MMP-2、TIMP-2在腦膜瘤組織中的表達及臨床意義

厲宗祥，曾現偉，季泰令，潘 順

(1濰坊醫學院，山東 濰坊 261042;2濰坊醫學院附屬醫院)

腦膜瘤多為良性腫瘤，生長緩慢，約0.9% ～10.6%的腦膜瘤呈惡性并具有侵襲性，術后復發率高。2005年3月～2010年1月，我們采用免疫組化SP法檢測腦膜瘤組織中基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)與基質金屬蛋白酶組織抑制因子-2(TIMP-2)的表達，旨在進一步探討其在腦膜瘤發生、發展中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料 選取濰坊醫學院附屬醫院手術切除的腦膜瘤組織標本35份，患者男14例，女21例;年齡2～73歲，平均50歲。均經病理證實，且符合WHO關于中樞神經系統腫瘤的分類標準［1］。參考病理結果及影像資料，將腦膜瘤分為惡性腦膜瘤15份(惡性組)，良性腦膜瘤20份(良性組)，兩組一般資料無統計學差異。試劑:小鼠抗人TIMP-2單克隆抗體，工作濃度1∶100;兔抗人MMP-2多克隆抗體，工作濃度1∶100;IgG-1/2KITSABC小鼠/兔免疫組化試劑;DAB試劑盒。以上試劑均購自北京中杉生物技術公司。

1.2 MMP-2、TIMP-2表達檢測 所有組織標本均經10%中性甲醛固定，常規脫水后石蠟包埋，4 μl厚連續切片進行免疫組織學染色。采用免疫組化SP法，切片常規至水，微波修復抗原，3%H2O2滅活內源性過氧化物酶，正常血清封閉，滴加一抗，濃度為1∶100，4℃過夜。DAB顯色，蘇木素復染，梯度酒精脫水干燥，二甲苯透明，中性樹膠封片。結果判斷標準:MMP-2和TIMP-2的免疫著色部位均為胞質和胞膜，以胞質或胞膜呈均一棕黃色顆粒者為陽性，無棕黃色著色顆粒的細胞為陰性。在×400視野下計數200個腫瘤細胞核范圍為一個視野，計算5個視野免疫反應陽性細胞百分比平均值。每張玻片先經一人觀察，另一人復查。根據陽性腫瘤細胞占所有腫瘤細胞的比率，記錄為半定量結果:未染色為(-)，陽性細胞5% ～20%且染色強度較弱為(+)，21～50%且染色強度中等為(++)，＞50%且染色強度較強為(+++)。分析 MMP-2與TIMP-2表達的相關性。

1.3 統計學方法 采用SPSS16.0統計軟件，應用χ2檢驗，兩指標在腦膜瘤中的相關性采用Spearman等級相關分析法。檢驗水準α=0.05。

2 結果

惡性組及良性組MMP-2陽性表達率分別為73.3%(11/15)、15%(3/20)，TIMP-2 陽性表達率分別為13.3%(2/15)、80%(16/20)，兩組比較 P 均＜0.01。腦膜瘤中MMP-2與TIMP-2表達呈負相關(r=-0.545，P ＜0.01)。

3 討論

腦膜瘤是中樞神經系統常見腫瘤之一，其人群發生率為6/100000，約占顱內原發腫瘤的20%［2］。其中女性多于男性，生育期(30～50歲)患者約占80%，而在兒童中少見。腦膜瘤多為良性腫瘤，常與硬腦膜粘連并可侵犯硬腦膜，生長緩慢，約0.9% ～10.6%的腦膜瘤呈惡性并具有侵襲性生物行為，惡性腦膜瘤發病年齡輕、病程短，病情進展迅速［3］。術前CT、MRI檢查可確診大多數腦膜瘤，但鑒別其良惡性較困難。惡性腦膜瘤治療困難，術后復發率高。

Ⅳ型膠原是硬腦膜的關鍵成分，起硬腦膜屏障作用，能抵抗炎癥或腫瘤造成的吸收和破壞。MMP-2、MMP-9以細胞外基質中的Ⅳ型膠原為主要底物，與腫瘤的侵襲和轉移密切相關。TIMPs是機體內存在的MMPs特異性抑制劑，是一組多基因家族的編碼蛋白，目前已克隆出4種，分別為TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3 和 TIMP-4［4］。它們能與 MMPs 形成復合抑制物抑制MMPs，下調MMPs細胞外基質降解活性，抑制腫瘤血管生成，從而抑制瘤細胞的侵襲性［5，6］。本研究惡性組MMP-2陽性表達率高于良性組，TIMP-2陽性表達率低于良性組，P均＜0.01;腦膜瘤中MMP-2與TIMP-2表達呈負相關。表明從良性腦膜瘤并進一步轉變為惡性腦膜瘤的過程中，MMP-2表達增多，TIMP-2表達減少均在其中起著一定的作用，參與了腦膜瘤的惡變過程。

總之，MMP-2可作為判斷腫瘤惡變的指標，TIMP-2可作為腫瘤非惡變的指標。其可對腦膜瘤預后評估、治療方法有指導作用。

［1］張福林，李振新.應用WHO神經系統腫瘤新分類使腦腫瘤診斷規范化［J］.中國神經精神疾病雜志，2001，27(2):151-152.

［2］王忠誠.神經外科學［M］.武漢:湖北科學技術出版社，2005:587-588.

［3］Carrasco JR，Jacqueline R，Penne RB，et al.Optic nerve sheath meningiomas and advanced treatment options［J］.Current Opinion Ophthalmology，2004，15(5):406-410.

［4］Velasco G，Lopez-Otin C.Strategies for cloning new MMPs and TIMPs［J］.Methods Mol Biol，2001，(151):25-44.

［5］Zucker S，Hymowitz M，Conner C，et al.Measurement of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases in blood and tissues［J］.Ann NY Acad Sci，1999，(878):212-217.

［6］Liotta LA，Steeg PS，Stetler-Stevenson WG.Cancer metastasis and angiogenesis:an imbalance of positive and negative regulation［J］.Cell，1991，64(2):327-336.