］ 張紅星，易艷東，劉倩，等.金辛鎮痛噴霧劑抗炎鎮痛作用的實驗研究［J］.湖北中醫雜志，2006，28（7）：10-11.

［2］ 張紅星，鄒燃，黃國付，等.中藥離子滲透治療腰椎間盤突出癥療效觀察［J］.湖北中醫雜志，2009，31（1）：13-14.

［3］ 苗明三，朱飛鵬.常用醫藥研究動物模型［M］.北京：人民衛生出版社，2007：438-439.

［4］ 中國中西醫結合研究會.血瘀證的診斷標準［J］.中國中西醫結合雜志，1987，7（3）：129.

［5］ 鄭健，吳群勵，鄭建洵，等.腎康靈對阿霉素腎病大鼠血栓素B2和6-酮-前列腺素 F1α 的影響［J］.中醫雜志，2004，45（8）：619-622.

［6］ 陳志強，范煥芳，郭登洲，等.化瘀通絡中藥對MsPGN大鼠血栓素B2及6-酮前列腺素F1α表達的影響［J］.中國中醫基礎醫學雜志，2009，15（3）：197-199.

［7］ 王昕，姚凝，劉健鴻，等.舒經玫瑰膠囊對小鼠原發性痛經血漿血栓素B2、6-酮-前列腺素 F1α 的影響［J］.中國中醫藥信息雜志，2008，15（6）：41-42.