Ki-67在宮頸癌Ⅲ期化療前后的表達及臨床意義

侯 軍 蔡尚霞 (吉化集團公司總醫院,吉林 吉林 132022)

近年來,核抗原(Ki-67)已被廣泛地應用于測定各種腫瘤的增殖活性,是監測人類惡性腫瘤轉歸的重要指標。已有報道應用其抗體定量分析腫瘤的生長分數、腫瘤的分級、增生程度及預測腫瘤的預后〔1〕。Ⅲ期宮頸癌是臨床常見的宮頸癌分期,化療為其主要的治療手段。本研究通過檢測Ⅲ期宮頸癌化療前后 Ki-67的表達,旨在探討其在評價化療效果中的意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料 收集我院 2008年 1月至 2011年 1月Ⅲ期宮頸癌接受化療術的存檔蠟塊 60例,均附有詳細的病歷資料。年齡 53～75〔平均(61.2±7.6)〕歲,病程 8～24個月。宮頸癌的診斷和臨床分期均符合 2000年國際婦產科聯盟(FIGO)標準〔據病例資料證實癌腫擴散盆壁和(或)累及陰道下 1/3且出現腎功能異常〕〔2〕。所有患者均接受化療方案,以順鉑 +長春新堿 +平陽霉素(PVB)方案為主。

1.2 檢測方法 主要試劑Ki-267抗體,S-P免疫組化試劑盒及二氨基聯苯胺(DAB)顯色試劑盒均購自福州泰普。所有標本均經 10%甲醛固定,石蠟包埋,切片厚 0.4μm,常規蘇木素-伊紅(HE)染色,光鏡下行細胞形態學觀察,以確定病理診斷及分組。免疫組化染色采用 S-P法,按說明書操作。陽性對照片為已知宮頸癌陽性片,磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗為陰性對照片。

1.3 結果判定 光鏡下細胞核出現棕黃色顆粒確定為Ki-67陽性細胞。根據以下公式計算得到Ki-67陽性細胞指數及變化值。陽性細胞指數(%)=總的陽性細胞數/總的腫瘤細胞數 ×100%。變化值(%)=(化療前陽性細胞指數-化療后陽性細胞指數)×100%。臨床療效評估:完全緩解(CR):可見的腫瘤病灶完全消失,維持 4 w以上;部分緩解(PR):基線病灶長徑總和縮小≥30%,維持 4w以上;穩定 (SD):基線病灶長徑總和縮小但未達 PR或有增加但未達進展(PD);PD:基線病灶長徑總和增加≥20%或出現新病灶。

1.4 統計學分析 應用SPSS17.0統計軟件進行處理,計量資料結果以±s表示,同組間比較用配對 t檢驗,兩組間比較用成組 t檢驗,各組間比較用單因素方差分析,兩變量間相關性用 Pearson直線相關分析。

2 結 果

臨床 CR組化療后較化療前 Ki-67陽性細胞指數明顯下降,差異具有統計學意義(P＜0.05),臨床PR組化療后較化療前 Ki-67陽性細胞指數明顯下降,差異具有統計學意義(P＜0.05),臨床SD+PD組化療后較化療前Ki-67陽性細胞指數無明顯差異(P＞0.05)。見表 1。

表1 不同臨床療效治療前后 Ki-67陽性指數(±s)

表1 不同臨床療效治療前后 Ki-67陽性指數(±s)

組別 n Ki-67陽性細胞指數 P值臨床 CR組化療前 20 62.82±8.32化療后 20 15.56±5.22 ＜0.05臨床 PR組化療前 20 54.98±15.41化療后 20 26.15±11.41 ＜0.05臨床 SD+PD組化療前 20 40.72±16.38化療后 20 40.18±12.13 ＜0.05

3 討 論

Ki-67抗原是應用霍杰金病 L428細胞株的核成分接種小鼠而制備出的單克隆抗體,它的表達與哺乳動物細胞中細胞周期進展密切相關,是一種貫穿表達于增殖期細胞中的核抗原〔3〕。它是由分子量為 345 kD和 395 kD的兩條多肽鏈組成的核蛋白,其基因定位于第 10號染色體上,是一種由 1 095個堿基對編碼的 DNA結合蛋白,近核仁區,是目前較為肯定的核增殖標志蛋白,在調節細胞增殖方面起重要作用〔4〕。Ki-67在宮頸癌的表達與宮頸癌的發生、發展及惡性程度有關。研究證實,大多數的化療藥物都是通過抑制細胞增殖和誘導細胞凋亡來清除腫瘤細胞的。腫瘤細胞受到化療藥物打擊后,其生長增殖受抑,凋亡增加,而且對化療越敏感的腫瘤細胞,增殖狀態受到抑制越明顯〔5〕。本研究中在不同臨床療效組化療前后 Ki-67表達變化情況亦不相同,臨床CR組和臨床PR組Ki-67的陽性細胞指數明顯下降,而臨床SD+PD組下降的趨勢不明顯。這可能是因為正常組織器官內細胞在諸多因子的調控下,增殖、凋亡間處于動態平衡。惡性腫瘤的發生在很大程度上取決于細胞增殖與凋亡的平衡和轉化,當腫瘤細胞增殖、凋亡調控失常,即增殖大于細胞凋亡時,腫瘤就可能發展;反之,腫瘤就會縮小甚至消亡。增殖活性強、Ki-67表達較高的腫瘤比表達低者組織學反應更顯著,因此化療前 Ki-67陽性指數較高,而化療后數值顯著降低,可協助判定宮頸癌患者對新輔助化療的反應。因而 Ki-67充分反映了腫瘤細胞增殖的狀態,下降越明顯,則化療的療效也就越為肯定,可能成為評價化療療效的一個重要的參考指標。

1 劉麗華,趙富璽,郭俊成,等.宮頸脫落細胞中cyclin E和 Ki-67的表達及意義〔J〕.中華腫瘤防治雜志,2006;13(9):666-8.

2 樂 杰 .婦產科學〔M〕.第 5版 .北京:人民衛生出版社,2001:314.

3 宋水勤,張國楠.宮頸癌新輔助化療現狀〔J〕.實用醫院臨床雜志,2005;2(2):22-5.

4 張亞靜,拉萊?蘇祖克.p16、Ki-67在子宮頸上皮內瘤變及子宮頸鱗癌中的表達及意義〔J〕.新疆醫科大學學報,2007;30(4):372-4.

5 Bean SM,Eltoum l,Horton DK,et al.Immunohistochemical expression of p 16 and Ki-67 correlates with degree of analintraepithelialneo plasia〔J〕.Am JSurg Pathol,2007;31(4):555-61.