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尿素試劑對葡萄糖測定有攜帶污染

2011-04-13 04:08:46付柳平
實驗與檢驗醫學 2011年6期
關鍵詞:污染檢測

付柳平

(劉公廟鎮衛生院,江西 樟樹 331212)

筆者使用TC6060全自動生化分析儀檢測同一標本的腎功能常規和葡萄糖的過程中,發現尿素試劑對葡萄糖測定有攜帶污染,當改變測定項目的分析順序,可有效避免尿素試劑對葡萄糖測定帶來的攜帶污染。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器 TC6060全自動生化分析儀,江西特康科技有限公司生產。

1.2 試劑

1.2.1 尿素試劑 江西特康科技有限公司生產。單液體試劑,為酶聯速率法。試劑組成:Tris緩沖液115mmol/L,谷氨酸脫氫酶>800U/L,NADH0.35mmol/L,二磷酸腺苷1.5mmol/L,α-酮戊二酸7.5mmol/L,尿素酶>40000U/L,非反應性填充物及穩定劑適量。

1.2.2 葡萄糖試劑 江西特康科技有限公司生產。雙液體試劑,為GOD-POD法。試劑組成Ⅰ:磷酸鹽緩沖液110mmol/L,葡萄糖氧化酶250U/L,4-羥基苯甲酸10mmol/L,4-氨基安替比林0.3mmol/L。試劑Ⅱ:磷酸鹽緩沖液110mmol/L,過氧化物酶250U/L,非反應性填充物及穩定劑適量。

1.2.3 葡萄糖標準液 江西特康科技有限公司生產。批號:542716443,靶值:5.05mmol/L。

1.3 方法

1.3.1 葡萄糖測定參數 方法:終點法;溫度:37℃;波長:510nm;樣本用量;4.0μl;試劑Ⅰ用量:240μl,反應時間:120s;試劑Ⅱ用量:60μl,反應時間:400s;檢測點數:3。

1.3.2 尿素測定參數 檢測方法:兩點法;溫度:37℃;主波長:340nm;樣本用量:3.0μl;試劑用量:300μl;反應時間:60s;檢測點數:15。

2 結果

2.1 取葡萄糖標準液,單獨測定GLU10次,測得其均值為4.92mmol/L。

2.2 用尿素試劑當作病人標本,測定葡萄糖10次,測得其均值為22.83mmol/L。

2.3 攜帶污染試驗 按先測定尿素,再測定葡萄糖的分析程序,測定葡萄糖10次,測得其均值為9.20mmol/L,平均偏差值為:9.20-4.92=4.28,偏差率為:4.28/4.92=87%。

2.4 改變項目分析順序,具體為:由原來尿素→葡萄糖,改變為尿素→總膽固醇→葡萄糖。用多份混合血清單獨測定葡萄糖10次,測得其均值為5.47mmol/L,然后按上述改變后的分析順序測定葡萄糖10次,測得其均值為5.56mmol/L,平均偏差率為:(5.56~5.47)/5.47=1.65%。實驗表明:通過改變項目分析順序,可以避免尿素試劑對葡萄糖測定帶來的攜帶污染。

3 討論

任何品牌的全自動生化分析儀的自凈率都是有限的[1],檢測試劑排序不當就會出現不可逆轉的誤差[2],直接影響檢測結果的可靠性[3],很容易給臨床造成無效數據,影響臨床診療水平。尿素試劑對葡萄糖測定有攜帶污染,通過用尿素試劑當作病人標本進行葡萄糖測定,其均值高達22.83mmol/L,而尿素試劑作為標本分別與葡萄糖試劑Ⅰ,Ⅱ進行葡萄糖測定,二者測定值均幾乎為零。具體原因,江西特康科技有限公司的工程師確認為尿素試劑成分中的葡萄糖直接參加了葡萄糖氧化酶—過氧化物酶的反應。因此我們在工作過程中,既要有敏銳的觀察力,又要對所用試劑的成分有足夠了解,設計最佳的項目分析順序,防止試劑針的攜帶污染。

[1]郭 杰.全自動生化分析儀的精密度和交叉污染率的評價[J].現代檢驗醫學雜志,2004,19(2):140-142.

[2]韓來新.總膽固醇試劑對總膽汁酸測定有攜帶誤差[J].現代檢驗醫學雜志,2004,19(1):51-53.

[3]鄭家齊.編.醫學檢驗質量控制[M].第1版,北京:人民衛生出版社,1997:269-271.

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