利用GC－MS法比較三種不同當歸揮發油提取方法的研究

孫宇靖 王亞麗

甘肅中醫學院，甘肅 蘭州 730000

當歸為傘形科植物當歸Angelica sinensis(Oliv.)Diels的干燥根，味甘、辛、溫。具有補血活血、調經止痛之功效［1］。其揮發油主要含藁本內酯、正丁烯酰內酯等多種成分。國內外研究者對當歸揮發性成分的提取分析方法進行了很多研究［2－4］，多采用水蒸氣蒸餾法和超臨界CO2萃取法進行提取，而采用有機溶劑超聲提取法提取當歸藥材揮發油的研究較少。本文分別采用水蒸氣蒸餾和有機溶劑超聲提取法對當歸揮發油進行提取，采用GC－MS法進行分析對比，得到當歸揮發油的最佳提取方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 HP6890/5975N型氣相色譜－質譜聯用儀;HY－04型高速粉碎機，北京環亞天元機械技術有限公司;AS7240B型超聲器，天津奧特賽恩斯儀器有限公司;HHS型恒溫水浴鍋，余姚市檢測儀表廠;SHZ－D(A)型循環水真空泵，天津華鑫儀器廠。

1.2 試藥 正己烷 (分析純):上海中秦化學試劑有限公司;石油醚 (分析純):天津市恒興化學試劑制造有限公司。當歸采自甘肅岷縣中藥材種植示范園，由甘肅中醫學院生藥教研室鑒定。

2.1 進樣條件

2.1.1 色譜條件 升溫程序為:70℃開始，以4℃/min升至130℃，再以 2℃/min升至170℃，再以 8℃/min升至250℃，保留10 min;He氣柱流量1.0mL/min;進樣口溫度:250℃;進樣量:0.2μL。

2.1.2 質譜條件 標準EI源 (轟擊能量為70eV)，離子源溫度230℃，掃描質量范圍40－550aum。

2.2 供試品溶液的制備

2.2.1 水蒸氣蒸餾法 取干燥當歸藥材粉碎，過40目篩。稱取當歸藥材粉末80.00g于圓底燒瓶中，加適量水與玻璃珠數粒，振搖混合后浸泡過夜，按2010版《中國藥典》方法［5］提取8小時，用旋轉蒸發儀除去溶劑，所得揮發油用正己烷定容于10mL量瓶中，用0.22μm微孔濾膜過濾，備用。

2.2.2 有機溶劑超聲提取法 取干燥當歸藥材粉碎，分別精密稱取粉末5.00g于100mL具塞錐形瓶中，加50mL正己烷和石油醚溶劑超聲提取30min，過濾，重復提取一次，合并提取液，離心上清液用定容于10mL量瓶中，用0.22μm微孔濾膜過濾，備用。

3 結果

3.1 最佳進樣條件的確定 參考有關當歸GC－MS方面的文獻報道，綜合考慮峰面積、峰個數、分離度、實驗時間等幾個因素后，確定2.1中的進樣條件為最佳進樣條件。表1為篩選過程中進樣的色譜條件，其對應的色譜圖見圖1，最后確定進樣條件為6(圖2)。

表1 色譜進樣條件篩選

圖1 GC－MS進樣條件篩選圖

圖2 最佳進樣條件的GC－MS色譜圖

3.2 方法學考察

3.2.1 精密度考察 取岷縣當歸藥材供試品溶液按2.1進樣條件連續進樣5次，測定指紋圖譜。計算得圖譜相似度＞0.97，各共有峰面積的RSD＜0.72%，符合指紋圖譜要求，精密度良好。

3.2.2 穩定性考察 取岷縣供試品溶液，分別在0，4，8，24、48h時間點測定色譜指紋圖譜。計算得圖譜相似度＞0.90，各共有峰面積的RSD＜1.80%，表明樣品在36h內穩定性良好。

3.3 不同提取方法提取的揮發油比較 取岷縣的當歸藥材，按2.2中的不同方法制備供試品溶液，所得揮發油的物理性質見表2。取供試品溶液按2.1進樣方法進樣，所得色譜圖見圖3。

表2 不同提取方法的揮發油比較

4 討論

4.1 由表2，表3和圖3可知，正己烷超聲提取法的提取藥材量小，揮發油得率高，提取時間短，操作簡單，是當歸揮發油提取的最佳方法。但正己烷提取物不可避免的含溶劑氣味，因此此方法更加適用于實驗室當歸藥材揮發油的提取。

圖3 當歸不同提取方法所得揮發油的色譜比較圖

4.2 本文建立的當歸藥材GC－MS分析條件具有良好的精密度和穩定性，可為以后當歸藥材揮發油的研究提供依據。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典［S］.2010年版一部.北京:中國醫藥科技出版社，2010:124.

［2］劉琳娜，梅其炳，程建峰，等.當歸揮發油的化學成分分析［J］.中成藥，2005，27(2):204－206.

［3］張守堯，王鵬，張忠義，等.超臨界CO2萃取－分子蒸餾對當歸的提取分離［J］.解放軍藥學學報，2003，19(5):375－377.

［4］賀殿，張國福，邵長江，等.當歸的兩種提取工藝研究［J］.中成藥，2005，27(5):599－601.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥2010年版一部［M］.北京:中國醫藥科技出版社，附錄63.