中晚期胃癌介入干預前后血清MG7-Ag、sIL-6R、VEGF的變化

張惠潔,郭衛東,牛德森,狄紀君,斯 琴,李慧麗,耿春玲,張惠茹,張 樺

（內蒙古包鋼醫院腫瘤科,內蒙古包頭 014010）

胃癌是消化道最常見的惡性腫瘤之一,它的發病率和死亡率居各類腫瘤前列。我國早期胃癌的發現率不到10%,大約80%的病人在診斷時已有淋巴結轉移,40%的病人已有腹腔擴散,甚至遠處器官的轉移。因此,胃癌在診斷時已有1/3的病人不能進行根治行切除術。本研究旨在通過對30例中晚期胃癌患者介入干預前后血清MG7-Ag、sIL-6R、VEGF進行動態觀察,為判定中晚期胃癌干預療效及預后提供新的依據。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 2007年1月-2009年10月收治的中晚期胃癌患者30例,包括不能手術切除的中晚期胃癌或術后復發不能再次手術及不愿手術者,其中男性22例,女性8例,年齡63.7±12.70歲,癌組織分化程度:中分化腺癌12例、低分化腺癌18例,發病部位:賁門15例、胃角3例,胃體3例,胃竇9例,其中伴有肝轉移者6例、腹腔淋巴結轉移者5例。同期選擇20例不能行手術的中晚期胃癌患者為對照,該20例患者均行全身化療,男性14例,女性6例,年齡57.65±8.57歲,癌組織分化程度:中分化腺癌8例、低分化腺癌12例,發病部位:賁門9例、胃角1例,胃體4例,胃竇6例,其中伴有肝轉移者4例、腹腔淋巴結轉移者5例。所有患者均完成胃鏡檢查及病理活檢、上消化道鋇餐造影、胸片、骨掃描、腹部B超等檢查,無介入干預禁忌癥,KPS≥60,預計生存期＞3個月。

1.2 干預方法 30例患者均采用seldinger技術,行股動脈穿刺插管,腹腔動脈造影,判斷腫瘤供血動脈的部位和數量。確認腫瘤的供血動脈后,將導管選擇插置靶血管內,然后向靶血管內緩慢注入稀釋的化療藥物及栓塞劑。賁門癌選擇胃左動脈,胃竇、胃角部癌選擇胃右動脈及胃十二指腸上動脈,胃體部癌選擇十二指腸上動脈或肝總動脈,有多支供血者分別選擇。灌注的化療藥物選用5-氟脲嘧啶0.75-1.5 g、亞葉酸鈣 200-300 mg、草酸鉑 100-150 mg。栓塞藥物選用表阿酶素10-20 mg、超液化碘油3-5ml、明膠海棉顆粒15-20粒。對伴有肝轉移的患者行選擇性肝動脈灌注化療栓塞。2次干預間隔3-4周。對照組20例患者行全身化療,化療藥物5-氟脲嘧啶1.5-3.0 g、亞葉酸鈣200-300 mg、草酸鉑100-150mg。所有患者均完成2周期的干預。

1.3 標本采集 所有患者均于干預前、干預后2周、干預后4周取靜脈血5m l,室溫下靜置半小時,再3 000 r/min離心10 min,留取血清于-70℃冰箱儲存備用。

1.4 試劑及儀器 MG7-Ag、VEGF、sIL-6R檢測試劑盒均由美國RB公司提供Multikanmk3酶標儀由芬蘭Labsystems Drangon公司提供。

1.5 檢測方法 MG7-Ag、VEGF及sIL-6R的檢測均采用雙抗體夾心ELISA檢測法,測定均嚴格按照試劑說明書,由檢驗科專業人員進行操作。

1.6 統計學方法 選用SPSS13.0軟件包進行統計處理。計量資料用均數±標準差（±s±s）,計數資料采用 χ2檢驗,組間比較采用F和q檢驗,P＜0.05差異有顯著性。

2 結果

2.1 一般資料 介入干預組與靜脈化療組在性別、年齡、男女比例、細胞學類型、病變部位等方面均匹配,無統計學差異,具有可比性。見表1。

表1 一般資料的比較

2.2 MG7-Ag、VEGF、sIL-6R、在干預前后的變化情況

（1）MG7-Ag、VEGF、sIL-6R的水平在干預前兩組是沒有差異的。（2）介入干預組中MG7-Ag、sIL-6R的水平呈下降趨勢,在干預后4周、干預后2周與干預前比較均有顯著性差異,干預后4周與干預后2周比較亦均有顯著性差異,VEGF的水平在干預后2周較干預前有所增高,但干預后4周卻是下降的,比較差異有顯著性。（3）靜脈化療組中 MG7-Ag、VEGF、sIL-6呈下降趨勢,干預后4周與干預前比較均有顯著性差異,其中只有sIL-6R干預后4周與治療后2周比較有顯著性差異,而MG7-Ag、VEGF干預后4周與干預后2周無顯著性差異。（4）介入干預組中MG7-Ag、VEGF、sIL-6R的水平變化較靜脈化療組明顯,兩組組間比較均有顯著性差異（分別為F=4.356,P=0.042＜0.05、F=4.078,P=0.049＜0.05,F=4.389,P=0.041＜0.05）。見表2。

表2 兩組干預前、后2周、后4周各細胞因子的變化情況（±s±s）項目 介入組干預前 干預后2周 干預后4周靜脈化療組干預前 干預后2周 干預后4周MG7-Ag（U/L） 6.63±2.25 4.65±1.50Δ 2.82±1.11Δ* 6.85±2.38 5.85±2.35 4.53±1.65Δ VEGF（pg/ml） 100.03±16.99 102.28±16.55 64.32±9.32Δ* 104.26±15.22 96.46±14.41 88.10±11.03Δ sIL-6R（ng/L） 62.41±7.71 51.20±7.65Δ 40.40±7.50Δ* 61.73±11.01 57.43±9.79 49.50±7.51Δ*注:重復測量F檢驗,組間采用q檢驗,MG7-Ag前后變化介入組與靜脈化療組組間差異顯著,F=4.356,P=0.042＜0.05;VEGF前后變化介入組與靜脈化療組組間差異顯著,F=4.078,P=0.049＜0.05;sIL-6R前后變化介入組與靜脈化療組組間差異顯著,F=4.389,P=0.041＜0.05。Δ代表與干預前比較 P＜0.05,*代表干預后4周與干預后2周比較 P＜0.05

3 討論

目前絕大多數胃癌患者發現時已為中晚期,失去了手術根治機會,傳統的干預方法就是進行全身化療及局部放療,但療效均不理想[1],并且其嚴重的副作用讓許多患者難以堅持下來,因此介入干預手段成為研究熱點。自1953年Seldinger創立了經皮血管穿刺技術以來,就被廣泛地應用于臨床的多個領域,隨著影像技術及導管材料的發展,介入干預手段成為一門新興的學科,尤其在腫瘤干預方面,已被用于干預肝癌、肺癌、腎癌、卵巢癌等惡性腫瘤,是一個不可或缺的手段,因此將介入手段應用于胃癌的干預備受關注。

MG7-Ag是由鼠源性抗人胃癌單克隆抗體MG7（胃低分化腺癌細胞株MKN-46-9作為免疫原免疫BALB/C小鼠）新發現的一個與胃癌相關性抗原,其敏感性優于已知的消化道腫瘤相關性抗原CA199、TAG72[9],劉丹等[10]報道MG7-Ag在正常胃黏膜中陰性表達,而在胃癌中的表達率可達93.55%,Ren等[11]采用免疫PCR技術檢測胃癌和其他幾種腫瘤患者患者血清MG7-Ag水平,結果發現82.8%的胃癌出現陽性結果,而其他腫瘤的陽性率分別是食道癌17.4%、結腸癌 44.4%、肝癌 0、腎癌 0、肺癌6.1%,說明在胃癌特異性很高。本研究結果顯示介入干預組與靜脈化療組在干預后血清MG7-Ag均呈下降趨勢,其可能的原因為MG7-Ag出現于正常人血液時,并不表示腫瘤的存在,它只是一種含量極低的、非特異性的抗原,抗體不對其產生應答,但是在致癌因子的作用下正常組織細胞發生膜表面糖蛋白結構上的改變,抗原決定簇隨即表達出質和量的變異,抗原分泌入血,胃癌患者抗原決定簇表達出質和量的較大變異,胃癌患者MG7-Ag的含量增加[12],而介入干預和靜脈化療改變了抗原決定簇表達的表達,MG7-Ag的含量下降,介入干預組與靜脈化療組組間比較有顯著性差異（F=4.356,P=0.042＜0.05）,介入干預組MG7-Ag的水平下降明顯,說明動脈介入化療對腫瘤的殺傷作用強,進一步改變了腫瘤抗原決定簇的表達,同時我們還觀察到介入干預組中MG7-Ag在干預后4周明顯低于干預后2周及干預前水平,比較均有顯著性差異,干預后4周與干預后2周比較亦有顯著性差異,,這也說明MG7-Ag與胃癌的發生發展密切相關,動態檢測MG7-Ag含量的變化可判斷療效,估計預后。

Hanahan[13]于1996年提出了“血管形成開關平衡假說”,認為血管的形成受血管形成抑制因子和血管形成促進因子的共同調控,腫瘤的生長、浸潤和轉移依賴于新生血管的生成,血管內皮生長因子（VEGF）是腫瘤誘導產生新生血管的主要細胞因子,因此VEGF的變化與腫瘤的控制、復發密切相關。VEGF一方面能與血管、淋巴管內皮細胞表面的受體結合,加速其內皮細胞的增值與分化促使腫瘤浸潤和轉移,另一方面可通過自分泌途徑與腫瘤細胞表面的受體結合,直接促進腫瘤生長[14]。目前有多個研究顯示胃癌患者血清VEGF的水平與其腫瘤的大小、浸潤的深度、淋巴結轉移及TNM分期相關而與其他臨床病例參數無關,故在中晚期胃癌中VEGF應有較高水平。本組結果顯示在靜脈化療組干預前、干預后2周、治療后4周的VEGF呈下降趨勢,干預后4周與及干預前比較有統計學差異,表明化療藥物可能在一定程度上有效地抑制新生血管生成、誘導腫瘤細胞凋亡從而使其表達VEGF的能力下降。在介入干預組中VEGF的水平干預后2周較干預前升高,而干預后4周是降低的,其原因可能是動脈插管灌注化療藥物,局部藥物濃度高,其藥物第一次通過腫瘤組織時絕大部分被吸收,造成腫瘤細胞大量壞死,同時高濃度的化療藥物可造成小血管炎和血管閉塞,導致腫瘤微環境缺氧明顯,大量實驗證實缺氧誘導缺氧因子（HIF-1）表達是上調VEGF表達的最主要的因素,因此在干預后出現一過性的VEGF升高,而后隨著側枝循環的建立及部分小血管的再通,殘存的腫瘤細胞減少,以及循環中化療藥物進一步誘導細胞凋亡,抑制癌細胞的增殖等原因使腫瘤細胞分泌VEGF明顯下降。

另外本組研究還觀察了兩組患者的sIL-6R干預前后的變化。本組研究結果顯示sIL-6R的水平介入干預組與靜脈化療組干預后4周均低于干預后2周及干預前,有顯著性差異（P＜0.05）,介入干預組與靜脈化療組比較組間差異有顯著性（F=4.389,P=0.041＜0.05）,介入干預組sIL-6R的水平變化較靜脈化療組明顯。研究表明細胞因子和細胞因子受體與腫瘤的發生發展密切相關,IL-6是一種多功能的細胞因子,在機體細胞因子網絡中起重要的作用。IL-6發揮作用必須其受體相結合,sIL-6R是由膜受體脫落而成,sIL-6R與其他膜受體功能不同,它是IL-6的激動劑,sIL-6R與IL-6特異性結合,形成sIL-6R/IL-6復合物,擴大了IL-6的作用范圍,研究發現IL-6參與多種腫瘤的發生、發展,并與腫瘤血管的生成有關,進而促進轉移與浸潤,而且sIL-6R也以自分泌的方式參與腫瘤的生長增殖調控,促進癌細胞的增殖。兩組干預后sIL-6R均降低,說明介入化療與靜脈化療均抑制了sIL-6R分泌,減低了對于IL-6的增強作用,sIL-6R分泌減少其結果是降低了腫瘤細胞的活動,抑制了腫瘤增殖、轉移與浸潤,介入干預組與靜脈化療組相比較sIL-6R下降的更為顯著,表明介入干預的作用更強,可能與局部化療藥物濃度高有關,監測sIL-6R水平變化對評估胃癌的療效及預后有一定意義。

綜上,通過對中晚期胃癌患者動脈介入干預前后血清MG7-Ag、sIL-6R、VEGF動態觀察,兩組上述三項指標在干預后均有變化,但介入干預組中MG7-Ag、VEGF、sIL-6R的水平變化較靜脈化療組明顯,故MG7-Ag、sIL-6R、VEGF可作為評估胃癌干預療效及預后的一個重要參考指標。

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