MT1、MT 2和3-MMP在60例喉癌中的檢測及臨床意義

張旭

浸潤與轉移被認為是惡性腫瘤的重要標志性特征之一，其對預后具有十分重要的影響。細胞外基質同基底膜的降解是惡性腫瘤開始浸潤與轉移邁出的第一步。基質金屬蛋白酶(MMPs)包括幾個具有重要功能的亞家族成員，其中膜型基質金屬蛋白酶(MT-MMP)具有能夠降解細胞外基質同基底膜的多種成分的功能，因此MT-MMP在多種腫瘤形成與發(fā)展過程中發(fā)揮著重要作用［1］。本組采用免疫組化的SABC法，檢測了MTl、2和3-MMP在喉癌相關組織中的表達，目的是分析其在喉癌浸潤與轉移過程中發(fā)揮的作用及其臨床意義。

1 材料與方法

1.1研究對象 選擇于2002年12月至2009年12月期間60例喉癌手術切除標本，均為原發(fā)性喉癌患者，所有患者術前均未做過放化療。其中男性33例，女性27例，年齡在35～82之間，平均58.2±8.5歲。根據(jù)淋巴結轉移情況進行劃分，其中32例為頸淋巴結轉移，28例無頸淋巴結轉移。根據(jù)組織學劃分，其中高分化鱗癌10例，中分化鱗癌35例，低分化鱗癌15例。按照原發(fā)部位劃分，其中20例為聲門上型，31例為聲門型，9例為聲門下型。

1.2免疫組化染色 免疫組化檢測的60例喉癌手術切除標本均通過福爾馬林固定，取材均在24 h內完成，通過石蠟包埋后連續(xù)切片。采用SABC方法進行染色，檢測用SABC免疫組織化學所需的各種試劑盒與兔抗人MTl、2和3-MMP的多克隆抗體均購自福建邁新生物工程有限公司，根據(jù)試劑盒說明書進行，陽性對照使用我院的乳腺癌陽性切片，陰性對照為PBS，在試驗中用于替代第一抗體。MT1、2和3-MMP分子的免疫組化陽性染色表現(xiàn)為細胞漿中出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒沉著。

1.3統(tǒng)計學處理 率的比較采用卡方檢驗方法，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

癌旁非癌組織與腫瘤組織的MTl、2和3-MMP陽性率見表1，3個分子在腫瘤組織的表達陽性率顯著高于癌旁非癌組織(P＜0.01)。

表1 MTl、2和3-MMP在癌組織與癌旁非癌組織的陽性表達結果(例，%)

3 討論

浸潤與轉移是一個多環(huán)節(jié)、多因素決定的過程，是惡性腫瘤的重要標志性特征之一。這個過程涉及到細胞外基質與基底膜降解、細胞黏附能力變化、腫瘤細胞的遷移運動以及新生血管形成等影響因素。細胞外基質與基底膜的主要是由膠原蛋白、纖維連接蛋白、層連蛋白、氨基聚糖和蛋白聚糖等生物大分子、巨分子構成。目前觀點認為細胞外基質與基底膜的降解為腫瘤細胞進入血循環(huán)提供入口，從而有助于轉移發(fā)生。基質金屬蛋白酶是一類鋅離子依賴性的蛋白酶，具有有效降解細胞外基質與基底膜各種成分的功能，其中MMP-2是能夠降基底膜的主要成分膠原IV，進而參與多種腫瘤浸潤與轉移過程。膜型基質金屬蛋白酶是基質金屬蛋白酶眾多亞家族成員之一，它們都具有激活MMP-2酶原的功能，使其變?yōu)橛谢钚缘腗MP-2。MT1、MT2和MT3-MMP分子結構類似，在羧基末端均為一個跨膜結構域，研究表明這種跨膜結構域對于激活細胞膜表面MMP-2酶原是必不可少的結構。最近研究證實MTl、MT2和MT3-MMP除了能夠對MMP-2酶原發(fā)揮激活作用外，還可以有效地降解細胞外基質成分，例如，MT1-MMP除具有降解明膠的功能外，還具有消化多種類型的膠原的功能［1］。MT2-MMP可以降解細胞外基質的各種大分子，例如纖維連接蛋白與層連蛋白等，MT3-MMP對III型膠原降解具有重要作用。盡管MTl、MT2和MT3-MMP之間的氨基酸序列具有50%以上的同源性，但三者在不同類型的腫瘤組織中具有不同的表達模式，例如，在乳腺癌組織中MT1-MMP的表達量非常高，而MT2-MMP的表達稍弱些，MT3-MMP則未檢測到表達;在腎癌組織中，這三種MT-MMP都具有較高的表達量［2］。本組結果顯示:MTl、MT2和 MT3-MMP蛋白在癌旁正常組織中的表達顯著低于喉癌組織，其中MT1-MMP的表達陽性率最高，為85.0%，MT2與MT3-MMP的陽性率分別為56.6%與51.7%，但癌旁正常組織無基底膜重建過程發(fā)生，因此其表達量較低或檢測不到表達。不同腫瘤的原發(fā)部位與不同分化程度的癌細胞，其分泌膜型基質金屬蛋白酶MTl、MT2和MT3-MMP的量差別不大。通常認為喉癌組織或細胞中MT1、2和3-MMP基因轉錄與翻譯水平增強，可能是造成喉癌侵襲與轉移的主要原因。總之，膜型基質金屬蛋白酶MT1、2和3-MMP在喉癌發(fā)生與轉移過程中發(fā)揮重要作用，MTl-MMP是判斷喉癌淋巴結轉移與否的重要指標。早期阻斷MT1、2和3-MMP的表達，能夠抑制喉癌的浸潤與轉移，MT1、2和3-MMP有望成為新抗癌藥物與基因治療的重要靶點。

［1］ 王迎春，李玉蘭．基質金屬蛋白酶-2及其組織型抑制因子在肝細胞癌浸潤轉移中的作用．中國醫(yī)師雜志，2006，(9):1274-1275．

［2］ Nakamura H，Ueno H，Yamashlta K，eta1．Enhanced Production and Activation of Pmgelatinase A Mediated by Membrane-Type 1 Marx Metalloproteinasc in Human Papillary Thyroid Carcinomas．Cancer Research，1999，59:467-473．